杨美英, 于　亭, 王春红, 孙合美, 刘晶晶, 武志海

(1吉林农业大学 生命科学学院， 吉林 长春 130118； 2 吉林农业大学 农学院， 吉林 长春 130118)



大豆卵磷脂和乐果有机磷降解菌的分离鉴定及酶活性比较

杨美英1†, 于亭1†, 王春红1, 孙合美1, 刘晶晶1, 武志海2

(1吉林农业大学 生命科学学院， 吉林 长春 130118； 2 吉林农业大学 农学院， 吉林 长春 130118)

摘要：【目的】明确2株有机磷降解菌Yj2和Yj3对大豆卵磷脂和乐果有机磷的降解特性及酶活性。【方法】利用16S rDNA鉴定从大豆土壤中分离得到的Yj2和Yj3菌株，在菌株最佳生长条件下，测定了不同磷源时菌体的酶活性并分级纯化了有机磷降解酶。【结果】 Yj2为醋酸钙不动杆菌Acinetobacter sp.，其最佳生长碳源为葡萄糖，氮源为硫酸铵，pH为8；Yj3为芽孢杆菌Bacillus sp.，其最佳生长碳源为葡萄糖，氮源为蛋白胨，pH为9。大豆卵磷脂为磷源时，Yj3的菌体生长情况稍优于Yj2。乐果为磷源时，Yj2的菌体生长情况稍优于Yj3；72 h内Yj2酸性和碱性磷酸酶活性整体高于Yj3，而有机磷降解酶活性低于Yj3。硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析分别从Yj2和Yj3菌体中成功分离纯化了有机磷降解酶，SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白均为单一条带。Yj2硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的7.77倍，硫酸铵沉淀为粗酶的1.35倍。Yj3硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的5.07倍，硫酸铵沉淀为粗酶的1.53倍。【结论】菌株Acinetobacter sp. Yj2和Bacillus sp. Yj3都具有降解大豆卵磷脂及乐果有机磷的特性，对有机磷降解起主要作用的是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及有机磷降解酶，它们在2株菌株对大豆卵磷脂和乐果降解过程中所起的作用有明显差异。……