林亚秋　罗璠

摘 要 动物细胞培养技术在本科《细胞生物学》教学中占有重要的地位，为了提高学生的积极性并熟练掌握无菌操作步骤，教研室根据自身的特点，将小鼠脂肪细胞培养与分子鉴定结合起来，目的是使学生将细胞生物学与分子生物学结合起来，对培养学生的综合能力具有很好的效果，并为细胞生物学的实验教学改革提供了新思路。

关键词 动物细胞培养 实验 教学设计

中图分类号：Q2-4；G642 文献标识码：A

细胞生物学是一门实验性很强的学科，在生命科学专业的知识结构体系中占有重要地位。它通过结构和功能相结合，从细胞、亚细胞和分子等方面，用活的、动态的视点，来研究和探讨生命活动的基本规律。细胞培养技术是细胞生物学最重要的基本技术，在本科细胞生物学实验课中占有举足轻重的地位，是这门实验课的精髓，通过该实验可以帮助学生树立严格无菌的观念和一丝不苟的工作作风。

目前细胞生物学实验课内容比较单一，主要是细胞的观察、染色，标本制备，细胞培养等，针对传统细胞生物学实验教学中存在的不足，结合本专业生物学实验室的仪器设备及老师的科研项目，我们将原来的细胞培养实验在教学设计中进行了改革，即在细胞培养实验的基础上增加分子水平对细胞鉴定的实验项目，使学生全面掌握操作技术，突破传统实验教学中的缺点，为积极推进实验教学改革提供参考。

1实验方法

1.1小鼠脂肪细胞的获得

首先使学生掌握目前动物细胞培养的前言进展及主要采用的方法。本实验目的是教会学生用组织块和消化法两种方法来获得小鼠脂肪细胞，熟练掌握无菌的操作。

1.2培养的小鼠脂肪细胞的鉴定

通过此部分实验使学生了解动物细胞培养不仅仅是只获得即为成功，还需要对所获得的细胞进行鉴定，才可进行后续研究。因此，此部分教会学生不仅用经典的染色方法—油红O染色法进行鉴定外，并利用分子生物学方法（即荧光定量PCR技术）检测成熟脂肪细胞中脂肪细胞分化标志基因的表达情况来进行进一步鉴定。

2实验教学探讨

2.1开设本实验项目的意义

为了更好地适应学科发展的需要，培养社会所需的创新型人才，根据生物技术专业的特点，选取重要的细胞培养基础实验，并使实验多元化，结合新的内容来设计，将对学生动手动脑能力的提高有很大影响，这种创新性的实验设计同样被各大高校所重视。理论课在讲述细胞培养的内容时利用PPT进行动态的讲解且配合大量的动画，但还是比较抽象，学生难以理解。本实验教学根据这些特点，紧密结合理论课内容，在细胞培养的实验基础上，同时将细胞鉴定实验（包括细胞总总RNA提取、反转录等实验过程）加入细胞培养实验中，不但向学生介绍了细胞培养的基本方法，而且通过细胞鉴定向学生展示了细胞培养的效果，同时丰富了细胞生物学实验课的内容。该实验不仅使学生们掌握了细胞培养和鉴定的方法，同时也使其对细胞培养具有了更加感性、直观的认识。

2.2实验过程中可能出现的问题及解决方法

实验过程中出现的最大问题就是无菌意识不强，学生在超净工作台中比较忙乱，一会忘记在酒精灯附近操作，一会枪头碰到了其他部位。并且在解剖小鼠操作时剪刀经常会粘到毛毛，造成了所取样品的污染。在消化法时消化的时间掌握不好，造成消化不完全，得到的细胞较少等问题。最后将铺满组织块的瓶子放在二氧化碳培养箱时瓶盖忘记拧松半圈。

2.3以学生为主，老师为辅的实验教学模式

我们设计的细胞培养实验教学设计包含细胞培养和细胞鉴定两部分内容，细胞培养前期准备工作颇多，并且这些准备工作是保证实验成功的关键。为了培养学生无菌意识，细胞培养所用器皿的清洁消毒、培养基的配制等，都是由学生利用课余时间在教师指导下亲自动手完成的。这样既培养了学生的基本操作技能，也增加了学生的动手机会。细胞培养实验的设计同时具有连续性强和整体性强的特点，前一部分实验结果往往会影响后续的实验。因此对学生的要求有了进一步的提高，每个学生只有参与整个实验过程，才能获得最后的实验结果。在实验中要注意培养学生在实验过程中的团队协作精神，发挥每个学生的特长。

3结语

本实验将细胞培养和细胞分子鉴定结合并应用于实验教学中，突破了原来细胞培养实验后仅仅在显微镜观察下观察的局限，并培养了学生团结协作的精神，比如前期准备不好，后期则无法成功，这极大地提高了学生对实验的兴趣。教师在理论授课时虽然强调了很多无菌操作的注意事项，但是通过实验过程中观察，学生依然会遇到很多问题。这就需要教师在学生实验操作过程中实时纠正，严格把关，培养学生熟练掌握一套标准的无菌操作技术。然而，提高实验课程的教学水平，保证课程的教学质量是一个不断提高的探索过程，尚有待于在教学实践过程中不断总结经验、实践改进，只有这样才能使细胞生物学实验教学日臻完善。

参考文献

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