严艳玲，袁　林，杨明辉，刘云峰，向诗飞 ，张翠兰，向　阳，袁国华，

1.开县人民医院(重庆 开县 400500)

2.风湿性疾病发生与干预湖北重点实验室(湖北 恩施 445000)

3.湖北民族学院附属民大医院风湿免疫科(湖北 恩施 445000)

4.川北医学院附属医院风湿免疫研究所(四川 南充 637000)



自身抗体与狼疮肾炎病理类型的相关性分析

严艳玲1，袁林2，杨明辉4，刘云峰1，向诗飞3，张翠兰3，向阳2，袁国华2，4

1.开县人民医院(重庆 开县 400500)

2.风湿性疾病发生与干预湖北重点实验室(湖北 恩施 445000)

3.湖北民族学院附属民大医院风湿免疫科(湖北 恩施 445000)

4.川北医学院附属医院风湿免疫研究所(四川 南充 637000)

【摘要】目的探讨自身抗体与狼疮肾炎(lupus nephritis,LN) 病理类型的相关性。方法采用免疫印迹法测定75例行肾活检LN患者的抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗核小体(NUC)及抗组蛋白(HIS)抗体，并与56例无肾脏损害的系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者对照，分析自身抗体与LN病理类型的关系。结果75例LN患者中，抗dsDNA、抗Sm和抗HIS阳性率均明显高于无肾脏损害患者(P<0.05)；75例LN病理类型分属Ⅰ～Ⅵ型，与无肾脏损害组对照，抗dsDNA和抗HIS抗体阳性率在各型LN中均增高，但仅Ⅱ型LN差异有统计学意义(P<0.01)，抗SSA抗体在Ⅰ型LN中与无肾脏损害组对照，差异有统计学意义(P<0.05)，抗U1nRNP抗体在Ⅴ型LN中与无肾脏损害组对照，差异有统计学意义。结论抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗HIS抗体阳性可指导LN的诊断，且抗dsDNA抗体和抗HIS抗体与Ⅱ型LN发病相关，抗SSA抗体与Ⅰ型LN发病有关，抗U1nRNP抗体则可能在Ⅴ型LN病变中发挥作用。

【关键词】系统性红斑狼疮；狼疮肾炎；自身抗体；相关性；分析

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种自身免疫性疾病,可累及全身多个系统，其中肾脏受累最为常见。狼疮肾炎(lupus nephritis，LN)导致的肾功能衰竭是SLE死亡的主要原因之一。患者血清中可出现多种自身抗体，包括抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP/Sm、抗核小体(NUC)及抗组蛋白(HIS)抗体。自身抗体如抗dsDNA、抗NUC抗体等与LN的相关性已有文献报道[1-2]，但自身抗体与狼疮肾脏损害病理特点的相关性报道甚少，本文通过观察75例狼疮肾脏损害患者自身抗体分布，分析自身抗体与狼疮肾损害病理特点的相关性。

1　资料与方法

1.1一般资料2012 年12 月至2014年1 月在湖北民族学院附属民大医院和川北医学院附属医院风湿免疫科收集行肾活检的SLE住院患者75例，其中男6例，女69例；年龄14～61 岁,平均(33. 2±13.0)岁；病程1～204个月，中位数10个月。同时收集同期住院的SLE而无肾脏受累的患者56例作为对照组，男5例,女51例；年龄15～58岁,平均(32. 2±9.0)岁；病程1～177 个月，中位数9个月。所选患者均符合1997年美国风湿病学院(ACR)修订的SLE分类诊断标准[3]。同时所有患者均符合LN诊断标准：①24h尿蛋白定量>0.5g；②尿中红细胞或白细胞>5个/HP或颗粒管型；③肾功能异常；④肾脏病理证实。符合以上4条中至少1条并排除其它原因可诊断LN。同时参照2003年国际肾脏病-病理协会(ISN/RPS)有关LN病理方案分型[4]，及SLE疾病活动性指数(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)评估疾病活动程度[5]。

1.2ENA自身抗体谱检测应用免疫斑点法测定，试剂盒由德国欧蒙医学实验诊断有限公司提供，严格按试剂盒说明操作。检测抗体包括抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP/Sm、抗NUC及抗HIS抗体。

1.3肾穿刺活检术及肾脏病理检查应用半自动肾穿刺活检针，在B超或彩超引导下行经皮肾穿刺活检术。穿刺次数2～3次,将合格的标本分段或整条置光镜和电镜标本固定液中即刻送检。肾穿刺标本分别行直接免疫荧光、光镜和透射电镜检查。光镜标本行苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining,HE)、过碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine，PASM)、过碘酸雪夫染色(periodic acid-schiff stain，PAS)和Masson染色, 病理分型根据2003年国际肾病学会(ISN)和肾脏病理学会工作组(RPS)制定的LN的病理学分型标准进行分型[6]。Ⅰ型为轻微性LN,Ⅱ型为系膜增生性LN，Ⅲ型为局灶性LN，Ⅳ型为弥漫性LN,Ⅴ型为膜性LN,Ⅵ型为硬化性LN。

1.4统计学处理采用SPSS16.0统计软件，计数资料比较采用χ2检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组LN患者阳性率比较LN患者抗dsDNA、抗Sm和抗HIS抗体阳性率均明显高于非LN组(P<0.05)，LN患者抗NUC抗体阳性率与非LN组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1　两组LN患者ENA阳性率比较[n(%)]

2.2病理分型75例SLE肾脏受损中Ⅱ型LN最为常见，占50.7%，Ⅰ型、Ⅴ型次之，Ⅵ型患者最为少见，见表2。

2.3自身抗体在不同病理类型LN中的分布与非LN组对照，抗dsDNA抗体和抗HIS抗体阳性率在Ⅱ型LN中均为50%，明显高于非LN组的17.8% (χ2=10.964，P=0.001)和28.6%(χ2=4.448，P=0.035)，差异有统计学意义；在Ⅲ型和Ⅳ型LN中，抗dsDNA抗体和HIS抗体阳性率同样较非LN组高，差异无统计学意义(P>0.05)；抗SSA抗体在Ⅰ型LN中为83.3%，与非LN组51.8%相比较，差异有统计学意义(χ2=4.021，P<0.05)；在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗U1nRNP抗体为阳性，明显高于非LN组37.5%(χ2=5.104，P=0.028)，差异有统计学意义(P>0.05 )，见表2。

表2　自身抗体在不同病理类型狼疮中的分布情况[n(%)]

注：与非LN组比较，aP<0.05；bP<0.01。

3　讨论

SLE是一种多因素参与的特异性自身免疫性疾病。患者的突出表现为有多种自身抗体，并通过免疫复合物等途径，可侵犯身体多脏器，影响脏器功能，造成多器官、多系统受累，临床表现缺乏特异性，是临床上常误诊和漏诊发生率较高的疾病之一，随着免疫分子学科技术的不断发展，抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗NUC及抗HIS抗体等自身抗体的发现及精确检测，是SLE诊断的里程碑，必将为SLE早期诊断，早期治疗提供有力的保障，为SLE患者带来福音。

SLE患者血清中抗dsDNA抗体、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗NUC及抗HIS抗体水平与LN的临床表现、活动性指标等密切相关[7]。姚曦等[8]报道抗dsDNA抗体与LN的发生、发展高度相关。本组结果显示LN患者抗dsDNA抗体阳性率明显高于非LN患者，说明抗dsDNA抗体可能是LN的致病性抗体之一；抗Sm抗体也是诊断SLE的特异性指标之一，虽然与SLE病情活动与否无关，但治疗后抗Sm抗体仍持续阳性，故抗Sm抗体又称为回顾性抗体、也是SLE的标志性抗体，并已成为ARA2007年修订的诊断标准之一；抗SSA、抗RNP是抗ENA抗体家族中的两种抗体，在SLE中出现的几率比较高，但因其特异性差，临床上很少将其作为诊断指标。抗NUC抗体是核小体刺激机体而产生的，核小体可刺激T细胞的活化，从而激活B细胞，产生抗体如抗NUC、抗dsDNA抗体，并形成抗原抗体复合物参与SLE的发病，同时也可作为自身抗体与肾小球结合为“桥梁”，介导自身抗体与肾小球基底膜、系膜细胞等相结合，导致补体活化，炎症细胞聚集和细胞因子释放，从而诱发LN的发生。有研究显示，SLE患者血清中NUC水平高于正常人和其他风湿性疾病患者，且在LN中抗NUC、抗dsDNA抗体的阳性率明显高于非LN组[9-10]，我们的结果显示，LN患者抗dsDNA抗体、抗NUC、抗HIS阳性率高于非LN患者，提示dsDNA抗体、抗NUC、抗HIS与LN的发病相关。

通过对ENA在不同病理类型LN中的情况进行分析，LN与非LN组比较，抗dsDNA抗体和抗HIS抗体阳性率在Ⅱ型LN中明显高于非LN组，且抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗HIS抗体阳性率在LN患者组均明显高于非LN组；在Ⅲ型和Ⅳ型LN中，抗dsDNA抗体和抗HIS抗体阳性率同样较非LN组增高，本研究各病理类型之间数据差异较大，各类型之间比较很难实现，故只能在数据角度上分析，得出此结论，目前，国内外已有的研究成果亦无相关报道。而在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗U1nRNP抗体为阳性，在对照组中则为37.5%，而在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗SSA抗体为阳性，和对照组51.8%，两者阳性率均明显高于对照组，故可以认为抗U1nRNP抗体则可能在Ⅴ型LN病变中发挥作用。

本研究在一定程度上证实了抗dsDNA抗体和抗HIS抗体与Ⅱ型LN发病有关，而抗U1nRNP抗体则可能在Ⅴ型LN病变中发挥作用，故抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗HIS抗体可以提高对Ⅱ型LN诊断率，而抗U1nRNP抗体则可为Ⅴ型LN确定诊断提供帮助。但由于本研究因病例数较少，故本研究结果仅能为临床医师对该疾病的诊断提供参考。

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[3]Hochberg MC .Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus[J].A rthritis Rheum,1997,40(9):1 725.

[4]Eeing J J, D Dagti V, Schwartz M M,et al.The classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited[J].Kidney international,2004,65(2):521-530.

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[6]邹万忠,王海燕.狼疮肾炎病理学分类的演变和现状[J].中华肾脏病杂志,2004,20(5):377-379.

[7]Moura C G,Lima I,Barbosa L,et al.Anti-C1q antibodies: association with nephritis and disease activity in systemic lupus erythematosus[J].Journal of clinical laboratory analysis,2009,23(1):19-23.

[8]姚曦,李向培,倪进东,等.SLE患者临床表现、自身抗体的相关性分析及其性别、年龄特征调查[J].安徽医科大学学报,2008,43(1):75-78.

[9] 龚宝琪,刘伟丽,齐文成,等.抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值及临床意义[J].中国实用内科杂志(临床版),2006,26(9):682-684.

[10] 吴东海,祖宁,张荣富.AnuA、抗dsDNA及抗C1q抗体在系统性红斑狼疮及狼疮肾炎诊断中的作用[J].中日友好医院学报,2007,21(1):5-8.

A Correlational Analysis of Autoantibodies and Lupus Nephritis Pathological Types

YAN Yan-ling1,YUAN Lin2,YANG Ming-hui4,etal.

(1.KaixianPeople′sHospital，Kaixian400500，China；2.RheumaticDiseaseandInterventioninHubei

ProvinceKeyLaboratory,Enshi445000,China;3.DepartmentofRheumatismandImmunology,Affiliated

HospitalofHubeiUniversityforNationalities,Enshi445000,China;4.InstituteofRheumatology

andImmunoAffiliatedHospitalofNorthSichuanMedicalCollege,Nanchong63700,China)

【Abstract】Objective To analyze the association between anti-extractable nucler antigen(ENA) and the histological changes in luPus nephritis(LN).Methods The anti-dsDNA,anti-SSAl,anti-U1nRNP/Sm,anti-nucleosome (NUC),and anti-histone antibody were detected in 75 patients with LN underwent renal biopsy and 56 patients without LN by using Western-blot assay,followed by analyzeing the relations between the anti-ENA autoantibodies and LN pathological changes.Results In 75 patients with LN,anti-dsDNA antibodies,Sm and anti-histones (HIS) antibodies positive rate were significantly higher than those of patients without kidney damage (P<0.01);75 cases of LN pathological type belong to Ⅰ~Ⅵ type,compared with no kidney damage control group,anti-dsDNA antibodies and protein antibody positive rate in each model LN resistance group were increased,but only type Ⅱ LN difference was statistically significant (P<0.01),and anti-SSA antibody in type Ⅰ LN compared with no kidney damage control group,the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion Anti-dsDNA antibodies,anti-Sm and anti-histones antibody positive can guide the diagnosis of LN,and dsDNA antibodies associated with the onset of type Ⅱ LN,anti-SSA antibody associated with the onset of type Ⅰ LN,and anti-U1nRNP antibodies may play a role in the type Ⅴ LN pathological changes.

【Key words】Systemic lupus erythematosus; Lupus nephritis; autoantibodies

基金项目湖北民族学院博士科研启动基金项目(MY2010B004)。

[收稿日期2014-07-05]

【中图分类号】R593.242

【文献标识码】A

【文章编号】1008-8164(2014)03-0012-03

作者简介严艳玲(1986- )，湖北巴东人，硕士，研究方向：风湿病的基础理论研究及方剂开发应用。