秦玉洁，张廷虹，叶昕

中国科学院微生物研究所，北京 100101



抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定

秦玉洁，张廷虹，叶昕

中国科学院微生物研究所，北京 100101

秦玉洁, 张廷虹, 叶昕. 抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定. 生物工程学报, 2016, 32(1): 105–113.

Qin YJ, Zhang TH, Ye X. Preparation and detection of anti-influenza A virus polymerase basic protein 1 polyclonal antibody. Chin J Biotech, 2016, 32(1): 105–113.

摘 要:流感病毒属于正黏病毒科，为有包膜包裹的单股负链RNA病毒。它的8个基因片段编码至少16种病毒蛋白，其中3个蛋白组成流感病毒的聚合酶复合体。流感病毒聚合酶碱性蛋白1 (PB1) 是该复合体的组分之一，在病毒的转录、复制及重配中发挥重要的作用。为研究其功能，构建His-PB1 (aa 550–755) 融合蛋白原核表达质粒，IPTG诱导融合蛋白表达，通过镍柱亲和将其纯化，然后作为抗原免疫家兔。对抗血清进行间接ELISA检测，表明抗体效价可达1∶100 000。兔源PB1蛋白抗血清经亲和纯化后，用于免疫印迹检测流感病毒WSN毒株PB1蛋白以及外源转染的FLAG-PB1蛋白，结果表明该PB1抗体具有良好的特异性，同时也能特异性识别其他亚型的A型流感病毒的PB1蛋白，为进一步研究流感病毒PB1蛋白的功能奠定了基础。

关键词:流感病毒，PB1，多克隆抗体，亲和纯化

Received: March 7, 2015; Accepted: May 4, 2015

Supported by: National Basic Research and Development Program of China (973 Program) (No. 2011CB504705), Key Projects in the National Science and Technology Pillar Program (No. 2013ZX10004611).

国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2011CB504705)，国家科技重大专项 (No. 2013ZX10004611) 资助。

流感病毒属于正黏病毒科，为有包膜包裹的单股负链RNA病毒[1]。流感病毒8个基因片段编码16种蛋白[2-3]。每个基因片段都被核蛋白(NP) 以及RNA依赖的RNA聚合酶包裹，形成病毒核糖核蛋白复合体[4]。其中，RNA依赖的RNA聚合酶复合体由聚合酶碱性蛋白1 (PB1)、聚合酶碱性蛋白2 (PB2)、聚合酶酸性蛋白 (PA) 3种组分构成。……