冯欢欢 张一凡 任雪 徐彩红

摘要：建立一种维生素D3（VD3）在大鼠体内浓度的测定方法，为食品中营养素的生物利用研究奠定基础。采用RP-HPLC法进行检测分析；采用甲醇沉淀蛋白结合乙醚液液萃取法进行血浆样品处理。结果表明：低、中、高3个浓度VD3的提取回收率分别为87.8%±5.14%，85.4%±3.00%和89.6%±5.71%；日内、日间的精密度分别小于5.12%和6.30%。该方法灵敏度高、稳定性好，可作为食品、药学研究中大鼠体内吸收动力学相关试验研究的检测分析方法。

关键词：高效液相色谱法；25-羟基维生素D3；大鼠血浆

中图分类号：R446.1 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2016）02-0047-03

维生素D（Vitamin D，VD）是一种脂溶性维生素，见光极易分解，其作用主要是调节人体内钙和磷的代谢，促进其吸收利用，促进骨骼成长[1-2]。VD的主要活性形式有25-羟基维生素D3[25（OH）VD3]，1，25-二羟基维生素D3 [1，25（OH）2VD3]和24，25-二羟基维生素D3[24，25（OH）2VD3]3种。其中25（OH）VD3为血液中VD的主要循环形式，是显示VD状况的一个最佳指标[3]，但其在血清中浓度相当低，一般检测方法无法检出[4-5]。为此，本课题参考相关文献，建立一种利用高效液相色谱法检测维生素D3（VD3）的方法。

1 材料与方法

1.1 试剂

维生素D3（VD3，纯度99.9%）：中国食品药品检定研究院；羧甲基纤维素钠（CMC-Na）：上海永日药品贸易有限公司；甲醇（色谱纯）：山东禹王化工制品有限公司；无水乙醚（分析纯）：天津凯信化工制品有限公司；其他试剂均为分析纯；水为自制二蒸水。

1.2 供试动物

雄性Wistar大鼠，体质量220±30 g，由沈阳药科大学实验动物中心提供。

1.3 仪器设备

1200系列高效液相色谱仪，包括1200泵系统和可调波长紫外检测器和工作站：美国Agilent公司；……