梁大伟

（雅安职业技术学院药学检验系，四川 雅安 625000）

阿昔洛韦杂质F的合成

梁大伟

（雅安职业技术学院药学检验系，四川 雅安 625000）

以阿昔洛韦的合成中间体双乙酰阿昔洛韦为起始原料，经过一步区域选择性水解脱除O-乙酰基，得到阿昔洛韦杂质F。目标化合物的结构经过1H-NMR与MS确证，HPLC检测纯度达99%以上，可作为阿昔洛韦原料药质量控制的杂质对照品。

阿昔洛韦；杂质；合成

阿昔洛韦（无环鸟嘌呤，Acyclovir，1），化学名称为9-（2-羟乙氧甲基）鸟嘌呤，20世纪60年代末至70年代初由英国宝威（Burroughs Wellcome）公司开发，于1981年在英国首先上市，商品名为Zovirax，是一种广谱、高效、低毒的鸟苷类抗病毒药物，主要用于单纯疱疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）所致的各种感染，也可用于初发或复发性皮肤、外生殖器感染及免疫缺陷者发生的HSV感染［1］，还可用于带状疱疹、Epstein-Barr病毒及免疫缺陷者并发水痘等感染。目前，关于阿昔洛韦的合成报道较多，生产工艺也较成熟［2-5］。为了对其原料药及相关药品质量进行控制，进一步提高我国仿制药的研究水平，作者对欧洲药典中规定的阿昔洛韦杂质F（2）进行了合成研究（图1）［6］，并对其结构与纯度进行了鉴定，可作为杂质对照品用于阿昔洛韦原料药生产的质量控制。

图1 阿昔洛韦与其杂质F的结构式

本文根据文献报道的相关工艺路线［7-8］，直接采用阿昔洛韦的合成中间体双乙酰阿昔洛韦（3）为起始原料，碱性条件下，选择性水解脱除O-乙酰基，得到阿昔洛韦杂质F（2）（图2）。为了获得高纯度且满足对照品的质量要求，本文主要考察了碱的用量与反应温度，并最终确定了合成阿昔洛韦杂质F（2）的相关工艺条件。

图2 合成路线

1 实验

1.1 仪器与试剂

Thomas-Hoover型熔点仪，温度计未加校正；核磁采用Bruker ARX-400型核磁共振仪测定，TMS为内标；质谱采用Agilent-6120 Quadruple LC/ MS测定，ESI源；高效液相色谱采用Agilent 1200 HPLC（Zorbax Eclipse XDB-C18 column，5μm，4.6mm× 250mm）。

主要原料双乙酰阿昔洛韦纯度大于98%；常规溶剂为分析纯，未经过进一步处理，直接使用。

1.2 合成方法

将双乙酰阿昔洛韦（3）（3.09g，10mmol）加入到溶有甲醇钠（0.46g， 20mmol）的甲醇（30mL）溶液，在25℃下搅拌反应，TLC（甲醇∶二氯甲烷=1∶3）监控，30min反应完毕，加入1.5mol·L-1盐酸溶液（15mL），搅拌10min，静置过夜，抽滤收集沉淀，并用30mL的甲醇-水体系（1∶1）洗涤得粗品，用50mL的甲醇-水溶剂体系（1∶1）重结晶得无色晶体，真空干燥得最终产物1.12g，产率为41.9%，m.p.=217～218℃。ESIMS （m/z）：268.1 （M+1）+，535.2 （2M+1）+，557.1 （2M+Na）+。1H-NMR （400 MHz， DMSO-d6）：δ=2.40（s， 3H，NHCOCH3），3.47 （m， 4H， CH2CH2），4.65 （br s， 1H， OH），5.49 （s， 2H， CH2O），8.13 （s， 1H， N=CH），11.77，12.10 （2 br s， 2×1H， 2 NH）。HPLC：tR=3.12min （99.39%）（图3）。

图3 阿昔洛韦杂质F（2）的高效液相色谱分析

2 结果与讨论

为了提高脱除双乙酰阿昔洛韦的O-乙酰基合成目标化合物的区域选择性，本文对甲醇钠的用量与反应温度进行考察。

2.1 甲醇钠用量对脱O-乙酰基的区域选择性的影响

改变双乙酰阿昔洛韦（3）与甲醇钠的投料比，在25℃下反应，TLC（甲醇∶二氯甲烷=1∶3）监控，粗品经HPLC检测纯度，考察甲醇钠的用量对产物纯度的影响，实验结果见表1。从表1可以看出，随着甲醇钠用量增加，最终产物的纯度呈现增加趋势，催化剂用量较低，造成水解率低，存在部分原料，脱除N-乙酰基的杂质较少，在n（化合物3）∶n （甲醇钠）=1∶2时，粗品的纯度较高。

表1 甲醇钠用量对脱O-乙酰基的区域选择性的影响

2.2 反应温度对脱O-乙酰基的区域选择性的影响

保持n（化合物3）∶n（甲醇钠）=1∶2的投料比，改变反应温度，考察温度对O-乙酰基的区域选择性的影响，实验结果见表2。从表2可以看出，随着反应温度升高，产物的纯度降低。从HPLC分析可知，温度增加造成部分N-乙酰基脱除而增加了杂质的量，即脱乙酰基的选择性降低，反应温度为25℃时，选择性较高。

表2 反应温度对脱O-乙酰基的区域选择性的影响

3 结论

以双乙酰阿昔洛韦（3）为原料，甲醇钠为水解催化剂，投料比为n（化合物3）∶n（甲醇钠）=1∶2，反应温度为25℃时，区域选择性脱O-乙酰基的效果较好，粗产品的纯度较高，进一步甲醇-水溶剂体系（1∶1）重结晶，可得高纯度的阿昔洛韦杂质F（2），HPLC：tR=3.12min （99.39%） ，可作为阿昔洛韦原料药质量控制的杂质对照品。色谱条件为：色谱柱采用 Zorbax Eclipse XDB-C18 column，5μm，4.6mm×250mm；流速为1mL·min-1；柱温为50℃；进样量为5μL；流动相A为水 （0.01% TFA），流动相B为乙腈 （0.01% TFA）；流动相比例为7.5min内B由5%逐渐增加到95%，并维持此流动相比例测定15min。

［1］ 李建农，滕立，陈鸿珊，蒋宁，蒋建东. 泛昔洛韦和阿昔洛韦体内外抗疱疹病毒活性的比较研究［J］. 中国药学杂志，2003，38（6）：423-426.

［2］ Kelley， J. L.， Schaeffer， Howard J. Purine acyclic nucleosides. Unambiguous synthesis of acyclovir via a furzaano ［3，4-d］pyrimidine［J］. J. Heterocycl. Chem.， 1986， 23（1）: 271-273.

［3］ Glinka， R.， Goral Z.， Kotelko， B. Preparation of 9-（2-hydroxyethymethyl）guanine: US， 19920131［P］. 1992-04-18.

［4］ Han， Y. K.， Harrington， P. H. Method for producing 9-（2-hydroxyethymethyl）guanine （acyclovir） as antiviral agent: US， 19960127［P］. 1996-05-30.

［5］ Gao， H.， Mitra， A. K. Regioselective synthesis of acyclovirand its various prodrugs［J］. Synthetic Commun.， 2001， 31（9）: 1399-1419.

［6］ Aciclovir. European Pharmacopoeia， 5th Ed.， 921-922.

［7］ 罗晓燕. 抗病毒药阿昔洛韦的合成改进［J］. 化学试剂，2001，23（3）：184-185.

［8］ 罗晓燕，殷斌烈. 阿昔洛韦的合成及其主要中间体的分离［J］. 武汉化工学院学报，1998，20（4）：7-10.

Synthesis of Acyclovir Impurity F

LIANG Da-wei
（Department of Pharmacy & Medical Laboratory， Ya’an Polytechnic College， Ya’an 625000， China）

In order to perform the quality control of acyclovir， the acyclovir impurity F was required as a chemical reference substance. Therefore， the impurity F was prepared by a highly regioselective O-deacetylation of acyclovir N，O-diacetate. The structure of the target compound was confrmed by1H-NMR and MS， and the purity was over 99% by HPLC. The specifed impurity could be used as the reference substance of the quality control in the development and manufacture of active pharmaceutical ingredient （API） and drug products.

acyclovir； impurity； synthesis

TQ 463+.5

A

1671-9905（2016）05-0003-02

四川省教育厅自然科学基金项目（16ZB0545）；雅安职业技术学院药用分子研究创新团队项目（YZYTD-2015-01）

梁大伟（1985-），男，江苏涟水人，博士，讲师，主要从事药物及药物中间体的合成研究。通讯联系人，E-mail：ldawei@yahoo.com

2016-03-15