卵形鲳鲹主要致病链球菌多重PCR诊断技术的建立*

0引言

【研究意义】随着水产养殖业的快速发展,链球菌(Streptococcus)导致的疾病频繁暴发,并在世界范围内造成重大经济损失。迄今为止，链球菌病的主要致病菌包括副乳房链球菌(Streptococcus parauberis)、海豚链球菌(Streptococcus iniae)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)、格式乳球菌(Lactococcus garvieae)、Lactococcus piscium、鲑鱼漫游球菌(Vagococcus salmoninarum)、栖鱼肉杆菌(Carnobacterium piscicola)[1-4]。1957年日本在养殖虹鳟鱼(Oncorhychus mikiss)上发现链球菌病，这是最早发现的鱼类链球菌感染性疾病[5]。20世纪80年代以后，已有多个国家报道了鱼类链球菌病的暴发与流行，包括尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica(linnaeus))、 尼罗尖吻鲈(Lates niloticus)、大菱鲆(Psetta maxima)、卵形鲳鲹(Trachinoms ovatus)、黄狮鱼(Seriola quinqueradiata)、红鼓鱼(Sciaenops ocellatus)、海鲷(Sparus auratus)、日本比目鱼(Paralichthys olivaceus)[6-15]。而在中国，养殖罗非鱼(Oreochromis speices)的链球菌发病率为20%～50%，死亡率为50%～70%，甚至更高,链球菌病已严重危害中国罗非鱼养殖业的健康发展[16]。近年来，卵形鲳鲹凭借其肉质具有鲹类特殊鲜味、生长速度快、出口加工市场前景诱人等特点，养殖规模一度呈倍数增长态势[17-18]。然而由于卵形鲳鲹主要养殖模式是采用高密度的近海网箱养殖，随着该养殖产业的快速发展和无序扩张，海区负荷过大，养殖环境不断恶化，导致卵形鲳鲹细菌性病害暴发日益频繁。【前人研究进展】2007年，周素明等[19]首次从卵形鲳鲹上分离到停乳链球菌，随后在2014年，黄婷等[20]从患病的卵形鲳鲹上同时分离到无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和海豚链球菌。本实验室于2012-2014年针对卵形鲳鲹进行流行病学调查，陆续从北海、湛江、深圳、珠海等地分离到无乳链球菌、停乳链球菌、格式乳球菌和海豚链球菌，发现链球菌的分离频率不断增加，这表明链球菌病已成为威胁卵形鲳鲹健康养殖的主要病原之一。……