张正英，陈玉梁

( 1.甘肃省农业科学院，兰州　730070；2.甘肃省农业科学院 生物技术研究所，兰州　730070)

甘蓝过量表达硝酸还原酶基因对硝酸盐积累的影响

张正英1，陈玉梁2

( 1.甘肃省农业科学院，兰州730070；2.甘肃省农业科学院 生物技术研究所，兰州730070)

为探索过量表达硝酸还原酶基因对甘蓝(BrassicaoleraceaL. var.capitataL.)硝酸盐积累的影响，以‘中甘11号’下胚轴为外植体，采用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将烟草硝酸还原酶基因(NR)导入甘蓝，获得13株卡那霉素抗性植株。PCR和Southern blot检测证实，NR基因已经成功导入并整合到甘蓝的基因组。4个转基因株系硝酸盐质量分数明显低于非转基因供体株系，降幅为13.9%～23.0%。说明：将重组硝酸还原酶基因导入甘蓝且得到超量表达，创制低硝酸盐育种材料的方法可行。

甘蓝；农杆菌介导法；硝酸还原酶基因；硝酸盐质量分数

甘蓝(BrassicaoleraceaL. var.capitataL.)是人们喜食的蔬菜之一。以甘蓝、花椰菜、娃娃菜等优势蔬菜产品为主的 “高原夏菜” 已成为甘肃农业的亮点，销往全国80多个大中城市[7]。甘蓝存在硝酸盐积累的品种特异性，是较易积累硝酸盐的蔬菜品种之一[8-9]。近年来，因栽培中过度使用化学肥料、农药造成蔬菜化肥农药残留问题突出，重茬栽培叶类蔬菜硝酸盐危害尤为明显[10-11]。都韶婷等[12]研究显示，筛选低硝酸盐积累的蔬菜品种是降低蔬菜硝酸盐积累的一种可行措施。

甘蓝转基因研究已在抗虫、抗旱、耐盐及雄性不育等方面取得较好的进展，优化以农杆菌介导法为主的基因转化体系，明确子叶、下胚轴等外植体及基因型在甘蓝基因转化中的作用，创造一些具有利用前景的新材料[13-16]。……