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苦杏仁苷对HSC-T6细胞分泌作用的影响

2016-02-15骆欢欢赵昉张奉学刘妮

新中医 2016年3期
关键词:剂量差异检测

骆欢欢,赵昉,张奉学,刘妮

广州中医药大学,广东 广州 510006

苦杏仁苷对HSC-T6细胞分泌作用的影响

骆欢欢,赵昉,张奉学,刘妮

广州中医药大学,广东 广州 510006

目的:观察苦杏仁苷对肝星状细胞(HSC)-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA活化,以及Ⅰ型胶原、透明质酸等分泌的影响。方法:将HSC-T6细胞系分为以下4组,每组细胞均置于6孔板中。4组分别为:正常组,苦杏仁苷高剂量(10-3mol/L)组,苦杏仁苷中剂量(10-4mol/L)组和苦杏仁苷低剂量(10-5mol/L)组。RT-PCR检测Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA,酶联免疫法检测HSC-T6Ⅰ型胶原的分泌,放射免疫法检测透明质酸的含量。结果:各苦杏仁苷组对Ⅰ型胶原基因表达均有明显的抑制作用,与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。以苦杏仁苷中剂量组最为明显,苦杏仁苷高剂量组次之,苦杏仁苷低剂量组再次之。提示苦杏仁苷对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA表达有明显的抑制作用,但这种抑制作用或并不与剂量成正比。各苦杏仁苷组对Ⅲ型胶原基因表达均有明显的抑制作用,与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。以苦杏仁苷高、中剂量组明显,苦杏仁苷低剂量组次之。24 h时,Ⅰ型胶原的OD450值苦杏仁苷各组与正常组比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。72 h时,苦杏仁苷各组与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但苦杏仁苷各组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。正常组透明质酸分泌曲线与苦杏仁苷低剂量组稍有重叠,位置较苦杏仁苷高、中剂量组分泌曲线高。但24 h、72 h时,4组透明质酸含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。96 h时,苦杏仁苷高、中剂量组比较,差异有统计学意义(P< 0.05),其余组间比较,差异仍无统计学意义(P>0.05)。结论:苦杏仁苷对HSC-T6细胞活化后的细胞外基质(ECM)分泌功能有明显的抑制作用,此可能是其抗肝纤维化的主要机制之一。

肝纤维化;肝星状细胞(HSC);苦杏仁苷;分泌

肝纤维化的发展是细胞外基质(ECM)合成增加且同时降解减少的结果。肝星状细胞(HSC)的活化是肝纤维化发生的中心环节,HSC的分泌作用导致ECM大量合成。本实验观察苦杏仁苷对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA活化,以及Ⅰ型胶原、透明质酸等分泌的影响。报道如下。

1 实验材料

1.1 实验细胞 HSC-T6细胞株,由广州中医药大学热带医学研究所病毒室冻存复苏。

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