刘彦芳王秋爽凌鸿刘东春代英辉王东

（1. 沈阳药科大学中药学院，沈阳 110016；2. 沈阳药科大学中韩分子生药学研究室，沈阳 110016）

中华大蟾蜍γ-肌动蛋白基因Bbgγ-Actin的克隆与生物信息学分析

刘彦芳1，2王秋爽1，2凌鸿1，2刘东春1，2代英辉1王东1，2

（1. 沈阳药科大学中药学院，沈阳 110016；2. 沈阳药科大学中韩分子生药学研究室，沈阳 110016）

旨在获得中华大蟾蜍肌动蛋白序列全长。以中华大蟾蜍（Bufo bufo gargarizans）耳后腺为材料，提取总RNA，通过转录组高通量测序快速得到中华大蟾蜍肌动蛋白基因（BbgActin）cDNA全长2 055 bp，通过RT-PCR技术对其ORF序列进行验证，并对BbgActin基因进行分析。序列分析表明，BbgActin基因开放阅读框长1 131 bp，编码376个氨基酸。通过BLAST P程序分析，所得序列与GenBank数据库中肌动蛋白基因序列相似度均在89%以上，氨基酸序列的相似性达90%以上。系统进化分析表明，BbgActin与γ-Actin聚为一类，所得中华大蟾蜍肌动蛋白属于γ-Actin。首次获得了中华大蟾蜍γ-Actin cDNA全长序列。

中华大蟾蜍；γ-肌动蛋白；cDNA全长；系统进化

中华大蟾蜍（B. bufo gargarizans）为蟾蜍科蟾蜍属动物，全身皆可入药，如蟾酥、蟾皮、干蟾、蟾蜍头、蟾蜍舌、蟾蜍肝、蟾蜍胆等［1，2］。因其具有重要的药用价值，如治疗恶性肿瘤、心衰、各种感染性疾病、慢性肝炎、骨髓炎、周围性面神经麻痹、止痛麻醉等而备受关注［3-5］。许多研究者正致力于研究有关的药理作用和活性成分，但对中华大蟾蜍重要生理功能的基因研究则报道较少。肌动蛋白（actin）广泛存在于真核生物中，是肌小节和细胞骨架的重要组成成分，在细胞分裂、染色体运动、细胞器运动、胞质流动等几乎所有真核细胞的生理过程中发挥重要作用［6-8］。……