马有宁，桂文君，程敬丽，朱国念

(浙江大学　农药与环境毒理研究所，浙江　杭州　310058)

超高效液相色谱-串联质谱法测定斑马鱼性腺中13种类固醇激素

马有宁，桂文君，程敬丽，朱国念*

(浙江大学农药与环境毒理研究所，浙江杭州310058)

摘要：建立了超高效液相色谱-串联质谱测定雌性斑马鱼性腺中13种类固醇激素的分析方法。雌鱼性腺分别经预冷的乙腈、乙酸乙酯浸提后，氨基(NH2)、亲水-亲脂平衡介质(HLB)固相萃取柱富集净化，ACQUITY UPLC®BEH C18色谱柱进行梯度分离。采用多反应监测模式扫描，基质匹配外标法定量。研究了不同提取溶剂对13种类固醇激素的提取效果，考察了固相萃取柱的净化效果，并对斑马鱼性腺进行类固醇激素加标回收率实验，结果表明，13种分析物的平均加标回收率为74.8%～127.0%，相对标准偏差为3.9%～15.8%，方法检出限为0.006～0.300 μg/kg。该方法简便、准确、灵敏，可应用于斑马鱼性腺类固醇激素生理水平的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱；NH2；HLB柱；斑马鱼性腺；类固醇激素

环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)是指环境中存在的能够干扰生物体内源激素的合成、释放、转运、结合、作用或清除，从而影响机体的内环境稳定、生殖、发育及行为的外源性物质[1-2]。性激素在鱼类生殖系统发育中起着决定性的作用[3]。而许多环境内分泌干扰物如双酚A(Bisphenol A,BSA)[4]、乙烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)[5-6]、17α-炔雌醇(EE2)[7]等可以通过性激素受体介导或非受体介导途径发挥内分泌干扰效应，影响性激素的合成、代谢而改变生物体内性激素的利用度。其中斑马鱼作为生物学研究的一种新型模式生物已广泛应用于环境毒理学的研究[8]。……