罗　书　李燕舞　广州中医药大学脾胃研究所(广州 510405)



补中益气丸对溃疡性结肠炎小鼠的行为研究*

罗书李燕舞∆广州中医药大学脾胃研究所(广州 510405)

摘要目的：研究补中益气丸对急性溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)小鼠行为影响，评估补中益气汤对小鼠急性UC的预防作用。方法：将40只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组，中药组，每组10只。除正常组外，其余各组予葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium salt，DSS)造模。空白组，模型组每日给予蒸馏水；阳性对照组每日给予柳氮磺砒啶(SASP) ；中药组给予补中益气丸，连续给药7d，期间观察小鼠行为变化，之后取样观察。结果：与空白组对比，模型组小鼠出现便血、精神萎靡、体质量下降等症状；与模型组对比，药物干预组小鼠上述症状不同程度改善。与空白组小鼠对比，模型组小鼠体质量明显下降(P<0.05)，结肠长度明显缩短(P<0.05)，结肠质量明显增加(P<0.05)；与模型组对比，药物干预组小鼠体质量无明显差异(P>0.05)，结肠长度缩短明显缓解(P<0.05)，结肠质量无明显差异(P>0.05)。结论：补中益气丸对DSS诱导的小鼠急性UC有一定预防作用。

主题词结肠炎,溃疡性/中医药疗法 补中益气丸/治疗应用动物，实验小鼠

UC是内科较常见的难治性疾病，肠粘膜在炎症反复发作的慢性过程中不断破坏和修复，导致肠道正常结构破坏，虽然UC的发病机理至今尚未完全明了，但是越来越多的证据显示UC的发生是多因素共同作用的结果[1]。DSS诱导小鼠UC模型症状与人类UC临床表现相似。DSS诱导的小鼠急性UC模型小鼠体质量会逐渐下降，并伴随腹泻、缩背、食欲精神差、毛色光泽变差、粘液血便，甚至出现死亡的临床表现[2]。中药复方补中益气丸是临床治疗UC的验方，本实验通过DSS诱导小鼠急性UC模型，动态观察小鼠行为变化，从而评估补中益气丸对小鼠急性UC的预防作用。

1 材料与方法1.1 实验动物 C57BL/6小鼠，雌性，体质量18～22g，由广东省实验动物中心提供(动物合格证编号：44007200014518)。

1.2 主要试剂 DSS(M.W.36000-50000，广州市红烁林生物科技有限公司)；SASP(上海三维制药有限公司，批号：20130915)；补中益气丸(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号：Z11020244)。

1.3 分组与造模将40只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物对照组，中药组，每组10只。除空白组外，其余各组予3% DSS水溶液代替饮用水1周，隔天更换新鲜DSS水溶液。

1.4 给药 研磨SASP片，补中益气丸，制成溶液。于造模同时给药，连续7d。空白组，模型组每日给予蒸馏水0.01mL·(g·d)-1；阳性药物对照组每日给予柳氮磺砒啶, 1.33g/(kg·d)-1，按成人等效剂量换算；中药组每日分别给予补中益气丸,6g/(kg·d)-1，按成人等效剂量换算。

1.5观察小鼠情况体质量、饮食量、大便性状、便血率。

1.6取样颈椎脱位处死小鼠，剪取结肠，测量长度，清理内容物，用预冷生理盐水清洗，滤纸除去多余水分后称重。

1.7 统计学方法 数据用mean±SD表示，采用SPSS17.0软件，输入数据并进行独立样本t检验和单因素方差分析，P<0.05，差异有统计学意义。

2结果2.1 一般体征 模型组小鼠于造模第3天出现血便，稀便，第5天后精神萎靡，无力，毛色黯哑，体质量明显下降，饮食明显减少，解剖小鼠，部分见脏器黏连，结肠壁肿胀，未见明显溃疡灶。阳性对照组小鼠于造模第3天出现血便，稀便，第4天后精神萎靡，无力，毛色黯哑，体质量下降，解剖小鼠未见脏器黏连，未见明显溃疡灶。中药组小鼠于造模第3天出现血便，稀便，第4天后精神萎靡，无力，毛色黯哑，体质量下降，解剖小鼠未见脏器黏连，未见明显溃疡灶。

2.2小鼠体质量结果 统计显示(表1) 与空白组对比，模型组小鼠体质量明显下降(P<0.05)；与模型组对比，阳性对照组、中药组体质量无明显差异(P>0.05)。

表1　小鼠体质量

注：∆P<0.05，与正常组比较；▲P<0.05与模型组比较

2.3小鼠结肠长度结果 统计显示(表2) 与空白组对比，模型组小鼠结肠长度明显下降(P<0.05)，提示小鼠结肠出现病理性改变，充血水肿，肠上皮细胞脱落，形成溃疡，导致肠壁皱缩。与模型组对比，阳性对照组、中药组小鼠结肠长度缩短程度明显缓解(P<0.05)。

2.4 小鼠结肠重量结果 统计显示(表3) 与空白组对比，模型组小鼠结肠质量增加(P<0.05)；与模型组对比，用阳性对照组、中药组小鼠结肠质量无明显差异(P>0.05)，但有下降的趋势。

表2 　小鼠结肠长度

注：∆P<0.05，与正常组比较；▲P<0.05与模型组比较

表3　小鼠结肠质量

注：∆P<0.05，与正常组比较；▲P<0.05与模型组比较

3讨论UC是一种发病机制并不是很明确的结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病，发病率也在逐年上升[3]。一般情况下,溃疡性结肠炎在临床上往往伴随着慢性粘液便、血便、腹痛,经常会反复性发作，有时会伴有不同程度的全身症状，还有可能发生癌变[4]。

中医认为UC属于“痢疾”、“泄泻”等范畴，张锡纯言：“有痢久而清阳下陷者，其人或间作寒热，或觉胸中短气，当于治痢药中，加生黄耆、柴胡以升清阳。” UC多因外感邪毒，内伤饮食而损伤脾胃，病位在肠，脾虚为根[5]。补中益气丸是健脾益气的经典方，由黄芪、白术、陈皮、升麻、柴胡、人参、甘草、当归、生姜、大枣组成，临床将之用于UC取得较好疗效。

桑力轩等[6]认为以DSS诱导小鼠UC逐渐出现腹泻、粘液血便、体质量减轻、倦怠懒动、毛色干枯等表现，是安全系数较高的造模方法。本研究用药组能在不同程度上减轻小鼠急性UC的症状。在体质量与结肠重量方面，中药干预组虽与模型组未有明显差异，但却有改善的趋势。结肠长度方面，中药干预组与模型组有明显差异，表明，补中益气丸行预防干预可抑制肠上皮细胞的脱落，减少溃疡的发生，减轻肠壁皱缩的程度。

参考文献

[1]高三明. 臭氧联合培菲康治疗溃疡性结肠炎临床疗效及对细胞因子IL-6、TGF-1水平的影响[J]. 陕西医学杂志,2013,42(7):895-897.

[2]农辉,黄雪. 葡聚糖硫酸钠诱导结肠炎模型的研究进展[J]. 世界华人消化杂志,2014,22:3245-3250.

[3]陆渊,费建平. 溃疡性结肠炎中医治疗研究[J]. 长春中医药大学学报,2012,06:1036-1038.

[4]李龙骧. 溃疡性结肠炎中医治疗研究进展[J]. 深圳中西医结合杂志,2014,06:195-196.

[5]姚柳伊,舒劲. 黄芪在溃疡性结肠炎治疗中的运用[J]. 中医研究,2013,10:51-53.

[6]桑力轩,高楠,常冰,等. DSS、TNBS、OXZ诱导结肠炎动物模型的对比[J]. 胃肠病学和肝病学杂志,2013,12:1221-1224.

(收稿2015-10-14;修回2015-11-09)

【中图分类号】R574.62

【文献标识码】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.02.048

通讯作者∆

* 国家自然科学基金资助项目(81202627)