心肾综合征中硫酸吲哚酚对巨噬细胞吞噬氧气型低密度脂蛋白的诱导作用的研究*
2016-06-07国春玲施海涛戚拥军何平张志任
国春玲,施海涛,戚拥军,何平,张志任
(齐齐哈尔医学院附属第五医院大庆龙南医院1.肾内科;2.儿科;3.呼吸科,黑龙江大庆163453;4.哈尔滨医科大学,黑龙江哈尔滨150081)
心肾综合征中硫酸吲哚酚对巨噬细胞吞噬氧气型低密度脂蛋白的诱导作用的研究*
国春玲1,施海涛1,戚拥军2,何平3,张志任4
(齐齐哈尔医学院附属第五医院大庆龙南医院1.肾内科;2.儿科;3.呼吸科,黑龙江大庆163453;4.哈尔滨医科大学,黑龙江哈尔滨150081)
摘要:目的探讨硫酸吲哚酚(IS)对RAW264.7巨噬细胞吞噬氧气型低密度脂蛋白(ox-LDL)的诱导作用及其作用机制。方法0、10、50、100、200和400μmol/L IS处理RAW264.7细胞24 h,采用CCK-8法测定RAW264.7细胞存活率,流式细胞术测定RAW264.7细胞的Dil标记氧化型低密度脂蛋白(Dil-ox-LDL)吞噬量。200μmol/L IS处理RAW264.7细胞0、12、24、36和48 h,测定RAW264.7细胞存活率和Dil-ox-LDL吞噬量。IS组RAW264.7细胞用200μmol/L IS处理24 h,UO126+IS组RAW264.7细胞以5μmol/L UO126预处理2 h后再200μmol/L IS处理24 h,测定非处理组、IS组和UO126+IS组RAW264.7细胞存活率和Dil-ox-LDL吞噬量,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测在IS刺激15 min时的ERK1/1蛋白表达情况。结果IS对RAW264.7细胞存活率的浓度效应和时间效应检测中,不同组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Dil-ox-LDL吞噬量与IS浸润浓度及处理时间均呈正相关(P<0.01)。IS组的Dil-ox-LDL吞噬量和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于非处理组(P<0.01)。UO126+IS组的Dil-ox-LDL吞噬量略低于非处理组,但差异无统计学意义(P>0.05);磷酸化ERK1/2蛋白表达量大幅低于非处理组,差异有统计学意义(P<0.01)。UO126+IS组同IS组比较,Dil-ox-LDL吞噬量和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均呈现大幅降低(P<0.01)。结论IS可在体外直接诱导RAW264.7巨噬细胞吞噬ox-LDL,该效应经由活跃MAPK信号转导通路实现,且随IS浓度升高和浸润时间延长而增强。
关键词:硫酸吲哚酚;……
