丁 磊，刘 鹏，叶 辛，邓安梅，任永亚，吴天勤，钱 琤

(1.苏州市吴中区中西医结合医院，江苏苏州 215200；2.第二军医大学长海医院，上海 200433；3.解放军100医院，江苏苏州 215007)

miRNA也称microRN A，是真核生物中广泛存在的一种长度为21～23nt的RNA分子，可以通过诱发mRNA降解或抑制蛋白翻译的方式负调控靶基因[1]。研究表明miRNA参与生物干细胞分化、信息传递、器官生长发育、肿瘤等多个过程，因此miRNA的异常表达通常会导致疾病的发生[2，3]。

免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia，ITP)，旧称为特发性血小板减少性紫癜，是一种自身免疫介导的以血小板下降为特征的出血性疾病[4，5]。其发病原因尚不清楚，T细胞、B细胞、巨核细胞、抗原递呈细胞等在ITP的发病过程均发挥作用，有文献报道miRNA与ITP之间存在着一定的联系[6～8]，本实验研究通过实时定量PCR的方法检测患者外周血单个核细胞中miR-491-5p的表达水平，分析其与患者血小板计数之间的相关性，为后续研究提供新线索。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集解放军第100医院血液科2014年9月～2015年9月收治的ITP初发患者外周抗凝全血40例，均未接受过相关治疗，诊断符合国内标准[9]，其中男性22例，女性18例，年龄25～65岁。其中经治疗后完全缓解者22例，男性12例，女性10例，年龄26～51岁；同期健康体检者40例作为对照组，其中男性21例，女性19例，年龄23～67岁。每例标本大约2 ml，所有标本在2 h内处理完毕并保存在-80℃冰箱待检。此项研究通过医院伦理委员会的批准，受试者均已签署知情同意书。

1.2 试剂与仪器 反转录试剂盒和PCR试剂盒购自Takara公司；Trizo试剂(Invitrogen life technologies)、淋巴细胞分离液、100 ml/dl乙醇、氯仿、异丙醇均购自国药集团化学试剂有限公司；……