不同硫酸蒽酮比色定糖法的比较
2016-03-12刘桂茹
天津农业科学 2016年3期



摘 要:为选定适合的实验室测糖方法,分别采用浓硫酸外加热法、稀硫酸外加热法及水合热法等设置的不同加热时间对蔗糖标准样品进行测试,并对其易操作性、数据稳定性等方面进行综合比较。结果表明,稀硫酸外加热法由于具有测定数据稳定性好、易于操作、药品用量少、吸光度值范围适宜、显色反应完全等优点,被确定为最合适的实验方法。
关键词:硫酸蒽酮法;比色定糖;实验方法
中图分类号:TG115.3+2 文献标识码:A DOI 编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2016.03.002
硫酸蒽酮比色法是植物营养和生理代谢中最常用的测糖方法[1-6],其原理是糖类(包括多糖)在硫酸的作用下,脱水生成糠醛或羟甲基糠醛,然后蒽酮与糠醛或羟甲基糠醛经脱水缩合产生蓝绿色的糠醛衍生物,在620 nm处有最大吸收。颜色深浅可作为定量的标准。该法由于所需试剂简单,操作方便,并具有较高的灵敏度,适于微量测定,已得到普遍应用。
在很多文献资料中,都有关于蒽酮比色法的介绍。但是不同作者所介绍的方法中,蒽酮试剂的用量、硫酸的浓度以及不同试剂与糖显色所需的时间等差异很大。总的来讲,可以概括为两大类,即外加热法和水合热法[7],外加热法又分为稀硫酸外加热法[8]和浓硫酸外加热法[9]。
本试验通过对3种常见的蒽酮比色定糖法进行比较,旨在找到最适合本化验室应用的实验方法。
1 材料和方法
1.1 试剂与仪器
标准样品:浓度分别为0,10,20,30,40,50,60 g·mL-1的葡萄糖标准溶液。
实验仪器:万分之一天平,日本岛津紫外分光光度计,离心机(4 000 r·min-1),三用恒温水浴锅。……
登录APP查看全文
