北京市平谷区食品药品安全监控中心（101200）刘红玉 张悦

酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill. var.spinosa(Bunge)Hu ex H. F.Chou的干燥成熟种子[1]。味甘、酸，平，归肝、胆、心经。临床主要用于宁心安神，养心补肝，敛汗，生津。用于治疗虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗及津伤口渴等。滇枣仁，又称为理枣仁、缅枣仁，为同属植物滇刺枣Ziziphus mauritianaLam.的干燥成熟的种子，是云南的地方习惯用药，但与酸枣仁在性状、成分及功效等方面均有差异。近年来，由于资源紧缺，市场上用滇枣仁冒充酸枣仁出售的现象日益增多，因此进行二者的鉴别研究非常重要。本文对近年来酸枣仁及滇枣仁鉴别的相关文献进行梳理，为日常工作中鉴别酸枣仁与滇枣仁提供依据。

1 性状鉴别

酸枣仁表面为紫红色或紫褐色，而滇枣仁为棕黄色或棕色，色泽有差异。二者均呈扁圆形，一面隆起，另一面较平坦，但酸枣仁中间可见一条隆起的纵线纹，滇枣仁无此特征；二者表面平滑有光泽，有时有裂纹，质坚硬，破开种皮后有白色种仁一枚，富油性。气微，味淡[2]。酸枣仁与滇枣仁的表面特征略有差异，但差异不明显。此法可作为鉴别二者的辅助方法，但本法只能用于外观未破损的完整药材，对酸枣仁粉末或者以酸枣仁入药的中成药不能鉴别，具有局限性。

2 显微鉴别

取粉末，置显微镜下观察，均具有种皮栅状细胞、草酸钙簇晶及较少的石细胞，二者并无明显差异。观察其组织结构可以发现，酸枣仁的种皮栅状细胞较长，子叶表皮细胞中含1～2个细小草酸钙簇晶，营养层较宽。而滇枣仁的种皮栅状细胞较短，子叶表皮细胞中不含细小草酸钙簇晶，营养层较窄[3]。与性状鉴别相同，显微鉴别差异并不显著，只适用于完整药材，不适用于酸枣仁粉末及以酸枣仁入药的中成药。

3 理化鉴别

研究表明[4]，取粉末，甲醇提取，滴于滤纸，加氨水后置紫外灯光（365nm）下观察，酸枣仁呈天蓝色荧光，滇枣仁呈黄绿色荧光，可以将二者区别。此外，酸枣仁与滇枣仁对不同化学试剂，呈现不同颜色，可以用于二者鉴别[5]。例如取粉末加水微沸，过滤，取滤液用正丁醇萃取，萃取液置蒸发皿中蒸干，加冰醋酸，溶液倾入试管，加浓硫酸，二者均产生淡红色环，但酸枣仁溶液上层呈淡棕黄色，而滇枣仁呈翠绿色。二者粉末用乙醚振摇提取后挥尽乙醚，残渣加冰醋酸及浓硫酸，酸枣仁呈棕黄色，滇枣仁呈紫红色。也可以取粉末，加乙醇加热回流，滤液加入香草醛无水乙醇溶液，再加72%硫酸，酸枣仁溶液显浑浊的黄棕色，久置呈灰棕黄色；滇枣仁溶液显澄清的黄棕色，久置呈红棕色。此方法操作简单快速，结果明确，但是否适用于检验以酸枣仁入药的中成药还需进一步的实验验证，同时对于鉴别酸枣仁中掺入滇枣仁的掺伪品具有一定的难度。

4 薄层色谱鉴别

将酸枣仁与滇枣仁粉末的甲醇提取液作为供试品溶液进行薄层色谱鉴别。酸枣仁具有10个斑点，滇枣仁具有9个斑点，其中有8个斑点位置相同[6][7]。虽然二者的薄层色谱略有差异，但点样量、显色剂等因素会对薄层色谱的结果产生影响，故二者的鉴别需要进一步实验验证。除了采用薄层法对二者进行定性鉴别，也有人采用薄层扫描法对酸枣仁与滇枣仁中酸枣仁皂苷A、B进行定量分析，结果表明：酸枣仁中酸枣仁皂苷A、B的含量明显高于滇枣仁[8]。此方法不仅可以用于鉴别酸枣仁药材与饮片，也可以用于含有酸枣仁的中成药。

5 紫外光谱鉴别

取二者粉末的无水乙醇提取液，用紫外分光光度法测量其最大吸收，可以发现，酸枣仁的最大吸收峰在212nm，226nm，而滇枣仁的最大吸收峰211nm[6]。此法操作简单，结果明确，可以鉴别酸枣仁与滇枣仁，但对于酸枣仁中掺入滇枣仁的掺伪品，无法鉴别。有学者[9]对二者粉末的甲醇提取液进行紫外导数光谱测定，酸枣仁和滇枣仁的零阶导数光谱虽然在327.0nm和272±1nm处各有二吸收峰，但二者各峰的吸收强度差别较大，且酸枣仁与滇枣仁的二阶导数光谱在200～400nm范围内均无重叠，且信号尖锐，分辨率高，可以将二者鉴别开。

6 红外光谱鉴别

取二者粉末，加石油醚脱脂，于60℃干燥至恒重，溴化钾压片，分别测定其红外光谱，结果表明，酸枣仁与滇枣仁的红外光谱在1000～3500cm-1范围内无显著性差异[8]。

李彦文等取酸枣仁与滇枣仁的粉末，不脱脂直接进行溴化钾压片，测定其红外光谱，结果表明，在1800～960cm-1间，二者峰数、峰位、峰形和峰强基本一致，在1651cm-1、1545cm-1、1454cm-1、1240cm-1等附近有强吸收。另外酸枣仁在1745cm-1与1160cm-1附近则出现油脂峰；滇枣仁在1710cm-1附近出现羧酸峰，二者均由CO振动产生。说明酸枣仁富含油脂成分，滇枣仁富含酸类成分，可以鉴别二者。将二者的图谱做二阶导数处理，发现二者的峰数、峰强、峰谷等均有明显差异，也可以鉴别二者的不同。

7 HPLC-ELSD鉴别

采用蒸发光散射检测器(ELSD)，通过多成分的含量测定及HPLC指纹图谱的进行分析，对16批次酸枣仁、10批次的滇枣仁及1批次的掺伪品进行测定，研究结果表明，二者均可以检测到斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸，但酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量约为0.3257～1.6724mg/g，酸枣仁皂苷B约为0.1486～0.2985mg/g；滇枣仁中酸枣仁皂苷A、B的含量极低，有些样品中甚至检测不到；而二者掺伪品含酸枣仁皂苷A为0.0940mg/g，酸枣仁皂苷B为0.1010mg/g。因此，酸枣仁皂苷A、B可以作为鉴别二者的依据。同时二者的指纹图谱中，酸枣仁具有14个共有色谱峰，滇枣仁比酸枣仁多出3号峰及16号峰，这两个特征峰也可以用于鉴别酸枣仁与滇枣仁，但仍需要进一步实验鉴定其结构。

8 高效毛细管电泳法鉴别

通过酸枣仁及滇枣仁的蛋白质高效毛细管电泳谱图可知，二者的酸性提取液、碱性提取液及中性提取液中，酸枣仁样品与滇枣仁样品有不同的强吸收峰，其图谱存在显著差异，可以用于鉴别二者。用高效毛细管电泳（HPCE）法对酸枣仁及滇枣仁中有效成分酸枣仁皂苷B进行含量测定，测定结果表明：两者的酸枣仁皂苷B含量接近。HPCE法分离效率高，分析速度快，样品和试剂用量少，易于实现自动化。

9 UPLC-QTOF/MS鉴别

采用超高效液相色谱-飞行时间质谱法(UPLC-QTOF/MS法)鉴别酸枣仁与滇枣仁，此方法找出了酸枣仁与滇枣仁的专属性特征离子峰，与对照药材相结合，可以用于二者的鉴别，建立了酸枣仁和滇枣仁的离子鉴别方法。超高效液相色谱法分离能力高、灵敏度高、分析周期短，对二者的真伪鉴别及掺伪品的区分有一定优势。

10 DNA指纹图谱鉴别

刘萍等人根据中药材的遗传多态性，运用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析技术，对酸枣仁及其易混淆品、伪品进行分析比较。DNA指纹图谱可以看出，由于酸枣仁与滇枣仁来自同属植物，遗传基因具有一定的相似性，因此二者具有部分共同的谱带，但同时二者又有各自的特征性谱带，可以区别酸枣仁与滇枣仁，对于二者的掺伪品也可以进行鉴别。

从上可知，酸枣仁与滇枣仁的性状及组织结构存在差异，可以作为其鉴别方法，但只适用于外观完整的中药材，不能适用于药材粉末以及以酸枣仁入药的中成药；理化鉴别方法较多，易于操作，结果明确，可以与其他方法一起联合应用，作为鉴别的辅助方法，但对于成分较为复杂的中成药，中成药中含有的其他成分可能会影响理化鉴别的结果；而薄层法用于定性鉴别时，由于受点样量等因素的影响，作为二者的鉴别依据需要进一步实验验证；紫外光谱及红外光谱均为定性鉴别，通过酸枣仁与滇枣仁最大吸收峰的差异或其光谱中各峰数、峰位及峰强的差异鉴别酸枣仁与滇枣仁，而酸枣仁与滇枣仁在未进行脱脂处理的情况下，可以采用红外光谱或其二阶导数光谱进行鉴别，但石油醚脱脂后的光谱无显著差异。

HPLC-ELSD法测定了二者斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸的含量，结果表明，酸枣仁、滇枣仁及二者的掺伪品中的酸枣仁皂苷A、B含量不同；薄层色谱扫描法表明酸枣仁中酸枣仁皂苷A、B的含量明显高于滇枣仁；高效毛细管电泳法认为二者的酸枣仁皂苷B含量接近。这三种方法不仅可以应用于中药材及饮片，也可以用于含酸枣仁的中成药，2015版《中国药典》中采用HPLC-ELSD法测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量[1]。

DNA图谱法是根据中药材的遗传多态性，运用随机扩DNA多态性(RAPD)分析技术鉴别酸枣仁与滇枣仁，灵敏性高，结果明确。但由于RAPD分析技术应用于中药仍具有一定的局限性，且对于不同生长年限造成的药材差异尚无法进行鉴别，还需要进一步的研究。

以上的检验方法各有利弊，日常工作中可以将酸枣仁的各项鉴别方法相结合，定性定量方法相结合，以更好发挥各鉴别方法的优势。