人脐血间充质干细胞移植治疗长骨骨折术后骨不连17例

由于近年骨科研究的进步，骨折愈合和治疗的效果已得到极大提高，但在骨修复、骨折愈合程度上依然不足。干细胞的研究应用给骨科疾病带来了新的希望，它能在特定的信号作用下定向分化为骨细胞、神经细胞、骨骼肌细胞等，成为特殊功能的生物组织。干细胞有三个主要来源，即胚胎、成体和脐血，由于脐血间充质干细胞(hUC-MSCs)取材容易，采集方便，供源充足，给骨组织工程带来了一种新的、理想的种子细胞。本研究采用人脐血间充质干细胞移植治疗骨折术后骨不连患者17例，取得良好疗效。

临床资料：骨折术后骨不连患者17例，男10例，女7例；年龄22～65岁，平均36.8岁；病程8～32个月，平均12.5个月。纳入标准：①骨折术后8个月检查显示无骨痂生长，骨折部位无进行性修复迹象，骨折片间隙<5 mm；②无短缩、成角及移位现象；③为非感染性骨不连；④行局部植骨后8个月仍无明显骨痂生长。排除标准：①骨折术后8个月检查显示有部分骨架生长；②确诊骨不连后行局部植骨后8个月有部分骨痂生长；③合并短缩、成角及移位现象；④骨折后骨折端及附近存在感染灶。17例患者中，肱骨骨折5例，胫骨干骨折9例，股骨骨折3例。

hUC-MSCs获取及应用：①hUC-MSCs获取：严格无菌条件下，采集健康产妇志愿捐献的脐带血，取30 mL外周血，用PBS按照1∶3稀释。采用密度梯度离心法，用人淋巴细胞分离液分离得到外周血单个核细胞，下层为人淋巴细胞分离液，上层为稀释后的外周血，二者体积比为1∶2。以1 500 r/min离心40 min，5档升速，0档降速。离心取白膜层，PBS稀释，330 g×15 min常温离心。再用大体积PBS洗2遍，每遍330 g×10 min。经过磁珠分选及培养获得hUC-MSCs。取第3代细胞应用条件培养基进行成骨诱导2周，控制移植用hUC-MSCs浓度>103/mL，总数>50×107个稀释在30～50 mL中。②hUC-MSCs应用：骨折断端处消毒，行局部麻醉，在X线透视下，采用注射器针头对骨折线定位，确认针尖处于骨折缝隙内，将hUC-MSCs准确注射到骨折端，注射时如感阻力较大，可加压缓慢注射，术后略加压包扎，不使用抗生素。每1……