河北科技大学生物实验中心，河北 石家庄 050018

NDRG2通过抑制β-catenin表达和入核调控乳腺癌细胞增殖

周晓雷，朱重悦，张世光，周志艳，李海潮，邹 卫

河北科技大学生物实验中心，河北 石家庄 050018

背景与目的：乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一，肿瘤细胞的恶性增殖是造成患者死亡的重要原因。本研究利用具有相同遗传背景但不同增殖能力的乳腺癌细胞模型，研究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2，NDRG2)调控乳腺癌细胞增殖的作用及分子机制。方法：通过蛋白［质］印迹法(Western blot)检测MCF-7/LM-MCF-7细胞中NDRG2蛋白表达水平；构建NDRG2真核表达载体及siRNA干扰片段，通过转染上调或沉默NDRG2表达，流式细胞实验检测细胞增殖能力，Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)表达，免疫荧光染色检测β-catenin细胞定位；共转染MCF-7细胞NDRG2 siRNA和pCMV-Tcfδ，流式细胞实验检测细胞增殖能力。结果：NDRG2的蛋白表达水平同乳腺癌细胞增殖能力负相关；在增殖的LMMCF-7细胞中上调NDRG2表达，细胞增殖指数(proliferation index，PI)由47.18%下降至31.78%(P<0.001)；在低增殖的MCF-7细胞中沉默NDRG2表达，PI由32.00%上升至52.59%(P<0.001)；Western blot及免疫荧光结果显示，NDRG2可抑制β-catenin表达，并抑制其聚集入核；流式细胞检测结果显示，共转染siRNA和pCMV-Tcfδ的MCF-7细胞增殖能力未增强，进一步说明NDRG2是通过抑制β-catenin的转录调节作用抑制肿瘤细胞增殖。结论：在乳腺癌细胞中，NDRG2的表达水平下调，导致β-catenin聚集入核，并激活下游靶基因，促进乳腺癌细胞增殖。此分子机制对阐明乳腺癌细胞增殖调控机制具有重要意义。

乳腺肿瘤；N-myc下游调节基因2；β-连环蛋白；细胞增殖

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，全球每年约有138万女性被诊断为乳腺癌，占全部新发肿瘤的23%。我国每年女性乳腺癌发病16.9万例，居女性常见肿瘤首位。有研究表明，肿瘤细胞的恶性增殖和分裂失调是肿瘤发生、发展的基础［1］。癌细胞获得高增殖能力是乳腺癌后期转移的重要条件之一，研究癌细胞增殖调控机制对乳腺癌的诊断和治疗具有重要价值。

N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2，NDRG2)是NDRG家族的重要成员，其基因染色体定位于14q11.2，含有16个外显子和15个内含子，表达蛋白含357个氨基酸残基，相对分子质量约41×103。……