高红艳　杨元华　刘静　程媛媛　韩汝春　杨晓绒

【摘要】目的：探讨白番红花球茎醇提取物的镇痛抗炎作用。方法：采用小鼠醋酸扭体法观察白番红花球茎醇提取物的镇痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察白番红花球茎醇提取物的抗炎作用。结果：白番红花球茎醇提取物高、中、低剂量组能显著减少醋酸所致小鼠的扭体次数，与空白对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；白番红花球茎醇提取物高剂量组能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：白番红花球茎醇提取物有明显的镇痛作用，高剂量有一定的抗炎作用。

【关键词】白番红花；镇痛；抗炎；扭体法；醇提取物

【中图分类号】R285.5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）03-0008-02

白番红花（Crocus alatavicus Regel et Sem）是鸢尾科番红花属的多年生草本植物，与番红花是同科同属植物。白番红花主要分布在新疆伊犁地区各县的山坡上（海拔1200～3000m），地产资源丰富。白番红花球茎是哈萨克族民间的常用药物，常捣碎放入马奶子中服用，用于治疗风寒湿痹、跌打肿痛、腰脚无力等疾病。目前白番红花的研究仅限于植物形态和生药鉴定方面[1-3]，对该药的药效学研究未见报道。实验对白番红花球茎醇提取物进行了镇痛、抗炎作用的初步研究，为其临床应用提供理论依据。

1材料与仪器

1.1药材与试剂白番红花球茎采于新疆伊犁察布查尔锡伯自治县海拔1500m的山坡上，经新疆维吾尔自治区药品检验所主任药师刘勇民鉴定为鸢尾科番红花属白番红花；阿司匹林（批号：BJ14404，拜耳医药保健有限公司）；所用试剂均为分析纯。

1.2动物实验用昆明小鼠，SPF级，雌雄兼有，体重18～22g，由新疆医科大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（新）2013-001，雌性未产无孕，自由摄食和饮水，室温保持18～22℃，相对湿度40%～70%，实验前适应3d。

1.3仪器FA2104电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；RE-2000A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（上海卫凯仪器设备有限公司）；电热恒温水浴锅（北京永光明医疗仪器厂）；打孔器；注射器；小鼠灌胃器等。

2方法

2.1样品制备称取一定量的白番红花球茎粗粉，加10倍量的60%乙醇回流提取2次，用16层纱布过滤，合并滤液，于旋转蒸发仪上回收浓缩至无醇味，得浓稠液，然后定容到每ml相当于1g生药药液备用。

2.2小鼠醋酸扭体法镇痛实验参照文献[4-9]取小鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。即空白对照组：生理盐水组；阳性对照组：阿司匹林（0.3g/kg）组；白番红花球茎的醇提取物高、中、低剂量组（5、2.5、1.25 g/kg）。分别按小鼠体质量（0.2ml/10g）灌胃给药，1次/d，连续给药7d。末次给药30min后，腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，观察并记录15min内各小鼠扭体次数，计算扭体抑制率。

扭体抑制率=（对照组平均扭体次数 - 给药组平均扭体次数）/对照组平均扭体次数×100%。

2.3二甲苯致小鼠耳廓肿胀法抗炎实验参照文献[4-9]取小鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。即空白对照组：生理盐水组；阳性对照组：阿司匹林（0.3g/kg）组；白番红花球茎的醇提取物高、中、低剂量组（5、2.5、1.25g/kg）。分别按小鼠体质量（0.2ml/10g）灌胃给药，1次/d，连续给药7d。末次给药1h后，分别于小鼠右耳两面涂二甲苯25μl，左耳对照，15min后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳，用6mm打孔器分别在两耳相同部位打下圆耳片，用电子天平称重，以两耳片重量之差为肿胀度，并计算各组肿胀抑制率。

肿胀度抑制率=（对照组平均肿胀度 - 给药组平均肿胀度）/对照组平均肿胀度×100%。

2.4统计学分析采用SPSS19.0统计软件进行统计分析，数据均以（x±s）表示，组间比较采用t检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。

3结果

3.1对醋酸扭体法致小鼠疼痛的影响由表1可知，灌胃给予白番红花球茎醇提取物后，给药组高、中、低剂量组和阳性对照组均能显著降低小鼠扭体次数，与空白对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05），其中高剂量组（5g/kg）尤为明显，说明白番红花球茎醇提取物具有明显的镇痛作用，并随剂量增大镇痛作用增强。

3.2对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响由表2可知，灌胃给予白番红花球茎醇提取物后，给药组高剂量组和阳性对照组能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度，髙剂量组、阳性对照组与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），说明高剂量组有一定的抗炎作用。

表1白番红花球茎醇提取物对醋酸扭体法致小鼠疼痛的影响（x±s，n=10）组别剂量/g·kg-115min内扭体数/次扭体抑制率/%空白对照组-26.37±7.76-阿司匹林0.310.03±11.07*61白番红花球茎醇提取物高剂量组512.50±12.95*52白番红花球茎醇提取物中剂量组2.514.11±13.60*46白番红花球茎醇提取物低剂量组1.2514.11±11.48*46注：与空白对照组比较：*P<0.05。表2白番红花球茎醇提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（x±s，n=10）组别剂量/g·kg-1肿胀度/mg肿胀度抑制率/%空白对照组-3.513±2.046-阿司匹林0.31.629±1.095*53白番红花球茎醇提取物高剂量组51.686±0.660*52白番红花球茎醇提取物中剂量组2.52.075±0.70340白番红花球茎醇提取物低剂量组1.252.543±0.94527注：与空白对照组比较，*P<0.05。4讨论

实验采用小鼠醋酸扭体法观察白番红花球茎醇提取物的镇痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察白番红花球茎醇提取物的抗炎作用，结果表明，在小鼠醋酸扭体法的镇痛实验中，白番红花球茎醇提取物的高、中、低剂量组、阳性对照组均与空白组比较差异均具有统计学意义（P<0.05），说明白番红花球茎醇提取物具有明显的镇痛作用，并随剂量增大镇痛作用增强；在二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抗炎试验中，高剂量组、阳性对照组与空白组比较差异均具有统计学意义（P<0.05），说明高剂量有一定的抗炎作用，而中、低剂量抗炎作用不明显，提示我们在抗炎作用方面，用药剂量要大一点。白番红花球茎是哈萨克族民间常用的药材，本实验为白番红花球茎在民间临床应用提供了一定的理论依据。

参考文献

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（收稿日期：2015.12.15）