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1（南华大学公共卫生学院放射医学教研室 衡阳 421001）2（南华大学生物化学与分子生物学教研室 衡阳 421001）



耐辐射奇球菌pprI和pprA基因在真核细胞293T中的表达

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1（南华大学公共卫生学院放射医学教研室 衡阳 421001）
2（南华大学生物化学与分子生物学教研室 衡阳 421001）

摘要以pGADT-7-pprA、pet28a-pprI载体为模板，构建pEGFP-N1-pprA、 pDsRed1-N1-flag-pprI真核表达载体，脂质体2000介导将两个重组载体共转入293T细胞。双酶切及琼脂糖凝胶电泳显示在4 700、1 000 bp处与4 800、1 100 bp处出现目的条带。测序结果显示构建序列与模板序列一致，氨基酸序列100%正确。荧光显微镜下见到红色和绿色荧光；Western blot结果显示在不同检测水平65 kDa及60 kDa大小处有融合蛋白表达。结果提示pEGFP-N1-pprA、pDsRed1-N1-flag- pprI真核表达载体构建成功，并在离体293T细胞中共同表达蛋白。证明原核基因pprI、pprA能够在真核细胞中共表达，为后续实验验证DR菌高抗性基因pprA、pprI及其产物在辐射调控网络中的相互作用和协同作用、提高真核细胞的辐射抗性提供了研究基础。

关键词耐辐射奇球菌，pprI，pprA，真核细胞，脂质体2000

基金资助：国家自然基金项目(81272993)、湖南省教育厅资助科研项目(13C805)、湖南省科技厅重点项目（2015JC3080）、湖南省研究生科研创新项目(CX2013B398)、衡阳市科技局资助项目(2014KJ10)资助

第一作者：肖潇，女，1989年4月出生，2012年毕业于湖南师范大学医学院临床医学专业，现为南华大学公共卫生学院特种医学（放射）专业研究生，E-mail：794171254@qq.com；共同第一作者：马云，女，1975年4月出生，2004年于南华大学获硕士学位，副教授

Supported by the National Natural Science Foundation of China (81272993), Education Department Scientific Research of Hunan Province (13C805), Key Program of Hunan Provincial Department of Science and Technology (2015JC3080), Graduate Student

Research Innovation Project of Hunan Province (CX2013B398), and Project of Hengyang Municipal Science and Technology Bureau(2014KJ10)

First author: XIAO Xiao (female) was born in April 1989 and graduated from Clinic Medicine of Hunan Normal University Medical Department. Now she is a master candidate at University of South China. Equally contributing author: MA Yun (female) was born in April 1975 and received her master degree from University of South China in 2004, associate professor

CLC Q691, TL71

随着核能和放射技术的发展和应用，各种突发辐射状况和放射治疗过程中都可能导致不同程度的辐射损伤，而真核生物对辐射的抵抗作用十分有限。……