刘钢铁，薛月玲，杨爱青，田新新(泰安市妇幼保健院，山东泰安271000)



毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3、LL-37水平变化及意义

刘钢铁，薛月玲，杨爱青，田新新(泰安市妇幼保健院，山东泰安271000)

摘要：目的探讨不同病情毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3、抗菌肽37(LL-37)水平变化及意义。方法选择毛细支气管炎患儿102例，根据病情程度分为轻症组40例、重症组62例，同期选择体检正常同龄儿90例(对照组)。观察各组血清25-(OH)D3水平缺乏或严重缺乏情况，比较各组血清25-(OH)D3、LL-37水平，并分析二者的关系。重症组入儿科重症监护病房当天行第三代小儿死亡危险评分(PRISM-Ⅲ评分)，并分析其PRISM-Ⅲ评分与血清25-(OH)D3、LL-37水平的关系。结果对照组、轻症组和重症组血清25-(OH)D3水平缺乏或严重缺乏情况逐渐加重(P均<0.05)。轻症组、重症组血清25-(OH)D3水平明显低于对照组，且重症组低于轻症组(P均<0.05)。重症组血清LL-37水平明显低于对照组、轻症组(P均<0.05)，而对照组、轻症组比较无统计学差异。Pearson相关分析显示，毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3和LL-37水平无相关性(r=0.16，P>0.05)，重症组血清25-(OH)D3和LL-37水平亦无相关性(r=0.48，P>0.05)。重症组PRISM-Ⅲ评分为(5.0±2.3)分，与血清25-(OH)D3水平呈负相关(r=-0.33，P<0.05)，与LL-37水平无相关性(r=-0.18，P>0.05)。结论血清25-(OH)D3、LL-37水平降低可能与毛细支气管炎患儿病情加重有关。

关键词：毛细支气管炎；25羟基维生素D3；抗菌肽-37

毛细支气管炎是婴幼儿常见的呼吸道感染性疾病，其发病与机体固有免疫降低有关。近年研究发现，维生素D3在固有免疫中具有重要作用，其缺乏与婴幼儿毛细支气管炎发病有关[1，2]。有研究认为，维生素D3参与固有免疫的方式主要是通过上调人类抗菌肽37(LL-37)的表达[3]。但其与LL-37及毛细支气管炎病情的关系研究较少。25-(OH)D3是维生素D3在血液中的主要存在形式，在血液循环中较稳定，可反映机体维生素D3的真实水平[4]。本研究检测了毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3、LL-37水平，并对二者与毛细支气管炎病情的关系进行分析。

1资料与方法

1.1临床资料选择2014年10月～2015年3月我院收治的毛细支气管炎患儿102例。纳入标准：①符合《实用儿科学》(第七版)中毛细支气管炎的诊断标准；②年龄<2岁；③呼吸道合胞病毒咽拭子PCR(RSV-PCR)阳性。排除合并先天性心脏病、呼吸道先天畸形等基础疾病患儿。根据《毛细支气管炎诊断、治疗与预防专家共识(2014年版)》[5]，分为轻症组40例，男25例、女15例，年龄(11.8±2.8)个月；重症组62例，男42例、女20例，年龄(8.2±2.2)个月。另选同期在我院体检正常同龄儿90例(对照组)，男58例、女32例，年龄(12.8±3.3)个月。三组性别、年龄具有可比性。本研究经泰安市妇幼保健院医学伦理委员会批准，并获得监护人知情同意。

1.2相关指标观察

1.2.1血清25-(OH)D3、LL-37水平检测毛细支气管炎患儿入院当日、对照组体检日抽取外周静脉血2 mL，室温下放置2～4 h， 3 000 r/min离心15 min，分离血清，保存待测。血清25-(OH)D3水平由济南迪安医学检验中心检测，采用电化学发光法。血清25-(OH)D3水平分为三个等级[6]：不足(20～30 ng/mL)、缺乏(≥12~<20 ng/mL)、严重缺乏(<12 ng/mL)，统计各等级例数。血清LL-37水平由我院实验室采用ELISA法检测，具体步骤参照试剂盒说明书进行。

1.2.2相关性分析分析毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3和LL-37水平的关系。重症组入儿科重症监护病房当天行第三代小儿死亡危险评分(PRISM-Ⅲ评分)；分析PRISM-Ⅲ评分与血清25-(OH)D3、LL-37水平的关系。

2结果

2.1三组血清25-(OH)D3、LL-37水平比较见表1。对照组中血清25-(OH)D3水平不足25例、缺乏52例、严重缺乏24例，轻症组分别为11、24、12例，重症组分别为11、44、25例。三组血清25-(OH)D3水平缺乏或严重缺乏情况逐渐加重(P均<0.05)。

表1　三组血清25-(OH)D3、LL-37水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05；与轻症组比较，#P<0.05。

2.2相关性分析Pearson相关分析显示，毛细支气管炎患儿血清25-(OH)D3和LL-37水平无相关性(r=0.16，P>0.05)，重症组血清25-(OH)D3和LL-37水平亦无相关性(r=0.48，P>0.05)。重症组PRISM-Ⅲ评分为(5.0±2.3)分，与血清25-(OH)D3水平呈负相关(r=-0.33，P<0.05)，与LL-37水平无相关性(r=-0.18，P>0.05)。

3讨论

毛细支气管炎的病原菌多为呼吸道合胞病毒(RSV)。多数患儿感染RSV后表现为上呼吸道感染症状，仅部分患儿会出现严重毛细支气管炎或肺炎。有研究发现，维生素D3在毛细支气管炎发病中起关键作用[7，8]。维生素D3通过活化1，25-(OH)2D3，促进呼吸道上皮细胞和中性粒细胞表达LL-37、防御素β等，这些抗菌肽具有广谱抗微生物活性，对细菌、真菌及病毒均有杀灭作用，组成固有免疫的第一道防线[3]。1，25-(OH)2D3还可促进单核细胞分化为巨噬细胞，下调巨噬细胞炎症因子的表达[9]。因此，有学者将维生素D3称为固有免疫的调节者[10]。Hewison[11]研究发现，25-(OH)D3缺乏还可降低T淋巴细胞与B淋巴细胞数量，导致低免疫球蛋白血症，从而降低机体体液免疫。故25-(OH)D3缺乏可降低呼吸道屏障作用，增加RSV感染概率。

LL-37是迄今为止发现的人体内惟一抗菌肽cathelicidin成员，主要分布在血液中性粒细胞、单核细胞和皮肤、呼吸道上皮细胞等，具有广泛抗微生物活性。多数感染性疾病与LL-37低表达或功能失活有关。但LL-37与感染性疾病严重程度的关系仍存在争议。早期研究发现，LL-37(或其前体hCAP-18)与社区获得性肺炎、肺结核、慢性阻塞性肺疾病急性发作等疾病的严重程度密切相关。但Leow等[12]在对社区获得性肺炎的研究中发现，LL-37与患者30天病死率无明显相关性。

本研究结果显示，维生素D缺乏在毛细支气管炎患儿中普遍存在，近36%患儿存在严重缺乏。而对照组中维生素D水平也普遍偏低，缺乏者占到50%以上，其原因考虑与患儿年龄较小、多在秋冬季出生及纯母乳喂养比例较高有关。有研究证实，维生素D缺乏与儿童或成人危重症严重程度有关[13，14]。本研究结果显示，重症组血清25-(OH)D3水平与毛细支气管炎严重程度呈负相关，其血清LL-37水平较轻症组、对照组明显降低，但轻症组与对照组之间变化不大，可能与疾病本身及样本量小有关，仍需临床研究加以证实。大量体外研究证实，25-(OH)D3可以上调LL-37表达，但体内25-(OH)D3是否能上调LL-37表达，目前仍没有定论。本研究结果发现，血清25-(OH)D3与LL-37水平无相关性，与Jeng等[15]研究结果并不一致。这可能与研究的具体疾病不同有关，二者的关系还需进一步研究证实。总之，我们认为血清25-(OH)D3、LL-37水平降低可能与毛细支气管炎病情加重有关。

参考文献：

[1] Belderbos ME, Houben ML, Wilbrink B, et al. Cord blood vitamin D deficiency is associated with respiratory syncytial virus bronchiolitis[J]. Pediatrics, 2011,127(6):e1513-e1520.

[2] Inamo Y, Hasegawa M, Saito K, et al. Serum vitamin D concentrations and associated severity of acute lower respiratory tract infections in Japanese hospitalized children[J]. Pediatr Int, 2011,53(2):199-201.

[3] Liu PT, Stenger S, Li H, et al. Toll-like receptor triggering of a vitamin D-mediated human antimicrobial response[J]. Science, 2006,311(5768):1770-1773.

[4] Misra M, Pacaud D, Petryk A, et al. Vitamin D deficiency in children and its management: review of current knowledge and recommendations[J]. Pediatrics, 2008,122(2):398-417.

[5] 《中华儿科杂志》编辑委员会，中华医学会儿科学分会呼吸学组.毛细支气管炎诊断、治疗与预防专家共识(2014年版)[J].中华儿科杂志，2015，53(31)：168-170.

[6] Braun A, Chang D, Mahadevappa K, et al. Association of low serum 25-hydroxyvitamin D levels and mortality in the critically ill[J]. Crit Care Med, 2011,39(4):671-677.

[7] Randolph AG, Yip WK, Falkenstein-Hagander K, et al. Vitamin D-binding protein haplotype is associated with hospitalization for RSV bronchiolitis[J]. Clin Exp Allergy, 2014,44(2):231-237.

[8] 杜秋影，于立君，范慧子，等.维生素D缺乏与小婴儿毛细支气管炎发病的关系[J].实用儿科临床杂志，2011，26(4)：304-305.

[9] Admas JS, Ren S, Liu PT, et al. Vitamin D-directed rheostatic regulation of monocyte antibacterial responses[J]. J Immunol, 2009,182(7):4289-4295.

[10] White JH. Vitamin D as an inducer of cathelicidin antimicrobial peptide expression: past, present and future[J]. J Steroid Biochem Mol Biol, 2010,121(1-2):234-238.

[11] Hewison M. Vitamin D and the immune system: new perspectives on an old theme[J]. Endocrinol Metab Clin North Am, 2010,39(2):365-379.

[12] Leow L, Simpson T, Cursons R, et al. Vitamin D, innate immunity and outcomes in community acquired pneumonia[J]. Respirology, 2011,16(4):611-616.

[13] Amrein K, Zajic P, Schnedl C, et al. Vitamin D status and its association with season, hospital and sepsis mortality in critical illness[J]. Crit Care, 2014,18(2):R47.

[14] Madden K, Feldman HA, Smith EM, et al. Vitamin D deficiency in critically ill children[J]. Pediatrics, 2012,130(3):421-428.

[15] Jeng L, Yamshchikov AV, Judd SE, et al. Alterations in vitamin D status and anti-microbial peptide levels in patients in the intensive care unit with sepsis[J]. J Transl Med, 2009(7):28.

(收稿日期：2015-10-18)

中图分类号：R562.2

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)08-0075-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.08.030

通信作者：薛月玲(E-mail: xueyuelingfybjy@163.com)

基金项目：泰安市科技发展计划资助项目(2015NS1141)。