张振，张阁，彭永，彭小薇，孙翠丽，常维山，朱良全*，丁家波*

(1. 山东农业大学动物科技学院，山东泰安270018；2. 中国兽医药品监察所，北京100081)

副结核分枝杆菌MAP0862、MAP1345基因的串联表达及其在间接ELISA中的初步应用

张振1，2，张阁2，彭永2，彭小薇2，孙翠丽1，2，常维山1，朱良全2*，丁家波2*

(1. 山东农业大学动物科技学院，山东泰安270018；2. 中国兽医药品监察所，北京100081)

为探索副结核特异性蛋白MAP0862与MAP1345在牛副结核病血清学诊断中的作用，将通过串联表达获得的融合蛋白MAP0862-1345纯化定量后包被酶标板，经过对反应条件的优化，初步建立了基于融合蛋白MAP0862-1345的间接ELISA诊断方法。使用建立的ELISA方法对牛副结核病阳性血清、牛结核病阳性血清、牛布病阳性血清、卡介苗免疫牛血清、健康牛血清检测的结果表明其具有较好的特异性；使用该方法与IDEXX副结核病抗体检测试剂盒共同对300份临床血清样本检测，总符合率为92.7%。

副结核分枝杆菌；串联表达；间接ELISA

副结核病是由副结核分枝杆菌引起的一种慢性消化系统疾病，主要引起反刍动物慢性肠炎以及生产性能下降。目前该病在全世界范围内流行，尚无有效的治疗方法，最好的控制方法就是对畜群进行严格的检疫并及时淘汰阳性牛[1]。对于副结核病检疫诊断，常用方法为ELISA与皮肤变态反应。但由于副结核分枝杆菌属于禽结核分枝杆菌属的一个分支，其与其他禽结核分枝杆菌存在基因与抗原表位的交叉，如皮肤变态反应用的副结核抗原与禽结核菌素(PPD-A)、牛结核菌素(PPD-B)、环境分枝杆菌存在共同抗原[2]。……