李祖红，李传响

(1.海南卫康制药(潜山)有限公司,安徽 安庆　246300；2.安庆市食品药品检验中心,安徽 安庆　246001)



高效液相色谱法测定马来酸氨氯地平片的含量

李祖红1，李传响2

(1.海南卫康制药(潜山)有限公司,安徽 安庆246300；2.安庆市食品药品检验中心,安徽 安庆246001)

摘要：目的建立高效液相色谱法测定马来酸氨氯地平片的含量。方法采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相；检测波长365 nm；流速1.0 mL·min-1。结果马来酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1的线性范围内呈良好的线性关系，r=0.999 9(n=6)，平均回收率为99.4%，RSD=0.29%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、专属性好，适于马来酸氨氯地平片含量控制。

关键词：氨氯地平/分析；色谱法,高压液相；回收率；药物稳定性

氨氯地平(amlodipine)是三代钙拮抗剂，马来酸氨氯地平是氨氯地平与马来酸所成的盐，有较强的外周血管和冠状动脉扩张作用[1-2]。马来酸氨氯地平在国内已上市的剂型有片剂和胶囊剂，由于本品临床疗效高，毒副作用小，已成为临床用于降压的一线药物，应用非常广泛，但是其含量测定的检测标准还未纳入中国药典。本文采用以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相；检测波长365 nm[3-4]的检测条件对马来酸氨氯地平片含量的测定方法进行研究。

1仪器与试药

1.1仪器岛津HPLC色谱仪(LC-20AT泵，SPD-M20A检测器，SIL-20A进样器，CTO-20AC柱温箱)，Lcsolution色谱工作站；梅特勒AB265-S电子分析天平；梅特勒AG8603精密pH计。

1.2试药样品(市场抽验，批号：140823；150402；150705)；对照品(中国药品生物制品检定所提供，纯度为99.8%，批号为20081208)。甲醇(色谱纯，国药集团)；水为重蒸馏水，乙酸铵(分析纯)。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0.05 mol·mL-1乙酸铵(70∶30；v/v)；检测波长365 nm；流速1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；进样量：10 μL；理论塔板数按氨氯地平色谱峰计算应不低于3 000，见图1。

2.2供试品及对照品溶液制备

2.2.1供试品溶液制备取本品20片，研细，精密称取细粉适量(约相当于氨氯地平8 mg)，置于100 mL量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)适量，超声5 min溶解，并稀释至刻度，振摇，滤过，取续滤液作为供试品溶液

2.2.2对照品溶液制备精密称取马来酸氨氯地平对照品15 mg(实际称量14.5 mg，相当于氨氯地平11.2 mg)，置于50 mL容量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)适量超声振荡5 min溶解，并稀释至刻度，制成每1 mL中约含224.0 μg的溶液作为对照品溶液。

2.3线性关系考察取“2.2.2”项下对照品溶液(224.0 mg·L-1)适量，分别用水稀释配成22.4、44.8、67.2、112.0、224.0、336.0 mg·L-1。按“2.1”色谱条件项下，取20 μL进样分析，记录峰面积，并以峰面积(A)与样品浓度(C)作线性回归，回归方程为：A=20 870.9C+731.2，相关系数r=0.999 9，马来酸氨氯地平在线性范围22.4～336.0 mg·L-1内呈良好的线性关系。

对照品色谱图

样品色谱图

注：1.马来酸；2.氨氯地平。

图1马来酸氨氯地平高效液相色谱图

2.4精密度试验按“2.3”线性关系考察项下方法，用水稀释成高、中、低对照品溶液(22.4、67.2、224.0 mg·L-1)，分别连续进样3次，记录色谱图和峰面积，计算RSD分别为：0.20%、0.17%、0.12%(n=3)，结果具有良好精密度。

2.5稳定性研究取“2.2.1”项下供试品溶液80 mg·L-1，室温下放置，按“2.1”色谱条件项下操作，分别于0、2、4、8、12 h进样10 μL，记录色谱图，结果表明：供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.6回收率试验精密称取马来酸氨氯地平对照品溶液15、20、25 mg，加入已知准确浓度的样品(批号150705)溶液中，照“2.2.1”项下方法溶解，并加水稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液5 mL置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，取20 μL进样，记录色谱图；另取马来酸氨氯地平对照品溶液，按“2.1”色谱条件项下操作，计算回收率，得回收率平均值为99.4%，RSD为0.29%，结果见表1。

2.7样品测定取3种不同批次的样品，按“2.2.1”供试品溶液制备项下操作，照“2.1”色谱条件，进样10 μL分析，记录色谱图，计算三批样品的含量，结果见表2。

表1　样品回收率测定结果

表2　样品含量测定结果

3讨论

参考有关文献[5-12]，对马来酸氨氯地平的吸收波长、溶剂、及流动相进行反复试验比较，最终选定以(9→1 000)盐酸溶液为溶剂溶解，有效改善了氨氯地平溶解性的问题，在365 nm波长处测定，使测定结果更加准确，甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相的试验条件，最适合本品溶解，准确定量，为制订科学的检验标准提供参考依据。

本文建立马来酸氨氯地平片含量的测定方法，并对测定方法给以验证，同时将三批样品测定结果与马来酸氨氯地平的现行国家药品标准[4]进行比较，不存在显著差异，反而更好的地改善了其溶解度，使测定结果更准确。实验结果表明，马来酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系；杂质不干扰含量测定；因此，所建立含量测定的方法简便快速、准确、专属性好，能够有效的控制马来酸氨氯地平片的质量。

参考文献

[1]黄乐珊,朱秋玲,朱仪.氨氯地平的药理作用与临床应用[J].现代医院,2011,11(12):68-70.

[2]徐伟,王吉耀.氨氯地平和依那普利对老年高血压病患者生活质量的影响[J].中国临床医学,2001,8(2):120-123.

[3]陈浩.紫外分光光度法测定氨氯地平的含量[J].海峡药学,2014,26(9):77-78.

[4]国家药典委员会.国家药品标准WS1-(X-156)-2003Z[S]:X38-X100.

[5]闫晓前.马来酸氨氯地平含量测定方法研究[J].化工技术与开发,2011,40(4):36-37.

[6]毛柯,陈宁,卢定强.坎地沙坦酯氨氯地平片含量测定[J].药学与临床研究,2014,22(3):226-227.

[7]王康蕊,严相平,谢浩.HPLC法测定缬沙坦氨氯地平片含量[J] .安徽医药,2012,16(10):1632-1633.

[8]汤韶坛,谢佳琪,苟帮润,等.高效液相色谱法测定苯磺酸氨氯地平的含量[J].中国药业,2014,23(23):57-58.

[9]相文杰,叶靖,田志杰,等.高效液相色谱法同时测定复方氨氯地平片中苯磺酸氨氯地平和赖诺普利的含量[J].药学与临床研究,2012,20(3):270-272.

[10] 吴琼,王晓黎 ,高广慧.超高效液相色谱法(UPLC)测定苯磺酸氨氯地平片含量方法学验证[J].中国科技纵横,2013(15):76.

[11] 王亚静,邓红,张蜀,等.超高效液相色谱法测定氨氯地平贝那普利胶囊中两种成分的含量[J].医药导报,2014,33(4):493-495.

[12] 杜迎翔,陈俊,狄斌.马来酸氨氯地平片的高效液相色谱分析研究[J].中国新药杂志,2002,11(12):944-946.

HPLC determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets

LI Zu-hong1，LI Chuan-xiang2

(1.HainanWeikangPharmaceutical(Qianshan)Co.,Ltd,Anqing,Anhui246300，China；2.AnqingInstituteforFoodandDrugControl，Anqing,Anhui246001,China)

Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets.MethodsThe separation was performed on a Kromasil C18column (4.6 mm×250 mm，5 μm).The mobile phase was composed of methanol-0.05 mol·L-1ammonium acetate (70∶30) at the flow rate of 1.0 mL·min-1.The detection was carried out with a UV detector at 365 nm.ResultsThe calibration curves were linear between 22.4～336.0 mg·L-1(r=0.999 9,n=6),and the average recovery was 99.4%,RSD=0.29%(n=9).ConclusionsThe method is simple,rapid,accurate and suitable for the determination of amlodipine maleate tablets.

Key words:Amlodipine/analysis;Chromatography,high pressure liquid;Retrieving rate;Drug stability

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.06.013

(收稿日期：2016-01-18，修回日期：2016-04-08)