王 爽 张毅强 兰晓瑜 程牛亮 李美宁（山西医科大学生物化学与分子生物学教研室，山西 太原 030001）



设计VEGF的G四链体诱导结肠癌细胞凋亡的研究

王 爽 张毅强 兰晓瑜 程牛亮 李美宁*
（山西医科大学生物化学与分子生物学教研室，山西 太原 030001）

【摘要】目的 pu22寡核苷酸序列作用于VEGF基因使VEGF启动子区形成G-四链体，干扰VEGF基因的表达从而促进HCT116细胞和SW480细胞的凋亡。方法 设计合成的pu22和mutpu22摄取到细胞后，在pu22不同浓度作用下，通过实时定量PCR实验检测VEGF基因的表达情况，利用免疫印迹实验检测VEGF蛋白表达水平；通过细胞凋亡实验检测两种结肠癌细胞凋亡的情况。结果 荧光实时定量PCR与免疫印迹实验结果显示处理组的两种结肠癌细胞株HCT116与SW480用8 μL/L的PU22处理48 h后VEGF的表达最低，其相对表达值均显著低于正常细胞组及空白对照组。细胞凋亡实验结果表明两种细胞处理组凋亡率均大于相应的正常组与对照组。结论 寡核苷酸序列PU22对杀伤结肠癌细胞起着显著的作用。

【关键词】VEGF；G-四链体；pu22

结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一。抑制血管生成是阻遏肿瘤生长的一种策略，Vegf是控制血管生成的主要基因之一。本实验设计了针对VEGF启动子区域的G四链体PU22，在结肠癌细胞摄取PU22后检测VEGF基因RNA和蛋白质的表达，分析细胞增殖和凋亡的情况，从而探讨PU22对VEGF基因表达的影响与结肠癌增殖与凋亡的关系，研究PU22对结肠癌细胞的影响。为寻找结肠癌新药的研发和治疗方法奠定了实验基础。

1 材料与方法

1.1 PU22与mutPU22：PU22序列5'-CGGGGCGGGCCGGGGGCGGGG T-3'［1-5］，mutPU22序列5'-CGAGTCGCGCCGAGTGCGAGAT-3'。……