李敏玲　陈富美　廖碧云　潘宏　黄德伦　黄凤玲　陆阳清　张明

摘要：【目的】探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对水牛卵母细胞体外成熟质量与早期胚胎发育能力的影响，为优化水牛体外胚胎生产体系及提高其体外胚胎生产效率提供参考。【方法】在水牛卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度的EGCG，以排出第一极体为细胞核成熟标志，观察卵母细胞核成熟情况，检测MII期卵母细胞内活性氧（ROS）和谷胱甘肽（GSH）含量，并统计经孤雌激活及体外受精后早期胚胎的发育情况。【结果】在体外成熟液中添加10～20 μmol/L EGCG有利于水牛卵母细胞体外成熟过程中卵丘扩展，卵丘扩展指数（CEI）分别为2.49%和2.42%，卵母细胞成熟率（59.31%和50.98%）显著高于未添加EGCG的CK组（P<0.05，下同），MII期卵母细胞的GSH含量（3.21和3.25 pmol/枚）也显著高于CK组；添加20～30 μmol/L EGCG可显著降低水牛MII期卵母细胞的ROS水平。以体外成熟培养获得的水牛MII期卵母细胞分别进行孤雌激活及体外受精，结果发现以在体外成熟液中添加10 μmol/L EGCG的效果最佳，其对应的卵裂率和囊胚发育率均显著高于CK组。【结论】EGCG可用于优化水牛卵母细胞体外成熟体系，能有效提高卵母细胞的成熟率和体外发育潜力，且以水牛体外成熟液中添加10 μmol/L EGCG的效果最佳。

关键词： 水牛；表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）；卵母细胞；体外成熟；胚胎发育

中图分类号： S823.83 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2016）03-0478-05

0 引言

【研究意义】目前，虽然卵母细胞体外成熟技术在科学研究、医学生殖方面取得了长足进展，但囊胚率较低、囊胚质量差、卵子得不到有效利用的问题依然存在，其原因可能是卵母细胞在体外氧化系统与抗氧化系统失衡，体外操作与环境因素致使卵母细胞不可避免地接触到更多的氧自由基，且得不到母体抗氧化剂的保护（彭中友等，2015）。因此，在卵母细胞体外成熟液中通常会添加外源抗氧化剂，以期有效解决上述问题。表没食子儿茶素没食子酸酯（Epi-gallocatechin-3-gallate，EGCG）提取自绿茶，其结构中含有多个酚羟基，是高效的植物源性抗氧化剂。已有研究证实，EGCG可提高机体抗氧化能力，显著降低机体过氧化物的生成（Devika and Stanely，2008），且能有效抑制Fe2+和H2O2诱发的脂质过氧化反应（李太坤，2012）。……