甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1) cDNA的克隆和功能鉴定
2016-07-15谭太龙罗海燕刘睿洋官春云
谭太龙 冯 韬 罗海燕 彭 烨 刘睿洋 官春云
湖南农业大学农学院/国家油料作物改良中心湖南分中心, 湖南长沙 410128
甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1) cDNA的克隆和功能鉴定
谭太龙 冯 韬 罗海燕 彭 烨 刘睿洋 官春云*
湖南农业大学农学院/国家油料作物改良中心湖南分中心, 湖南长沙 410128
摘 要:磷脂二酰甘油酰基转移酶(phospholipids∶diacylglycerol acyltransferase, PDAT1)是植物三酰甘油(triacylglycerol, TAG)合成的关键酶。本文在甘蓝型油菜湘油15号cDNA中克隆到3个PDAT1全长编码序列(coding sequence,CDS), 经比对分别定位于A02、A10、C09染色体, 分别命名为BnPDAT1-A02、BnPDAT1-A10和BnPDAT1-C09, 其序列长分别为1998、2002和2005 bp, 各自编码665、666、667个氨基酸。预测BnPDAT1基因编码蛋白定位于细胞质膜, 具有典型的PDAT1保守结构域。多序列比对和进化分析表明, BnPDAT1基因编码蛋白与甘蓝、拟南芥、亚麻芥PDAT1蛋白具有较高的同源性。酵母互补实验证实, 该基因编码蛋白具有PDAT1酶活性。BnPDAT1基因在湘油15号中的表达现先上升后降低趋势, 在开花后25~30 d达最大值, 但3个拷贝的表达变化规律存在差异。
关键词:甘蓝型油菜; 磷脂二酰甘油酰基转移酶; 基因克隆; 酵母互补实验
本文由国家自然科学基金项目(31401419), 湖南省教育厅优秀青年项目(13B051), 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A104, 2012AA101107)和湖南省作物种质资源与创新利用重点实验室科学基金开放项目(11KFXM08)资助。
This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (31401419), Outstanding youth project of Hunan Provincial Education Department (13B051), the National High Technology Research and Development Program of China (2011AA10A104,2012AA101107), and Science Foundation of Hunan Provincial Key Laboratory for Germplasm Innovation and Utilization in Crop (11KFXM08).
第一作者联系方式∶ E-mail∶ ttl205@aliyun.com
URL∶ http∶//www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20160311.1605.016.html
甘蓝型油菜通过不同途径合成三酰甘油(triacylglycerol, TAG)并形成油体储藏于种子中, 这种储藏油脂是我国最重要的油料来源之一, 对于保证食用油供给十分重要。我国生产的甘蓝型油菜含油量为40%左右, 与加拿大等发达国家尚具较大差距, 提高菜籽含油量可明显提高我国油菜的市场竞争力,产生可观的社会效益[1]。……
