杨成明　王可斌

·论著·

PLGA-TPGS负载α-TIF-siRNA纳米粒对疱疹病毒1的抑制作用

杨成明王可斌

【摘要】目的研究以PLGA-TPGS生物可降解材料为载体包载α-TIF-siRNA的纳米粒对HSV1的抑制作用。方法以PLGA-TPGS为载体，采用双乳蒸发法制备包载α-TIF-siRNA的PLGA-TPGS纳米粒(命名为PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs)，并对其进行表征，包括粒径大小、zeta电位、包封率和释放率，用MTT法检测纳米粒对上皮细胞和HeLa细胞的细胞毒作用，免疫荧光观察纳米粒在细胞内的释放，用空斑实验研究体外研究纳米粒对HSV1病毒的抑制作用。结果PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs的粒径大小为(257±2.94) nm，zeta电位为(－31.25±1.70) mV，siRNA的包封率为(56.23±3.68)%，纳米释放siRNA呈双相，即在96 h释放达到50%，之后呈缓慢释放，用MTT法分析PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs对原代角质形成细胞和HeLa细胞几乎无细胞毒性。荧光显微镜能观察纳米粒siRNA细胞内释放。PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs能明显延长抑制感染HeLa细胞的HSV1。结论PLGA-TPGS纳米粒可以作siRNA的载体。PLGA-TPGS/α-TIF-siRNA NPs在体外对HSV1病毒具有明显的抑制作用，可以成为治疗HSV1-诱导的角膜炎在内的相关疾病的候选药物。

【关键词】单纯疱疹病毒1(HSV1);α基因反式诱导因子(α-TIF);纳米粒，siRNA

项目来源:广东省医学科研基金项目(编号:A2013616);广东省深圳市创新委知识创新计划项目(编号:JCY20130327094102249，JCY20140411091643396)

单纯疱疹病毒1(HSV1)是双链DNA病毒，是一种重要的病原体，常导致慢性感染、潜伏感染，在一定条件下重新激活而复发。HSV1感染可引起不同临床症状，包括无症状的感染、唇疱疹、角膜炎等。HSV1感染是致盲的重要原因。在HSV1感染细胞中，极早(IE或α)基因表达被α基因反式诱导因子(alphagene trans-inducing factor，α-TIF)反式激活［1－3］。HSV-αTIF含2个不同的原件:一个和Oct-1和CFF结合，有助于结合TAATGARAT基序，另一个则被赋予转录激活。由于HSV1的感染反复发作，现有的核苷类药物常常产生药物耐受，因此，寻求新的治疗方法非常必要。……