彭利沙张永祥闫青王翔李军

（1. 河北科技师范学院食品科技学院，秦皇岛 066600；2. 河北省果品加工工程技术研究中心，秦皇岛 066600）

绿色木霉耐热β-葡萄糖苷酶分离纯化及酶学性质研究

彭利沙1，2张永祥1，2闫青1，2王翔1，2李军1，2

（1. 河北科技师范学院食品科技学院，秦皇岛 066600；2. 河北省果品加工工程技术研究中心，秦皇岛 066600）

旨在对绿色木霉-葡萄糖苷酶进行分离纯化并研究其酶学性质。对绿色木霉GIM3.139进行摇瓶发酵，经离心超滤和Sephadex G-200凝胶层析，得到纯化后的β-葡萄糖苷酶，并研究其酶学性质。结果显示，分离纯化组分经PAGE电泳检测达到电泳纯，研究发现，该酶最适反应温度为80℃，热稳定性好，在70-95℃时能长时间保持较高活力，最适pH值为6.5，耐酸碱稳定性好。金属离子中，Fe3+、Mg2+、K+对β-葡萄糖苷酶的活性起抑制作用，其中Fe3+对该酶的抑制作用最为明显，Fe2+、Mn2+对β-葡萄糖苷酶的活性起激活作用，其中Mn2+对β-葡萄糖苷酶的激活作用最为明显。有机溶剂中，甲醇、丙酮对该酶起到激活作用，其中甲醇的激活作用最明显，而乙酸乙酯对该酶具有明显的抑制作用。分离纯化得到了电泳纯的β-葡萄糖苷酶，并掌握了其基本的酶学性质。

绿色木霉；β-葡萄糖苷酶；分离纯化；酶学性质

纤维素酶是指能水解纤维素β-1，4-葡萄糖苷键的一类酶的总称，它不是单一的酶，而是由起协同作用的多个酶组成的复杂酶系，一般具有3-10种或者更多组分［1］。国内外根据纤维素酶的作用位点、作用底物和释放的产物不同而将其分为三类［1-3］：（1）内切葡聚糖苷酶（endo-1，4-β-D-glucanase EC 3.2.1.4，来自真菌简称EG，来自细菌简称Len）；……