犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用
2016-06-13陈意伟温肖会朱学良吕殿红翟少伦魏文康
陈意伟, 温肖会, 朱学良, 吕殿红, 翟少伦*, 魏文康*
(1.华中农业大学动物医学院,湖北武汉 430070;2.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东广州 510640)
犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用
陈意伟1,2, 温肖会2, 朱学良2, 吕殿红2, 翟少伦2*, 魏文康2*
(1.华中农业大学动物医学院,湖北武汉 430070;2.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东广州 510640)
摘要[目的]建立犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBoV)的PCR检测方法,了解其流行情况。[方法]根据GenBank数据库上CBoV的VP2基因序列合成1对引物,建立PCR检测方法,并运用该方法对临床样品进行检测。[结果]特异性试验中,除CBoV有目的条带出现外,犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬传染性肝炎(ICHV)、犬副流感病毒(CPIV)、猫瘟热(FDV)等均无条带出现。敏感性试验表明,此检测方法对CBoV的最低检测量为4.806 2 pg/μL。重复性试验表明,多次重复试验结果一致,表明此方法重复性好。425份样品中仅有1份样品扩增出目的条带,经测序比对鉴定为CBoV。初步的流行病学调查结果表明,CBoV在犬中的流行率与感染率极低。[结论]建立的PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、可重复性强等特点。
关键词犬博卡病毒;PCR检测方法;应用
犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBoV)隶属细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属,为单股线状无囊膜的DNA病毒。2005年,瑞典学者Allander等[1]从1份婴幼儿病例样本中分离并鉴定出此种病毒,命名为人博卡病毒(Human bocavirus,HBoV)。后来,牛博卡病毒、犬博卡病毒、猪博卡病毒、大猩猩博卡病毒、黑猩猩博卡病毒相继被发现[1-2]。……
