李曲文，陈爱平，谢芳钦，林震宇

(1、福建省疾病预防控制中心，福建350001；2、福建省人兽共患病研究重点实验室，福建350001)



·病例报告·

与脑膜炎奈瑟菌血清交叉的落菲不动杆菌的鉴定

李曲文，陈爱平，谢芳钦，林震宇

(1、福建省疾病预防控制中心，福建350001；2、福建省人兽共患病研究重点实验室，福建350001)

关键词：脑膜炎奈瑟菌；洛菲不动杆菌；血清交叉

不动杆菌属（Acinetobacter）归于奈瑟菌科，不动杆菌属为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性、不能运动的革兰阴性杆菌。菌体多为球杆状，常成双排列，看似双球菌[1]。有时临床易于脑膜炎奈瑟菌混淆。本文对一株与脑膜炎奈瑟菌有血清交叉的洛菲不动杆菌的鉴定报告如下。

1　材料与方法

1.1菌株来源医院从一个8个月幼儿脑脊液培养分离到一株疑似脑膜炎奈瑟菌。（上机VITEK 2奈瑟菌（NH）鉴定卡：鉴定编码：3237400000，提示脑膜炎奈瑟菌，鉴定率93%）。

1.2实验材料血平板、巧克力平板购自环凯有限公司；乳胶凝集试剂购自英国OXOID公司；流脑诊断血清购自天津生物芯片公司，PCR反应试剂、DL 2000 Marker、购自Takara公司；琼脂糖、溴化乙锭(10mg/m1)等购自上海生工公司。Gel Doc XR+凝胶成像系统，Basic电泳仪，PCR扩增仪为G-Storm（英国GeneTech公司）。

1.3基因引物本研究所用的基因引物（参考文献[2]），全长16S RNA基因（参考文献[3])，寡核苷酸和测序均由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

1.4模板的制备分纯的细菌菌落，直接刮取适量于300μl的纯水制备成菌悬液，100℃煮沸裂解10min，10000r/min离心5min，取上清做为PCR检测的DNA模板。

1.5PCR反应条件PCR反应均采用20μl的反应体系，各组成成分的终浓度分别为：rTaq DNA聚合酶0.5U，dNTP 200μmol/L，上游引物0.4μmol/L，下游引物0.4μmol/L，DNA模板3μl。……