王　葳　刘冬丽　李维熙　王文静*　吴建敏

1.云南中医学院中药学院，云南　昆明　650500；2.昆明市儿童医院，云南　昆明　650034



蒲地蓝消炎片中黄芩苷的含量测定

王葳1刘冬丽1李维熙1王文静1*吴建敏2

1.云南中医学院中药学院，云南昆明650500；2.昆明市儿童医院，云南昆明650034

【摘要】目的：探讨蒲地蓝消炎片中黄芩苷的含量测定方法。方法：利用高效液相色谱法对蒲地蓝消炎片中黄芩苷的含量测定进行测定。结果：黄芩苷的线性范围为0.422～16.88μg，R2=0.9999,加样回收率为95.03%～101.1%(RSD=1.99%)。结论：建立的方法更简便、准确、易控，可用于蒲地蓝片中黄芩苷的含量测定。

【关键词】蒲地蓝消炎片；黄芩；黄芩苷；HPLC

蒲地蓝消炎片收载于中药部颁标准中[1]，由黄芩、蒲公英、板蓝根、苦地丁等四味中药组成，具有清热解毒、抗炎消肿的功效，临床可用于疖肿、咽炎、扁桃腺炎等。黄芩是蒲地蓝消炎片的主药之一，具有清热燥湿、泻火解毒，止血的功效，其有效成分为黄芩苷等多种成分[2]。现代药理研究表明，黄芩具有抗炎、保护脑缺血及心肌缺血再灌注损伤的神经、抗寄生虫等作用[3]。为控制该制剂的质量，对组方中黄芩药材的质量情况进行检测，并制定合理检查标准。

蒲地蓝消炎片在市场上销售的生产厂家较多，但目前尚无统一的质量控制方法。研究根据组方及《中国药典》中黄芩药材项下黄芩苷含量要求，依托云南白药集团生产的多批蒲地蓝消炎片样品，对原有HPLC测定法进行了改进和提高，制订蒲地蓝消炎片中黄芩苷含量的测定方法，以控制制剂中黄芩药材的投料量，从而保证药物的质量和疗效。

1仪器与材料

1.1仪器Waters2695高效液相色谱仪(紫外检测器)。

1.2材料黄芩苷对照品(批号：110715-201318，中国药品生物制品检定所)；蒲地蓝消炎片(云南白药集团股份有限公司)。

2方法与结果

2.1色谱条件Sunfire C18色谱柱 (4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相甲醇-0.5‰磷酸水溶液(43∶57)；流速1.0ml/min；柱温30℃；进样量20μl；检测波长：280 nm[4-5]。

2.2对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品21.1mg，加甲醇溶解并定容至50 ml (0.422 mg/ml)，即得。

2.3供试品溶液的制备取重量差异项下本品10片，除去包衣，精密称定，研细，混匀，取约0.5g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称重，超声处理(功率180w、频率53kHz)60min，放置至室温，用70%甲醇补足减失的重量。摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4阴性供试品溶液取按处方制备方法制备缺黄芩的阴性对照样品2g，按供试品溶液的制备方法制备，即得。

2.5专属性考察按照“2.1”条件进样，结果表明供试品的色谱图中，有一个色谱峰与对照品色谱峰的保留时间一致，空白样品的色谱图中在与对照品相同保留时间(±5%)位置上没有吸收峰，说明该制剂中的其它药物及辅料对黄芩苷的含量测定没有干扰，用本法测定黄芩的含量专属性较强、灵敏度高。见图1。

2.6线性关系考察分别精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0ml，稀释并定容至10ml，注入液相色谱仪，按照“2.1”的色谱条件进行分析。以峰面积Y对进样量X回归处理，得回归方程为Y=3311222.6X+ 38811.9 (R2=0.9999)，黄芩苷在0.422～16.88μg范围内，线性关系良好。

2.7精密度实验分别精密吸取黄芩苷对照品溶液、供试品(ZAB1302) 溶液各20μl，连续进样6次，按“2.1”色谱条件测定峰面积，结果对照品峰面积RSD0.33%，供试品峰面积RSD0.37%，结果表明精密度良好。

2.8稳定性实验分别取黄芩苷对照品溶液(0.014 mg/ml)、供试品(ZAB1302) 溶液，按“2.1”项下方法，于第0、2、4、6、8、24 h测定。黄芩苷对照品峰面积RSD0.40%，供试品溶液的峰面积RSD0.49%。结果表明黄芩苷对照品溶液和蒲地蓝消炎片供试品溶液在24h内稳定。

2.9重复性实验取同一批蒲地蓝消炎片(批号：ZAB1302)，按供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液，按“2.1”项下方法分别测定，以供试品中黄芩苷的含量计算，RSD0.78%。

2.10加样回收率实验分别取同一批已知含量的蒲地蓝消炎片(批号：ZAB1302，黄芩苷15.38mg/片)9份，每份0.25g，精密称定，精密加入黄芩苷对照品溶液适量(3个水平，每水平3份)，挥干甲醇，按“2.3”项下方法制备供试液，按“2.1”项下方法测定黄芩苷含量，以加入量计算，回收率在95.03%～101.1%，平均回收率为96.94%，RSD1.99%；结果见表1。

2.11样品含量测定取蒲地蓝消炎片10批，按“2.1”项下方法测定其中黄芩苷的含量，每批测定两次，其结果见表2，每片黄芩苷含量在11.14～16.44mg之间。

表1　蒲地蓝消炎片样品加样回收率试验结果

表2　10批蒲地蓝消炎片中黄芩苷含量测定结果

3讨论

蒲地蓝消炎片方中黄芩用量较大，根据《中国药典》规定，其主要成分黄芩苷含量相对较高，故将黄芩苷作为该制剂质量控制的含量指标。但复方中各药材之间相互影响，含量测定方法、规定限量等需做相应的调整，并根据实际测定情况制订相应的具有实用价值的标准。

选择RP-HPLC法检测波长时，取黄芩苷对照品溶液在190～800nm范围内测量，结果表明280 nm为最大吸收，且样品中其它成分在此波长处对测定无干扰，灵敏度高，可准确测定黄芩苷，故测定波长选定280 nm[4]。

《中国药典》规定黄芩中黄芩苷的限量检查方法需要煎煮提取，但在复方中煎煮提取法损失较多，且耗时、繁琐，经过正交实验我们选择了超声提取法，结果表明该法不仅简便、易行，且准确度更高。而药典中规定的黄芩苷限量检查的RP-HPLC方法流动相为甲醇-水-磷酸 (47∶53∶0.2)，经过试验，选择甲醇-0.5‰磷酸水溶液(43∶57)为流动相，改良后的条件更有利于保护色谱材料，且易于实现。

参考文献

[1]WS3-B-0649-91，中国药品部颁标准[S]，中药分册.

[2]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[S]．北京：中国医药科技出版社，2010．

[3]文敏，李雪，付守廷．黄芩苷药理作用研究新进展[J]．沈阳药科大学学报，2008，25(2)：158-162．

[4]邵礼梅，王云龙，李延雪．高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎片中黄芩苷与黄芩素含量[J]．中国药业，2012，21(4)：37-38．

[5]静国峰．HPLC测定蒲地蓝消炎片中黄芩苷的含量[J]．中国中药杂志，2008，33(15)：1919．

Determination of baicalin of Pudilanxiaoyan Tablet by HPLC

WANG Wei1LIU Dongli1LI Weixi1WANG Wenjing*WU Jianmin2

1.Yunnan university of Traditional Chinese Medicine, Kunming 650500, China;2.Kunming Children′s Hospital, Kunming 650228, China

Abstract:HPLC was used to determine the content of baicalin to control amount of Scutellaria baicalensis in the Pudilanxiaoyan Tabelet. The content of baicalin range between 0.422 to 16.88 μg, R2=0.9999, the recovery range from 95.03to 101.1%. The method is quick, sensitive and repeatable for determination of the content of baicilin of Pudilanxiaoyan Tablet.

Key words:Pudilanxiaoyan Tablet; Scutellaria baicalensis; baicalin; HPLC

(收稿日期：2015.11.20)

【中图分类号】R284.1

【文献标志码】A

【文章编号】1007-8517(2016)03-0017-02

作者简介：王葳，女，讲师，研究方向：分析化学。E-mail：329999806@qq.com通信作者：王文静，女，副教授，研究方向：中药化学成分与质量研究。E-mail：2027617008@qq.com