谢　欢，周　颖， 杨文香，张　娜，刘大群

(河北农业大学 植物保护学院 植物病理系，河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心，国家北方山区农业工程技术研究中心, 河北保定　071001)



TcLr24小麦NBS-LRR同源基因的克隆与分析

谢欢，周颖， 杨文香，张娜，刘大群

(河北农业大学 植物保护学院 植物病理系，河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心，国家北方山区农业工程技术研究中心, 河北保定071001)

摘要目前已克隆的小麦抗叶锈病基因多数含有NBS类保守结构域，为克隆高抗叶锈病 Lr24基因及其抗病相关基因，根据NBS保守结构域设计引物，对小麦抗叶锈病近等基因系TcLr24 cDNA进行扩增，得到534 bp的抗病基因同源序列。对该序列进行同源性检索并验证，获得1 408 bp的电子延伸序列。以此通过RACE 技术分别获取2 797 bp 和3 466 bp的cDNA与gDNA全长产物，其翻译的蛋白质序列含有NBS保守区的P-loop、Kinase 2a、Kinase 3a、HD和LRR保守结构，与大麦等单子叶植物NBS类蛋白序列同源性较高，生物信息学分析表明其为稳定的亲水性蛋白，分子质量104.28 ku，理论等电点6.15。半定量RT-PCR表明该片段所在基因序列为组成型表达。

关键词小麦；TcLr24；抗病基因同源序列；NBS

小麦(TriticumaestivumL.)叶锈病在世界各产麦区均有发生，是小麦的主要病害之一，严重时可造成15%～40%甚至更大的产量损失[1]。合理利用抗病品种是该病害防治中最安全、经济和有效的方法。抗病基因和抗病相关基因的克隆对病原物与寄主互作研究及抗病品种的培育具有重要意义。

同源序列法是分离克隆基因最经济、快捷的途径……