李妮娜，王举涛

(安徽中医药大学药学院，现代中药安徽省重点实验室，安徽合肥 230031)

中草药被用做药品和食材已有数千年的历史［1］，与西药和化学药品相比，中药具有标本兼治、疗效温和确切、毒副作用小等优势。随着回归自然的潮流，中草药受到越来越多人的欢迎。如今为了满足中草药的生产需求，现代农业大量的使用农药来控制农作物生长期间的病虫害以提高产量。由于缺乏对农药本身的性质、农药对中草药的作用机制、农药残留特性和规律以及农药对环境的影响等方面的认识，往往造成中草药中农药残留污染［2］。

有机氯农药由于其杀虫效果显著、曾是各国用量最大的杀虫剂，其使用历史长、范围广、用量大，虽已禁用多年，但由于稳定性高、半衰期长，不易降解和代谢，长期积存于植物和土壤中，至今果蔬、中草药、土壤中检出率仍相当高。

丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎，具有血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痛功效［3］。随着对中药丹参的研究，发现丹参制剂［4－7］及其单组份—丹参多酚酸［8－9］具有显著的治疗作用。因此保证其质量对临床安全有效的使用非常重要。本实验运用气相分析方法对不同产地不同批次的丹参药材进行了测定分析。

1 材料

1.1 仪器 GC2014型气相色谱仪(日本岛津)，63Ni ECD电子捕获检测器，超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，旋转蒸发仪 (郑州长城科公贸有限公司)。

1.2 药材 丹参药材采集于亳州药材市场，来自四川、山东、河北、山西4个产地。

1.3 试剂 农药对照品液:α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、P.P’-DDE、O.P’-DDT、P.P’-DDD、P.P’-DDT，浓度均为 100 mg·L－1，购于农业部环境保护科研检测所。其编号分别为:GSB05－2276－2008、GSB05－2277－2008、GSB05－2278－2008、GSB05－2279 －2008、GSB05 －2280 －2008、GSB05－2281－2008、GSB05－2282－2008、GSB05－2283－2008，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm ×0.25 μm)rtx-5，进样口温度 230°C，检测器温度300°C，分流进样，分流比 20∶1，程序升温初始温度105°C，每分钟升 6°C 至 200°C，保持 10 min。再每分钟升6°C至240°C，保持15 min。载气为高纯氮(99.99%)。在此条件下对照品、样品中各农药出峰顺序见图1及图2。

2.2 对照品混合储备液的制备 用石油醚将浓度均为 100 mg·L－1的 α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、P.P’-DDE、O.P’-DDT、P.P’-DDD、P.P’-DDT分别制成浓度均为4 mg·L－1的单标储备液。精密量取上述各单标储配液0.5 mL置10 mL容量瓶中，用石油醚(60～90°C)定容至刻度，得各成分浓度均为0.2 mg·L－1的混合溶液，作为对照品混合储备液。

2.3 供试品溶液的制备 参考《中国药典》2010年版第一部制备方法［3］:取样品于60°C干燥4 h，粉碎成细粉，过60目筛。取约2 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，加水20 mL浸泡过夜，精密加丙酮40 mL，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6 g，精密加二氯甲烷30 mL，称定重量，超声处理15 min，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置(使分层)，将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100 mL具塞锥形瓶中，放置4 h。

精密量取35 mL，置50 mL圆底烧瓶中，置40℃水浴上旋蒸浓缩至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚(60～90℃)溶解并转移至10 mL具塞刻度离心管中，加石油醚(60～90℃)精密稀释至5 mL，小心加入硫酸 1 mL，振摇 1 min，离心(3 000 r·min－1)10 min，精密量取上清液2 mL，置具刻度的浓缩瓶中，连接旋转蒸发器，40℃下旋蒸溶液至适量，精密稀释至l mL，即得。

2.4 线性关系考察 精密量取“2.2”项下的对照品混合储备液，各0，0.05，0.25，0.5，2.5 mL 于 5 个10 mL容量瓶中，用石油醚(60～90℃)定容至刻度，制成每升含有 0，1，5，10，50 μg 的溶液。分别取1 μL注入气相色谱仪，每个浓度平行进样3次，以平均峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，计算回归方程和相关系数。有机氯农药混合对照品溶液在0～50 μg·L－1线性关系良好，如表1。

表1 有机氯农药线性相关方程

2.5 检测限 按照上述供试品制备的方法制备不含药材的空白供试品溶液，精密吸取空白供试品溶液与浓度为1 μg·L－1的有机氯混合对照品溶液各1 μL注入气相色谱仪，测得8种有机氯农药的最低检测限均 ＜0.01 ×10－6。

2.6 精密度试验 取50 μg·L－1的对照品混合溶液连续进6次，方法精密度的峰面积RSD(%)值分别为:α-BHC:2.58、β-BHC:2.12;γ-BHC:1.9;δ-BHC:2.9;P.P’-DDE:2.26;O.P’-DDT:0.97;P.P’-DDD:2.3;P.P’-DDT:1.75，结果显示方法的精密度符合要求。

2.7 重复性试验 称取丹参样品6份，每份2 g，按供试品溶液制备的方法进行处理，上述色谱条件进行分析，计算丹参药材中有机氯农药的残留量，结果丹参中的 α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、P.P’-DDE、O.P’-DDT、P.P’-DDD、P.P’-DDT 峰面积RSD(%)值均＜3.0%，结果表明该方法具有一定的重复性且重复性符合要求。

2.8 稳定性试验 取50 μg·L－1的对照品混合溶液在 0，6，12，18，24，48 h 不同的时间进行测定，方法稳定性的峰面积 RSD(%)值分别为:α-BHC:1.57%;β-BHC:1.48%;γ-BHC:1.79%;δ-BHC:2.49%;P.P’-DDE:1.82%;O.P’-DDT:2.27%;P.P’-DDD:1.64%;P.P’-DDT:2.32%，结果显示该方法的稳定性符合要求。

2.9 加样回收试验 在丹参样品中，分别加入一定量的对照品，按供试品溶液制备的方法进行处理，分别取1 μL注入气相色谱仪中，经6次平行测定，测得含量并计算回收率，计算结果如表2。

表2 有机氯农药加样回收率试验 /ng

2.10 样品测定 不同产地的丹参药材按上述供试品溶液的制备方法进行处理，平行处理2次，取1 μL注入气相色谱仪中，每份供试品测定3次，结果分析见表3。

表3 不同丹参药材中有机氯农药的含量/ng·g－1

3 讨论

本实验建立了中药丹参中有机氯农药六六六(BHC)和滴滴涕(DDT)残留量的弹性毛细管气相色谱分析方法，对以后研究其他中药中有机氯农药残留的研究提供了一定的参考价值。从样品的测定分析结果来看，丹参药材中有机氯农药BHC和DDT的异构体均有检出。另外有研究指出，从实际情况看农药污染并不一定是中药材在种植期间使用农药造成的，还有可能是因为种植土壤和空气中残留的农药对中药材的间接污染以及中药材在采收、加工、贮存、运输过程中造成的污染［10－11］。因此，在种植中药材时不仅要严格控制农药的使用，选择合适的土壤种植中药材及避免农药的间接污染也及其重要。农药残留量是影响中药材质量的重要因素之一，同时成为中药材走向国际市场的拦路虎［12］，因此，降低中药材中农药残留量成为目前急需解决的问题。

［1］刘晓亮，李雪生，刘邵文，等.中草药中13种代表性农药多残留的分散固相净化与气相色谱－质谱法测定［J］.分析化学研究报告，2013，41(4):553 －558.

［2］黄晓会，薛健，吴晓波，等.根茎类中药材有机氯及菊酯类农药多残留分析［J］.中成 药，2012，34(1):100 －104.

［3］国家药典委员会.中国药典(一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:283，附录:IXQ.

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