管海洁

【摘要】 目的 探讨激活Notch信号通路对人牙髓细胞增殖与分化的作用。方法 选取完整拔除的健康前磨牙与第三磨牙， 应用酶消化法进行原代培养与传代培养。观察培养结果。结果 第4代B组人牙髓细胞中的Notch信号通路的下游基因Hesl表达量低于C组（P<0.05）；第8代， B组人牙髓细胞中的Hesl表达量与C组比较， 差异有统计学意义（P<0.05）；第10代， B组人牙髓细胞中的Hesl表达量与C组比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Notch信号通路是进化过程中的信号转导机制， 能够细胞间作用对其命运进行控制， 牙髓细胞存在较高的增殖以及多向分化的成体干细胞， 在组织中起到非常重要的作用。

【关键词】 人牙髓细胞； Notch信号通路；增殖分化

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.15.210

Notch属于穿膜受体， 其在人身体的各种器官与组织中均存在一定的涉及， 能够借助介导细胞中的局部信号进行传递与级联反应， 将邻近细胞的分析差异进行固化或者扩大， 并对细胞的凋亡、分化以及增殖功能进行有效的调控[1]。近几年来， Notch信号通路是多领域进行研究的热点问题， 伴随牙髓干细胞发现， 目前Notch信号通路是进行调控研究的重点内容。牙髓干细胞在牙源性肿瘤发病机制、牙齿组织再生与牙损伤修复中均存在一定关联， 因此掌握调控牙髓干细胞的分子机制很有必要。现将研究结果报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料及试剂 胎牛血清、青霉素10000 U/ml， 高糖型DMEM培养基、胶原酶、200 mmol/L L-谷氨酰胺、0.25%的胰蛋白酶-乙二胺四乙酸（EDTA）、二甲基亚砜、5-二苯基四氮唑溴盐、焦炭酸二乙酯。

1. 2 分组与培养 牙髓细胞主要来源：因阻生原因所拔除左下第三、左上第三磨牙；因正畸减数原因所拔除的右下第一前磨牙。将同一颗牙齿来源的牙髓细胞分为三组：A组：使用正常培养基对人牙髓细胞进行体外传代培养；B组：在正常培养基中加入r-分泌酶抑制剂DAPY， 最终浓度为5 μmol/L；C组：在正常培养基与B组培养基中同步添加等量的r-分泌酶抑制剂DAPT溶剂二甲基亚砜（DMSO）。……