苏　爱，朱红燕，徐宏伟，刘　颖，梁　惠

(1.青岛大学医学院细胞与分子生物学实验室，山东 青岛　266071；2.山东省青岛圣德脑血管病医院，山东 青岛　266100；3.青岛市李沧区圣德老年护养院，山东 青岛　266100；4.青岛大学医学院医学营养研究所，山东 青岛　266021)



海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤的保护作用

苏爱1，朱红燕2,3，徐宏伟1，刘颖1，梁惠4

(1.青岛大学医学院细胞与分子生物学实验室，山东 青岛266071；2.山东省青岛圣德脑血管病医院，山东 青岛266100；3.青岛市李沧区圣德老年护养院，山东 青岛266100；4.青岛大学医学院医学营养研究所，山东 青岛266021)

中国图书分类号：R-332；R151.41；R282.77；R322.47；R345.99；R575.01；R977.3

摘要：目的探讨海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤保护作用。方法门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代肝细胞。MTT实验检测乙醇和海兔素最佳作用剂量及肝细胞活力。酶学实验检测细胞AST、LDH、SOD、MDA、GSH 水平；流式细胞术检测细胞凋亡情况；单细胞凝胶电泳观察细胞DNA损伤状况；JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平；比色法及Western blot检测细胞CYP2E1活性及蛋白表达。结果经30 mg·L-1海兔素预作用2 h，再与300 mmol ·L-1乙醇共作用8 h后，肝细胞活力较酒精模型组明显上升，AST和LDH释放也得到明显抑制；同时，肝细胞SOD和GSH 水平明显升高，MDA含量则明显降低，差异均具有显著性(P<0.05)。海兔素干预后，肝细胞凋亡率明显降低，DNA损伤及线粒体膜电位水平明显得到改善。 海兔素干预后，肝细胞CYP2E1活性及蛋白表达水平明显受到抑制(P<0.05)。结论海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤具有保护作用，其作用机制可能与海兔素抑制酒精对CYP2E1的活化，缓解氧化应激，提高机体抗氧化能力有关。

关键词：海兔素；大鼠；原代肝细胞；酒精性损伤；抗氧化；凋亡；CYP2E1

长期过量酒精摄入可导致酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)的发生。ALD发病机制复杂，其中以细胞色素P450 2E1(CYP2E1) 活化及其引发的氧化应激损伤学说备受关注[1-3]。研究证实，萜类化合物具有抗炎、抗氧化、保肝等多种生物学活性[4-5]。……