反相液相色谱中调整流动相组分比例对分离效果的影响

黄强1李华勇1刘新国2

(1.江西省吉安市质量技术监督检测中心，江西 吉安 343000；

2.江西省产品质量监督检测院，江西 南昌 33000)

摘要：用国标法同时测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠，通过改变流动相组分比例，即改变流动相极性，对三种比例所得出的分离效果进行比较，考察了三种组分的保留时间、分离度及拖尾因子等参数变化。试验结果表明：(1)增加甲醇比例，三种待测组分保留时间都提前，且糖精钠的变化最大；(2)增加甲醇比例可以使三种组分的分离度和拖尾因子都变小，同时也可以满足对分离度的要求；(3)综合分析试验所得各参数，得出色谱系统所需最适流动相配比，实现较好的分离效果，试验的精密度也满足要求。

关键词：液相色谱流动相分离度系统适用性试验

反相色谱法是以表面非极性载体为固定相，以比固定相极性强的溶剂为流动相的一种色谱分离模式，是基于样品中的不同组分和固定相之间作用的不同而将各组分分离，具有柱效高、分离能力强、保留机理清楚等特点，是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种。反相色谱系统中的固定相一般采用硅胶表面键合疏水基团，流动相首选甲醇-水系统，在一些大分子物质的分离中，多采用离子强度较低的酸性水溶液，添加一定量的乙腈或甲醇等与水互溶的有机溶剂作流动相。

色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个参数。……