方 伟，梁宇恒，宁 丹，柯碧霞，柯昌文，邓小玲，彭华林，孙九峰，王云新

(1. 广东省水生动物疫病预防控制中心，广东 广州 510222;2. 广东省疾病预防控制中心，广东 广州 511430;3. 广东省公共卫生研究院，广东省疾病预防控制中心，广东 广州 511430)

广东地区感染养殖罗非鱼的无乳链球菌分子分型研究*

方 伟1，梁宇恒2，宁 丹3，柯碧霞2，柯昌文2，邓小玲2，彭华林1，孙九峰3，王云新1

(1. 广东省水生动物疫病预防控制中心，广东 广州 510222;2. 广东省疾病预防控制中心，广东 广州 511430;3. 广东省公共卫生研究院，广东省疾病预防控制中心，广东 广州 511430)

以广东省内5个罗非鱼Oreochromisniloticus主要养殖区内分离的无乳链球菌Streptococcusagalactiae为研究目标，通过毒力基因PCR检测、多位点序列分型、脉冲场凝胶电泳技术研究广东地区感染罗非鱼的无乳链球菌分子特征。结果发现170株分离无乳链球菌中毒力基因的携带率介于60.59%～100%之间，毒力基因携带形成10个谱系，dltR-bca-sodA-spb1-cfb-bac(38.24%， 65/170)，dltr-bca-sodA-spb1-bac(23.53%，40/170)和dltr-bca-sodA-spb1-cfb-bac-scpB(22,35%，38/170)为主要的谱系，dltr-bca-sodA-spb1-bac-scpb(8.24%，14/170)和dltr-bca-sodA-spb1(4.71%， 8/170)次之。多位点序列分型研究证实170株菌在7个位点均为单一的等位基因，为adhP(10), pheS(1), atr(2), glnA(1), sdhA(3), glcK(2), tkt(2)，序列型为ST7型。146株菌脉冲场凝胶电泳结果表明146株菌分为6个簇(A-D，F，G)，相似性介于86%～100%之间。A(18)，B(16)，C(103)，D(7)为主要的遗传簇，占菌株数的98.63%(144/146)。基因簇A，C在4个采样区均有发现；基因簇B分布在吴川、茂名和阳江；基因簇D分布在茂名、珠海和阳江；基因簇F和G分别来自茂名和珠海。在A-D遗传簇中均有发现来自不同地区的菌株呈现100%的相似性，为同一克隆株。结果表明广东省主要罗非鱼养殖区内感染链球菌携带毒力基因比率高，序列型均为高致病的ST7型别，不同地区间具有相同的PFGE型别，不同地区间交叉传播感染的可能高。……