蒲超，张珊珊，李伟，吴青霞，吴辉

(1.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科；2.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院神经内科，四川 南充 637000)



犬骨髓间充质干细胞体外分离培养及分化鉴定

蒲超1，张珊珊2，李伟1，吴青霞1，吴辉1

(1.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科；2.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院神经内科，四川 南充 637000)

目的：建立犬骨髓间质干细胞(dog bone mesenehymal stem cells，dBMSCs)的体外分离、培养、纯化及鉴定的方法。方法：采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离dBMSCs，并通过不断传代进行纯化和扩增培养。诱导dBMSCs向成骨、成脂细胞分化，并分别以矿化(钙)结节茜素红染色、油红O染色鉴定。结果：dBMSCs 在体外分离培养扩增，形态呈长梭形成纤维细胞样，通过成骨、成脂诱导分化鉴定其为dBMSCs。结论：密度梯度离心法结合贴壁筛选法能有效的获取dBMSCs，所分离培养的dBMSCs同时具有多向分化潜能，是组织工程研究中理想的种子细胞。

组织工程；骨髓间充质干细胞；分离；培养；诱导；分化

骨髓间充质干细胞(bone mesenehymal stem cells，BMSCs)具有较强的增殖能力，多向分化的潜能，而且取材方便、细胞移植后无明显的移植物抗宿主反应，体外基因转染率高，能稳定高效的表达转染基因，被认为是理想的组织工程种子细胞[1-5]。但其在成熟的骨髓中占比例很小，仅占有核细胞的0.001%～0.606%[4]，体外培养不易获得纯化的BMSCs。本实验建立一种操作简便、费用低廉、高效分离培养BMSCs的方法，并成功诱导其向成骨、成脂细胞分化。

1 资料与方法

1.1 实验动物