少棘蜈蚣抗菌肽scolopin 2的克隆、表达与抗癌机制研究
2016-06-13侯欢欢卢佳章纬菁黄芳任文华
侯欢欢 卢佳 章纬菁 黄芳 任文华
(南京师范大学生命科学学院,南京 210046)
少棘蜈蚣抗菌肽scolopin 2的克隆、表达与抗癌机制研究
侯欢欢 卢佳 章纬菁 黄芳 任文华
(南京师范大学生命科学学院,南京 210046)
旨在研究AMP-scolopin 2的抗菌活性和抗癌机理。利用SUMO融合技术对AMP-scolopin 2进行了体外表达;采用抑菌圈、MTT、流式细胞术和Western blotting等技术分析了其抗菌活性、溶血活性和对肿瘤细胞的促凋亡作用。结果表明,成功表达并纯化了AMP-scolopin 2;AMP-scolopin 2对白血病细胞(K562)和肝细胞癌(HepG2)具有抑制增殖和促凋亡作用,但对红细胞和正常细胞HEK293的影响很小;AMP-scolopin 2(40 μmol/L)可以诱导K562(21.4%)和HepG2(18.5%)细胞凋亡;此外,AMP-scolopin 2下调了与线粒体相关的凋亡蛋白pro-caspase-3、pro-caspase-9和pro-PARP的表达,且呈浓度依赖性。AMP-scolopin 2可以通过线粒体caspase依赖性途径促进肿瘤细胞凋亡。
蜈蚣;抗菌肽scolopin 2;SUMO;抗菌活性;细胞凋亡
目前研究认为,癌症发生的主要原因是细胞增殖和细胞死亡失调,后者包括程序性死亡(如细胞凋亡)和非程序性死亡。当前存在许多治疗各种癌症的化学药物[1],但因其毒副作用大,以及肿瘤细胞易对其产生耐药性而在临床上受到限制[2]。抗菌肽(AMPs)是一组在先天免疫防御中发挥重要作用的天然分子[3]。与目前广泛使用的化疗药物相比,抗菌肽具有抗肿瘤细胞活性而对正常细胞几乎无毒害作用,而且尚未发现肿瘤细胞对其产生耐药性[4]。例如LL-37,唯一一个来自人的免疫防御肽,可以诱导结肠癌细胞凋亡[5]。因此,抗菌肽有望成为一种新型的抗肿瘤药物。
在许多亚洲国家,少棘蜈蚣毒液及机体被广泛用来治疗神经、呼吸道和心血管疾病。……
