叶华春

(永修县人民医院检验科，江西九江 330304)



·论著·

线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶试剂检测性能初步评价

叶华春

(永修县人民医院检验科，江西九江 330304)

摘要:目的利用CLSI EP 10-A2文件初步评价线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(mAST)试剂的临床应用性能。方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP10-A2文件，连续5天按特定顺序测定高、中、低浓度mAST样本，计算测定结果的偏差、总不精密度，对截距、斜率、非线性、携带污染和漂移进行多元回归分析。结果低、中、高浓度mAST样本偏差分别为-0.6、-0.4和0.6 U/L，总不精密度分别为3.33%、1.10%和0.92%，截距、斜率、非线性、携带污染、漂移分别为-1.040、1.011、-0.196、0.000和-0.073，其t值分别为-3.215、1.060、-0.191、0.217和-0.569，差异均无统计学意义(P>0.01)。结论mAST试剂盒测定结果准确度、精密度良好，线性良好，携带污染率较低，稳定性好，能满足临床应用要求。

关键词:线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶；EP 10-A2；初步评价

线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(mitochondria aspartate aminotransferase，mAST)广泛存在于人体各组织细胞中，经研究，心、肝疾病患者血清mAST都有不同程度的升高，升高程度与疾病的严重程度有关，血清mAST的活力测定有助于临床对心肌、肝细胞破坏的评估，可预示病情的发展趋势，评价疗效和判断疾病预后[1-3]，具有重要的临床意义。本文参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的《定量临床检验方法的初步评价：批准指南EP10-A2》文件，对其偏差、总不精密度、截距、斜率、非线性、携带污染和漂移进行分析， 初步评价其是否适用于临床检验工作[4-6]。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1仪器与试剂7600全自动生化分析仪：购自日本日立公司；mAST试剂盒：购于宁波美康生物科技股份有限公司， 批号： 20140512。

1.1.2测定样本使用宁波美康生物科技股份有限公司生产的质控血清。低值样本：选择美康公司质控血清(批号20140622，浓度：22.3 U/L)；高值样本：选择美康公司质控血清(批号20140622，浓度：150.2 U/L)；中值样本：将上述低值样本与高值样本按1∶1等比例混合。各浓度样本分装成6管，置-20 ℃冰冻保存。

1.2方法

1.2.1测定前准备参数设置和操作程序严格按照试剂盒说明书进行。测定前样本室温放置30 min，使用前充分混匀。

1.2.2样本测定根据 CLSI EP 10-A2，每天按中、高、低、中、中、低、低、高、高、中的顺序测定各浓度样本一批，连续测定5 d。第一个样本作为灌注系统用，不做统计。每批测定为连续测定，在测定过程中无论何种原因，如果后面的9个数据中的任何一个被拒绝、丢失或没有报告，整个过程就必须重做。

1.2.3绘图，数据处理以样本的靶值(X)作为横坐标、实测值与靶值差值(Y-X)为纵坐标作图作偏差图，以标准品的靶值(X)作为横坐标、实测值(Y)为纵坐标作图作散点图，观察有无离群点和线性情况；计算偏差、总不精密度，偏差允许范围设定为靶值的±5%，总不精密度的允许范围设定为5%；对截距、斜率、非线性、携带污染、漂移作回归分析。

1.3统计学处理采用Excel统计软件进行数据处理，校正回归值作t检验，当t>4.6或t<-4.6时，P<0.01，差异有统计学意义。

2结果

2.1绘图、目测离群点和线性mAST试剂盒的偏差图和线性趋势图见图1、2，目测各浓度样本测定结果无离群点，精密度良好，实测值与靶值间线性良好。

图1　　mAST试剂盒实测值与靶值偏差图

图2　　mAST试剂盒实测值与靶值线性趋势图

2.2数据分析按照NCCLS EP10-A2文件所设计的数据处理表格中要求进行计算，得出最后统计结果。

2.2.1偏差评估以各浓度5 d的测定结果均值与其对应靶值之差计算偏差，偏差均未超过设定的±5%范围，临床均可接受，见表1。

项目低值中值高值121.4±0.986.3±0.5151.4±1.0221.5±0.986.0±1.3150.9±0.4321.3±0.885.9±0.9151.7±1.8422.4±0.685.8±0.9151.2±1.0521.7±0.785.2±0.9149.0±0.6总均值(Y)21.785.9150.8靶值(X)22.386.3150.2偏差(Y-X)-0.6-0.40.6允许偏差±1.1±4.3±7.5可接受性评价可接受可接受可接受

表2　　mAST试剂盒不精密度分析结果

2.2.2总不精密度分析按照 EP10-A2文件提供的方法，计算总不精密度。各浓度总精密度均未超过允许误差， 临床均可接受，结果见表2。

2.2.3测定结果多重回归分析表：每天结果回归分析，计算每天测定结果的截距、斜率、非线性、携带污染、漂移，结果见表3。结果显示，截距、斜率、非线性、携带污染、漂移均无统计学意义(-4.60.01)。

表3　　mAST试剂盒多元回归分析汇总

3讨论

研究显示，mAST在心肌梗死患者血清的升高幅度明显大于其他心肌疾病，是诊断心肌梗死最有价值的指标之一，不同的肝病患者血清mAST均有不同程度的升高，与其他指标联合检测可为临床具体疾病提供依据，具有重要的临床意义[1-3]。我们参照EP10-A2对其进行了初步评估，以探讨其在临床的应用价值。偏差评价结果显示低、中、高浓度的绝对偏差均在允许偏差范围之内，故其偏差是可接受的，并且多元回归总结分析结果显示斜率、截距的t值均在-4.6～4.6，其差异均无统计学意义(P>0.05)，说明试剂测定的准确度较好。总不精密度评价中，低、中、高浓度的总不精密度均小于最大允许总不精密度，说明其总不精密度也可以接受。多元回归总结分析结果显示携带污染、非线性的差异均无统计学意义(P>0.05)，试剂线性能力良好，携带污染率低，能较好地满足临床常规检测要求。

参考文献

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Preliminary evaluation on detection performance of mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme reagent

YeHuachun

(DepartmentofClinicalLaboratory,YongxiuCountyPeople′sHostipal,Jiujiang,Jiangxi330304,China)

Abstract:ObjectiveTo preliminarily evaluate the clinical application performance of mitochondria aspartate aminotransferase (mAST) isoenzyme reagent by using the EP 10-A2 document of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).MethodsAccording to the EP10-A2 document promulgated by CLSI,the high,middle and low concentrations of mAST samples were measured by the specific order for continuous 5 d.The bias and the total imprecision of the detection results were calculated,the intercept,slope rate,non-linearity,carryover contamination and drift were performed the multiple regression analysis.ResultsThe biases of the low,middle and high concentrations of mAST samples were -0.6,-0.4,0.6 U/L respectively,the total imprecisions were 3.33%,1.10% and 0.92% respectively,the intercept,slope rate,non- linearity,carryover contamination and drift were -1.040,1.011,-0.196,0.000 and -0.073 respectively,their t values were -3.215,1.060,-0.191,0.217 and -0.569 respectively,the difference showing no statistical significance(P>0.01).ConclusionThe detection of mAST reagent kit shows good accuracy,good precision and good linearity,low carryover contamination rate and good stability,which can meet clinical application requirement.

Key words:mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme;EP 10-A2;preliminary evaluation

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.014

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)01-0033-02

作者简介：叶华春，女，主任技师，主要从事临床生物化学与检验研究。