蔡准，张媛媛，张雪鹏，吴春涛，胡宝山

(华北理工大学附属医院，河北唐山063000)



缺氧条件下ADAM17-shRNA对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭、迁移的影响

蔡准，张媛媛，张雪鹏，吴春涛，胡宝山

(华北理工大学附属医院，河北唐山063000)

目的观察缺氧条件下靶向解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞MCF-7侵袭及迁移能力的影响。方法将对数生长期的MCF-7随机分为观察组、对照组、空白组，分别使用ADAM17-shRNA、无义序列shRNA、等量PBS转染细胞，置于含10%血清及氯化钴的培养基中(模拟缺氧环境)培养。转染48 h采用Real-time PCR法检测各组ADAM17 mRNA表达，体外侵袭实验检测细胞侵袭能力，细胞划痕实验检细胞迁移能力。 结果转染后观察组、对照组、空白组ADAM17 mRNA的相对表达量分别为0.77±0.19、1.19±0.22、1.00±0.01，观察组低于对照组和空白组，P均<0.05。转染后观察组、对照组、空白组穿膜细胞数分别为(37.94±4.97)、(94.84±5.39)、(100.60±5.45)个，观察组低于对照组和空白组，P均<0.05。转染后观察组、对照组、空白组划痕愈合率分别为23.49%±1.68%、57.83%±2.91%、57.02%±2.73%，观察组低于对照组和空白组，P均<0.05。结论缺氧条件下ADAM17-shRNA可抑制MCF-7的侵袭和迁移能力。

乳腺癌；缺氧条件；解聚素-金属蛋白酶17；短发夹RNA ；细胞侵袭；细胞迁移

解聚素-金属蛋白酶(ADAM)是一类具有多种生物学功能的细胞膜表面糖蛋白家族，与肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关[1]。ADAM17是研究最多的ADAM家族成员之一，是一种蛋白剪切酶，可通过剪切细胞膜外蛋白功能区使功能区脱落，启动或释放许多结构和功能不同的分子，从而调节细胞的增殖、运动能力等生物学行为[2,3]。本课题组前期研究结果表明，正常环境下靶向沉默ADAM17可抑制人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭及迁移[4]。2014年9月～2015年10月，我们观察了缺氧条件下靶向ADAM17的短发夹RNA(ADAM17-shRNA)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭和迁移的影响，旨在为ADAM17成为乳腺癌靶向治疗的新靶点提供依据。

1　材料与方法

1.1材料MCF-7购自中国医学科学院天津血液学研究所，培养于含10%标准胎牛血清、150 μmol/L氯化钴[5]、50 U/mL青霉素、50 μg/mL链霉素的DMEM培养基中，培养条件为37 ℃、5%CO2。……