胎盘生长因子基因沉默对人脐静脉内皮细胞炎症因子表达的影响

李海芳1，苏卫东1，刘传丽2，徐晨1，邱丽君1

(1天津市第四中心医院，天津300140；2武警后勤学院附属医院)

摘要：目的观察沉默胎盘生长因子(PGF)基因对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎性因子表达的影响。方法体外培养HUVECs细胞至第3代，分为A、B、C、D、E组。A组转染siRNA-NC质粒(为非特异性沉默对照质粒)，B组转染siRNA-PGF质粒，C组转染siRNA-NC+pcDNA3质粒(为NF-κB过表达对照质粒)，D组转染siRNA-PGF+pcDNA3质粒，E组转染siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB质粒。上述各组转染24 h后与100 ng/mL的LPS共孵育24 h，收集各组细胞及细胞上清液，分别用于相关细胞因子mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(ELISA法)的检测。结果与A组相比，B组MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白的表达均明显下降，两组相比，P均<0.05。与D组相比，E组MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA和蛋白的表达均上升，两组相比，P均<0.05。结论 沉默PGF基因可以通过NF-κB信号通路的介导在mRNA和蛋白水平上抑制HUVECs炎症因子MCP-1、IL-1、TNF-α的表达，从而减轻炎症反应。

关键词：胎盘生长因子；基因沿默;脂多糖；动脉粥样硬化；人脐静脉内皮细胞;炎性因子

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.009

中图分类号：R543;Q78 文献标志码：A

基金项目：天津市第四中心医院博硕基金资助项目。

收稿日期：(2015-07-16)

通信作者：邱丽君

动脉粥样硬化(AS)是由炎症因子和趋化因子介导的全身炎症及免疫反应性疾病[1]。内皮细胞功能失调(尤其是炎症反应)被认为是AS发病机制中的一个关键性环节。炎性因子脂多糖(LPS)能诱导内皮细胞产生炎症反应[2]。研究[3，4]发现，胎盘生长因子(PGF)能够在血管新生、侧支血管生成、造血、肿瘤发生、炎症反应动和AS等方面发挥作用，但其作用机制尚不明确。2015年1月，我们观察了沉默PGF基因对LPS诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎性因子表达的影响，探讨PGF在AS发病中的作用机制。

1材料与方法

1.1LPS的配置将10 mg的LPS加入1 mL的PBS，配制成10 g/L的LPS母液，分装后置-20 ℃保存，使用前用DMEM培养液配制成终浓度为10 mg/L的LPS培养液。……