葛凡，葛孚章

( 1．泰安市第一中学，山东泰安271000; 2．泰山医学院运动医学研究所)



泰山赤灵芝多糖提取物对骨质疏松大鼠骨量的影响

葛凡1，葛孚章2*

( 1．泰安市第一中学，山东泰安271000; 2．泰山医学院运动医学研究所)

摘要目的:研究泰山赤灵芝多糖提取物对去卵巢雌性Wistar大鼠全身骨大小及骨量的影响。方法:选用4月龄雌性Wistar大鼠50只，随机分为5组，10只为正常对照组，40只大鼠去除双侧卵巢，其中30只分别注射不同剂量( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg)的泰山赤灵芝多糖提取物，剩余10只为模型组。实验结束后，取大鼠右股骨进行骨大小、骨量的测定。结果:去卵巢大鼠骨大小、骨量均低于正常对照组;但给予泰山赤灵芝多糖提取物干预后，骨大小、骨量均较模型组增加。结论:泰山赤灵芝多糖提取物具有抑制骨量丢失、预防骨质疏松的良好作用。

关键词骨质疏松;泰山赤灵芝多糖提取物;骨量;骨大小

骨质疏松症是主要发生在绝经后妇女和老年人中的一种代谢性骨病。随着我国人口的老龄化，骨质疏松症发病率日益增高，它的的高致残率和高病死率，严重威胁着中老年人的健康，对于它的防治是全社会关注的问题。

泰山赤灵芝是著名的泰山特产，为我国医药宝库中的珍品，《本草纲目》记载它具有“坚筋骨、利关节”的功效［1］，如果实验研究能证明泰山赤灵芝确实能够改善骨质疏松症，重视它的药用、市场价值，对其开发、保护具有重要意义。

1　材料与方法

1.1实验动物及仪器实验动物: 4月龄雌性Wistar大鼠60只，体重200～250 g，购于泰山医学院动物中心。

主要仪器:电子分析天平(上海FA1104B)、电子透射电镜(日本日立H-9500)。

1.2制备泰山赤灵芝多糖提取物( Taishan Ganoderma lucidum Extract，TGLE)按参考文献［2］采用水提法从泰山赤灵芝中制备提取物，采用蒽酮法［3］测定TGLE中灵芝多糖含量为20%。

1.3分组及骨质疏松模型的建立将实验大鼠随机分为5组:正常对照组、横型组、TGLE高剂量组、TGLE中剂量组、TGLE低剂量组。

骨质疏松模型的建立［4］:除正常对照组外，所有大鼠均用戊巴比妥钠( 40 mg/kg)腹腔内注射麻醉，除正常对照组单纯开腹手术外，其他组在无菌条件下切除双侧卵巢，羊肠线缝合，为预防感染，在切口缝合时敷少量青霉素粉，术后2万单位青霉素注射1次。

1.4干预术后第2天，称取TGLE高剂量组、中剂量组、低剂量组的Wistar大鼠的体重，每只大鼠腹部皮下注射TGLE灭菌生理盐水溶液，高剂量组10 mg/kg体重，中剂量组5 mg/kg体重，低剂量组1 mg/kg体重;各组每日定量喂食，饮用水量不限。室温( 25±2)℃，相对湿度( 45±10) %，保持良好通风。

1.5评价指标各组大鼠分别于实验后第12周末行动脉放血处死，摘取右股骨，测量骨大小及骨量。体重:每只大鼠动脉放血处死前称其体重。骨长度:用游标卡尺量取右股骨的长度。骨直径:分别于右股骨的近端1/3点、中点、远端1/3点，用游标卡尺量取其最大外径及最小外径，将6个数值相加后平均，作为骨直径的数值。骨体积:用阿基米德( Archimedes)原理测量右股骨的体积。骨湿重:右股骨剥净软组织后，即置于1/ 100 000分析天平上称其质量。骨干重:右股骨剥净软组织后置烤箱中于110℃下烤48 h至恒重，于1/100 000分析天平上称骨干重。

1.6统计学方法计量资料采用均数±标准差( x ±s)表示，数据分析采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

实验过程中无大鼠死亡。模型组的骨直径和骨体积较正常对照组降低( P＜0.05) ;骨长度、骨湿重、骨干重较正常对照组明显降低( P＜0.01)，说明去卵巢可使大鼠的骨大小和骨量下降。见表1。

TGLE高剂量组、中剂量组、低剂量组的骨直径和骨体积较模型组增加( P＜0.05) ;骨长度、骨湿重、骨干重较去卵巢组明显增加( P＜0.01) ;与正常对照组比较，上述各指标差异均无统计学意义( P＞0.05)。见表1。

TGLE高剂量组、中剂量组、低剂量组在骨直径、骨体积、骨长度、骨湿重、骨干重方面差异有统计学意义( P＜0.05)，见表1。

表1　TGLE不同剂量注射对骨大小和骨量的影响(±s)

表1　TGLE不同剂量注射对骨大小和骨量的影响(±s)

注:与正常对照组比较，1)P＜0.05，2)P＜0.01;与模型组比较，3)P＜0.05，4)P＜0.01;与高剂量比较，5)P＜0.05

组别　　体重( g)骨长度( mm)骨直径( mm)骨体积( cm3)骨湿重( mg)骨干重( mg)正常对照组　326.47±17.21　 37.54±1.24　3.90±0.15　0.72±0.09　781.47±24.31　 574.76±23模型组　325.47±15.33　 37.45±1.232)　3.73±0.191)　0.67±0.111)　731.47±24.222)　514.76±23.312)高剂量组　326.23±11.24　 37.53±1.194)　3.88±0.073)　0.71±0.083)　777.47±24.194)　569.52±23.404)中剂量组　325.91±19.13　 37.51±1.144) 5)　3.86±0.133) 5)　0.70±0.123) 5)　762.47±24.274) 5)　564.63±234) 5)低剂量组　325.74±13.19　 37.49±1.094) 5)　3.81±0.073) 5)　0.69±0.053) 5)　760.47±24.174) 5)　551.77±23.224) 5)

3　讨论

骨质疏松症一般发病缓慢，早期无明显临床表现，随着病情进展逐渐出现腰背疼痛、身长缩短、驼背、骨折、呼吸功能下降等症状［5］，严重威胁患者的正常生活质量，需积极进行治疗。骨质疏松症及其并发症，正成为亟待解决的现实问题。

《本草纲目》中记载:灵芝性温、味甘、微苦，有益心气、生血、助心安神、益肺气、坚筋骨、利关节、安神补肝等多种功能［1］，现在被国际医学界公认为最理想的人体整体平衡的调节剂，现代科学研究表明，灵芝含有多糖、多种氨基酸、甾类、三萜类、生物碱、有机酸、甘露醇等多种生物活性物质，最近的研究表明灵芝多糖有广泛免疫调节、抗氧化、降血脂、神经细胞保护等药理活性，具有成为治疗骨质疏松症的潜在能力［6－7］。

本研究从骨大小及骨量2个方面检测，能够较完整显示TGLE在不同剂量时对骨质疏松症的治疗效果。表1数据对比可以发现TGLE高剂量组效果最好，并且稍微优于TGLE中剂量组、TGLE低剂量组，但明显高于模型组，说明TGLE对大鼠骨质疏松模型有良好的治疗作用;其中应用高剂量TGLE，治疗骨质疏松症效果最佳。

本实验初步表明，TGLE对大鼠激素性骨质疏松具有促进其骨生成作用，可有效治疗激素性骨质疏松，对于它的临床应用、开发研究提供重要的参考数据。TGLE治疗骨质疏松症的作用机理，有待进一步深入研究。

参考文献:

［1］李时珍．《本草纲目》(校点本)［M］．2版．北京:人民卫生出版社，2005: 1985－912．

［2］李兆兰，郑涛．灵芝菌丝体和发酵液有效成分及含量分析［J］．中草药，1994，25 ( 1) : 17－19．

［3］汪沛洪．基础生物化学实验指导［M］．西安:陕西科学技术出版社，1986: 16－182．

［4］邓轩赓，陈建庭，查丁胜．低强度复合振动治疗去卵巢老龄大鼠骨质疏松实验研究［J］．中国运动医学杂志，2011，30 ( 3) : 265－269，274．

［5］常志芳，冯成龙，史晓霞，等．免疫与骨质疏松的研究进展［J］．中国骨质疏松杂志，2015，( 21) 4: 508－513．

［6］张维珂，黄文建，崔长松，等．泰山赤灵芝对提高运动员大强度训练中的免疫机能预防运动性疾病的实验研究［J］．体育科技文献通报，2014，22 ( 7) : 116－117．

［7］董少斌．补充番茄红素对篮球运动员大强度训练后免疫机能的影响［J］．北京体育大学学报，2008，31 ( 3) : 351－352，358．

(吴迪编辑)

Effect of Taishan Red Ganoderma Lucidum Extract on Bone Mass in Rats with Osteoporosis

GE Fan1，Ge Fuzhang2*
( 1．Middle School of Tai'an，Tai'an 271000，China; 2．Institute of Sports Medicine，Taishan Medical University)

AbstractObjective: To study the effect of Taishan red ganoderma lucidum extract ( TGLE) on bone size and bone mass in the whole body of ovariectomized female Wistar rats．Methods: A total of 50 female Wistar rats were randomly divided into 5 groups．There were 10 in normal control group．And bilateral ovaries in 40 rats were removed，30 of which were injected with different doses ( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg) of TGLE，and the remaining 10 were the control group．The bone size and bone mass of the right femur were measured after the experiment．Results: The bone size and bone mass in ovariectomized rats were lower than those in normal control group，but the bone size and bone mass were increased by TGLE．Conclusion: TGLE have good effect in inhibiting bone loss，preventing osteoporosis．

Key wordsosteoporosis; Taishan red ganoderma lucidum extract; bone mass; bone size

收稿日期2015－06－29

通讯作者葛孚章( 1971—)，男(汉)，副教授，研究方向:运动医学．E-mail: gefuzhang@ 163.com

基金项目泰安市2012年科技发展计划课题( No.20123052)

doi:10.16753/j.cnki.1008－2344.2016.01.006

中图分类号R681

文献标识码A

文章编号1008－2344( 2016) 01－0021－02