郑盛武， 赖　丹， 赵肃清

(广东工业大学 轻工化工学院, 广东 广州 510006)



邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定

郑盛武， 赖丹， 赵肃清

(广东工业大学 轻工化工学院, 广东 广州 510006)

摘要：【目的】制备并鉴定1种新型邻苯二甲酸二丁酯人工抗原。【方法】以4-硝基邻苯二甲酸为原料，经过酯化、还原生成4-氨基邻苯二甲酸二丁酯(DBAP)，DBAP再与戊二酸酐反应，衍生生成4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯(DBCP)。将合成的半抗原衍生物DBCP通过活性酯法与牛血清蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联，得到人工抗原。通过免疫新西兰大白兔获得抗血清，经间接竞争酶联免疫法(icELISA)检测抗体特异性。【结果】经质谱、氢核磁共振谱图鉴定，半抗原衍生物合成成功，经紫外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫试验证实偶联成功，并计算得出DBCP与载体蛋白BSA和OVA的结合比分别为11∶1和17∶1。经icELISA法检测，兔1和兔2的血清效价均达到1∶128 000，IC50分别为301 和308 ng·mL-1，反应特异性较好。【结论】半抗原衍生物的合成是方便、安全的。邻苯二甲酸人工抗原的成功制备使获得DBP多克隆抗体以及建立DBP免疫分析方法成为可能。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯； 人工抗原； 光谱； 免疫鉴定

邻苯二酸酯类化合物(PAEs)又称钛酸酯，是大约30种化合物的总称，主要用作塑料的增塑剂，以增大塑料的可塑性和强度[1]。邻苯二甲酸二丁酯(DBP)是塑化剂的一种，工业上主要用于硝基漆和聚氯乙烯(PVC)塑料的生产，以增强产品的柔韧性。此外，DBP还用于生产防泡剂、乳胶黏合剂和纺织助剂等[2]。塑化剂的大量生产和频繁应用，导致在人们的日常生活中塑化剂污染严重。……