姜苏峻，林蒋海，吕晓静，肖文娟，龚映雪，刘泽寰

(暨南大学生命科学技术学院，广东 广州510632)

米根霉脂肪酶的制备及其在餐厨废弃油脂转化中的应用*

姜苏峻，林蒋海，吕晓静，肖文娟，龚映雪，刘泽寰

(暨南大学生命科学技术学院，广东 广州510632)

利用脂肪酶把餐厨废弃油脂转化成为生物柴油能够达到绿色化、资源化处理餐厨垃圾的目的。从米根霉CICC3005 cDNA文库扩增得到脂肪酶基因(proROL)，并克隆到毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA中，电转入毕赤酵母X-33中构建重组毕赤酵母，SDS-PAGE电泳发酵液上清，结果显示重组酶的相对分子质量约为35 000。以橄榄油为底物测得脂肪酶活性为(426.6±0.8) U/mL。利用重组的米根霉脂肪酶对餐厨废弃油脂进行转酯化反应，以乙醇为酰基受体制备脂肪酸乙酯，在水含量为5%，醇油摩尔比为4∶1，酶添加量为10%的条件下得到脂肪酸乙酯的最高得率为49%。

餐厨废弃物；生物柴油；米根霉；脂肪酶；毕赤酵母

随着我国城镇化建设步伐的日益加快，城市垃圾的产生量和危害也日益增加，其中尤以餐厨垃圾最为凸显[1]。 “地沟油”就是从餐厨垃圾中的废弃油脂提炼而来的。而且餐厨废弃油脂占餐厨垃圾的比重还相当的高[2]，如能合理利用，非但可以消除其对人们健康生活的危害，还能变废为宝，生产大量的工业用油或生物柴油造福人类[3]。

利用餐厨废弃油脂生产生物柴油目前多采用化学法[4]，化学法存在工艺复杂，醇消耗量大，污染环境等缺点。而酶法生产生物柴油具有操作简单，醇消耗量小，无污染物排放等优点。……