侯临平 杨俊英

临床研究

临汾地区丙型肝炎病毒感染检测结果分析

侯临平 杨俊英

目的了解本地区普通人群中丙型肝炎病毒(HCV)感染实验室检测情况。方法收集2015年1月1日至12月31日来山西省临汾市人民医院就诊的申请检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的门诊及住院患者标本共21 120例，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗-HCV的筛查，对ELISA筛查阳性的标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法进行丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)检测。结果21 120例标本中抗-HCV筛查阳性率为0.69%(146/21 120);在146例抗-HCV标本中其中47例检测出HCV RNA，检出率为32.2%(47/146);检测出HCV RNA标本的抗-HCV的浓度试剂测量值/阳性判定值之比值(S/CO值)介于8.32～25.80(＞ 8.0)。结论在山西临汾地区就诊的普通人群中抗-HCV阳性分布比例以及HCV RNA检出率均较低，可检出HCV RNA的患者抗-HCV浓度相对较高。

丙型肝炎病毒;丙肝抗体;丙肝RNA

丙型肝炎病毒(HCV)是导致慢性肝炎的主要病原体之一，感染后临床表现较为隐匿，就诊率及治疗率较低，易转化为慢性肝炎。2006年全国血清流行病学调查显示，我国1～59岁人群丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)流行率为0.43%［1］。根据《丙型肝炎防治指南》(2015年更新版)［2］丙肝的实验室检查项目，目前有抗体检测、丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)定量检测、丙肝核心抗原的检测。现将本地区2015年1月1日至12月31日检测抗-HCV 及HCV RNA的结果分析报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 收集2015年1月1日至12月31日在本院申请检测抗-HCV的门诊及住院患者标本共21 120份，离心取血清，-70℃冰箱保存。

1.1.2 主要试剂与仪器 TECAN酶标仪、洗板机; 抗-HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂由厦门英科新创公司生产，HCV RNA定量检测试剂由湖南圣湘生物科技公司生产，ABI-7500实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪由美国ThermoFisher公司生产。

1.2 方法

1.2.1 抗-HCV检测 严格按照试剂盒说明书操作，室内质控品由厦门英科新创公司生产，含量2 NCU/mL。

1.2.2 HCV RNA检测 抗-HCV阳性的标本采用实时荧光定量PCR方法进行HCV RNA检测，试剂盒检测下限为25 U/mL，定量检测的线性范围为50～1.0×108U/mL，质控品购自卫生部临床检验中心。质控品及样本检测前均于-70℃冰箱保存。RNA的提取采用磁珠法，扩增设有内标，用来监测待测样本中是否具有PCR抑制物，避免假阴性;内参比荧光用来校正加样误差和管间差异。该试剂盒与甲肝病毒、乙肝病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒螺旋体、巨细胞病毒等无交叉反应。

2 结果

146例抗-HCV阳性患者中HCV RNA检出组与未检出组病毒检测结果比较 ELISA检测抗-HCV，21 120份标本中筛查阳性的为146例，阳性率为0.69%;在146例抗-HCV阳性标本中检测出HCV RNA 47例检出率为32.2%，其抗-HCV浓度试剂测量值/阳性判定值之比值(S/CO值)分布于8.32～25.80(＞ 8.0)，占抗-HCV阳性的32.2% (47/146)。见表1。

3 讨论

表1 146例抗-HCV阳性患者HCV RNA定量检测结果

丙肝呈全球性流行，不同性别、年龄、种族人群均对HCV易感。据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为2.8%，约1.85亿人感染HCV，每年因HCV感染导致死亡的病例约35万例。全国各地抗-HCV阳性率有一定差异，以长江为界，北方高于南方(0.53%比0.29%)［2］。

HCV感染的实验室检测包括抗免疫学方法测抗原和抗体，以及用分子生物学的方法对HCV RNA进行定量、基因分型检测等。在大多数基层医院，主要采用ELISA检测抗-HCV，用于HCV感染的诊断、健康人群体检和血液筛查;当抗-HCV筛查结果阳性时，应进一步采用重组免疫印迹试验(RIBA)来确认，当RIBA结果不确定时，可以采用PCR方法检测HCV RNA;若实验室条件有限，不能开展RIBA的检测时，对于初筛阳性的标本，可直接用PCR检测HCV RNA来确认。

用ELISA检测抗-HCV经常存在一定的假阳性及假阴性。存在假阳性的原因可能是:① 类风湿因子(RF)的干扰:在抗-HCV测定中，如血清或血浆标本中存在RF，则其可与固相上的免疫球蛋白G (IgG)和酶标的IgG结合，而出现假阳性反应。② 高免疫球蛋白血症:抗-HCV的测定，目前国内外大部分试剂盒均采用间接法，最后一步加入的是酶标抗人IgG。血清标本中高浓度的非特异IgG，可能会致其非特异地吸附于固相表面，从而与后加的酶标抗人IgG结合，造成假阳性结果。③ 标本中存在的某些成分的干扰造成假阳性［3］。而血液透析和免疫功能缺陷或合并HIV感染者可出现假阴性，另外当患者处于急性感染窗口期时也可出现抗-HCV阴性。本次实验抗-HCV的测定采用厦门英科新创的试剂，有研究报道其S/CO值≥8.6时，95%以上可能为真阳性［4］。本次实验中普通人群中抗-HCV阳性率为0.69%，与指南中报道的0.53%接近。

为了解抗-HCV阳性时HCV RNA的检出情况，本次对抗-HCV筛查阳性的146例标本进行了HCV RNA的定量检测。HCV RNA定量检测适用于HCV现症感染的确认、抗病毒治疗前基线病毒载量分析以及抗病毒治疗过程中及治疗结束后的应答评估。由于RIBA检测费用较高，对于抗-HCV阳性标本，大多数临床医师会采取检测HCV RNA来加以确认，阳性结果可提示现症活动性感染;单次的HCV RNA阳性可确定HCV感染，但单次的阴性并不能完全排除HCV感染，应重复检查。

从研究的结果可看出，抗-HCV阳性时HCV阳性检出率为32.2%，能检测到HCV RNA的标本其抗-HCV浓度略高(S/CO值为8.32～25.80);而浓度较低(S/CO值为4.68～7.79)的标本未检测到HCV RNA。说明对于现症感染来说，血清抗-HCV浓度越高，HCV RNA检出的可能性越大。可能由于例数较少，本次试验未出现抗-HCV浓度值较高但未检测出HCV RNA的情况。

有文献［5］报道，在血液透析患者中，抗-HCV阳性率为8.69%;且HCV RNA阳性率为58.97%，显著高于普通人群，可能因血液透析患者免疫功能低下，病毒复制比较活跃导致。

在抗-HCV浓度较低的阳性标本中未检测出HCV RNA，其原因可能为:试剂盒的灵敏度低;患者处于直接抗病毒药物治疗期间，HCV RNA迅速降低甚至低于检测下限;抗-HCV为假阳性，非现症感染。因此，当抗-HCV阳性时，需要采用RIBA 或PCR加以确认。

综上所述，检测HCV感染时，实验室最常用的指标抗-HCV以及HCV RNA之间存在一定的相关性，对于抗-HCV阳性的患者，其抗-HCV浓度越高，检出HCV RNA的可能性越大，提示HCV现症感染; 但HCV RNA检出率较低，因此在诊断HCV感染时，应采用RIBA或PCR并结合临床做出准确的判断。

1 陈圆生,李黎,崔富强，等.中国丙型肝炎血清流行病学研究.中华流行病学杂志，2011，32:888-891.

2 中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.丙型肝炎防治指南(2015年更新版).中华实验和临床感染病杂志(电子版)，2015，9:590-607.

3 张瑞，李金明.丙型肝炎病毒感染临床检测程序的建立及结果报告与解释.中华检验医学杂志，2010，33:990-992.

4 任芙蓉，龚晓燕，李京京，等.献血员丙型肝炎病毒抗体酶免疫法检测试剂的测量值与其真阳性的相关性.中华肝脏病杂志，2005，13:255-258.

5 门昆，魏殿军.天津市某三甲医院维持性血液透析患者血源性病毒感染情况分析.实用检验医师杂志，2013，5:40-42，64.

(本文编辑:李银平)

Analysis of the laboratory test results about Hepatitis C virus (HCV) in Linfen region

HOU Lin-ping, YANG Jun-ying. Department of Clinical Laboratory, Linfen People's Hospital, Linfen 041000, Shanxi, China

ObjectiveTo know the condition of HCV test results among the general population in Linfen region .Methods21 120 cases were collected that outpatient and inpatient need to test the hepatitis c virus antibody (anti-HCV) from January 1 to December 31, 2015 in Linfen people's hospital, Shanxi Province, with screening the anti-HCV by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) , and the hepatitis C virus nucleic acid (HCV RNA) was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR) for anti-HCV positive specimens.ResultsThere were 146 (0.69%) anti-HCV positive among 21 120 cases , there were 47 cases that HCV RNA could be detected among the 146, detection rate was 32.2% . The concentration of the anti-HCV (S/CO value) was between 8.32～25.80 (＞ 8.0) among HCV RNA positive specimens .ConclusionAnti-HCV positive distribution proportion in the general population and HCV RNA detection rate were low in Linfen region, the concentration of the anti-HCV (S/CO value) was relatively higher in the patients with HCV RNA positive .

Hepatitis C virus . Hepatitis C antibody . Hepatitis C virus nucleic acid

041000 山西临汾，临汾市人民医院检验科

侯临平，729167644@qq.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2016.04.009

2016-09-30)