灯延颗粒对大鼠心肌缺血的保护作用

2015-12-08张宏梅崔佰吉张秀荣

中成药 2015年12期

关键词：后叶素垂体血瘀

张宏梅，崔佰吉，张秀荣

（吉林医药学院药学院，吉林吉林132013）

灯延颗粒对大鼠心肌缺血的保护作用

张宏梅，崔佰吉，张秀荣*

（吉林医药学院药学院，吉林吉林132013）

目的观察灯延颗粒对心肌缺血的保护作用及对血液流变学的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组，模型对照组，阳性对照组，灯延颗粒高、中、低剂量组（3.2、1.6、0.8 g/kg），每组10只。分别采用尾静脉注射垂体后叶素（Pit）和多点皮下注射盐酸异丙肾上腺素（ISO）的方法制备大鼠急性心肌缺血模型，通过给药后不同时间第Ⅱ导联心电图T波变化以及血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的量变化，观察灯延颗粒对心肌缺血的保护作用；采用皮下注射肾上腺素两次，每次0.8 mg/kg，间隔6 h，并在其间进行冷刺激（冰水浸泡5 min）造成血瘀模型，通过血液流变学改变，观察灯延颗粒对血瘀大鼠血液流变学的影响。结果灯延颗粒提取物粉末3.2、1.6 g/kg灌胃给药可明显改善垂体后叶素以及盐酸异丙肾上腺素所致急性心肌缺血大鼠的心电图T波峰值变化百分率；减少血清中LDH、CK的量；3.2、1.6、0.8 g/kg灯延颗粒灌胃给药可明显降低血瘀大鼠全血比黏度，对血浆比黏度有一定降低趋势。结论灯延颗粒具有抗大鼠心肌缺血、改善血液流变学的作用。

灯延颗粒；心肌缺血；血液流变学

灯延颗粒是由灯盏花、延胡索、黄芪3味中药组成的现代复方制剂，具有散寒止痛、益气化瘀功效，主要用于寒凝血瘀型冠心病心绞痛，症见心痛彻背、胸闷憋气、遇寒加重、心悸气短、头晕目眩、舌暗苔白、脉弦细等症的治疗［1］。本实验采用垂体后叶素和异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血模型，观察灯延颗粒对心肌缺血的影响，观察其对血瘀大鼠血液流变学改变的影响，为其防治冠心病、心绞痛提供药理实验依据。

1 仪器与试药

RM6240B型生理实验系统（成都仪器厂制造）；LD5-10型台式离心机（北京医用离心机厂）；FASCO-2050A型全自动血液流变快测仪（重庆大学维多生物工程研究所生产）；GF-D800型半自动生化分析仪（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。

Wistar大鼠，180～230 g，雌雄各半，每次实验体质量差异不超过30 g，购自吉林大学实验动物中心，生产许可证号为SCXK（吉）2008-0005，合格证号为0006997。

灯延颗粒提取物为棕黄色粉末，每克含生药4 g，为本实验室自制；复方丹参滴丸（批号090917，批准文号为国家准字Z10950111，天津天士力制药股份有限公司生产），上述药物以蒸馏水配成所需剂量的混悬液，灌胃给药，正常对照组及模型对照组给予同体积蒸馏水（20 mL/kg）。

垂体后叶素注射液（批号090102，批准文号为国家准字H34022977，蚌埠市宏业生化制药厂）、盐酸异丙肾上腺素注射液（批号 091001，批准文号为国药准字H31021344）、盐酸肾上腺素注射液（批号090803，批准文号为国药准字H31021062）、均为上海禾丰制药有限公司生产；乳酸脱氢酶试剂盒（批号090161）、肌酸激酶试剂盒（批号080391）均为中生北控生物科技股份有限公司生产。

2 方法

2.1 动物分组、给药方案筛选心电图正常的大鼠，随机分为6组，分别为正常对照组，模型对照组，复方丹参滴丸0.755 g/kg组，灯延颗粒3.2、1.6、0.8 g/kg 3组，每组10只。

2.2 统计方法采用SPSS 16.0统计软件进行数据处理，计量资料以表示，采用单因素方差分析进行多组间显著性检验，两组间样本均数比较采用t检验。

3 结果

3.1 对垂体后叶素致大鼠心肌缺血心电图T波变化及大鼠血清中CK、LDH的影响

3.1.1 对垂体后叶素致大鼠心肌缺血心电图T波变化影响

各组动物连续灌胃给药6 d，末次给药后1 h大鼠腹腔注射3%水合氯醛（300 mg/kg）麻醉，四肢仰卧位固定，记录正常Ⅱ导联心电图后，立即尾静脉注射垂体后叶素0.8 U/kg［2-3］，正常对照组给予同体积生理盐水（2 mL/kg），记录给予垂体后叶素后0.5、1、5、10、12、15 minⅡ导联心电图的变化，以正常心电图为标准，观察给予垂体后叶素后T波高度变化，计算给予垂体后叶素后不同时间T波

变化百分率，结果见表1。

结果表明，模型对照组给予垂体后叶素后T波显著抬高，后期可出现低平、双向或倒置，与正常对照组比较有显著差异，灯延颗粒3.2、1.6 g/kg及复方丹参滴丸0.755 g/kg均能显著改善垂体后叶素引起的大鼠心电图改变，表明对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血有明显保护作用。

表1 各组心电图T波变化的比较（n=10）

3.1.2 对垂体后叶素致大鼠心肌缺血大鼠血清中CK、LDH的影响各组大鼠给予垂体后叶素后4 h，腹腔注射3%水合氯醛（300 mg/kg）麻醉，腹主动脉采血，3 000 r/min离心5 min，取血清，以试剂盒测定血清中LDH、CK的量，结果见表2。

表2 各组血清LDH和CK的比较

注：与正常对照组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05

结果表明，同正常对照组比较，模型对照组大鼠血清中LDH、CK的量明显增高。灯延颗粒3.2、1.6 g/kg可明显降低垂体后叶素所致心肌缺血大鼠血清中LDH、CK的量，表明对心肌缺血引起的心肌细胞损伤有明显保护作用。

3.2 对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血心电图T波变化影响

各组动物连续灌胃给药6 d，末次给药后1 h大鼠腹腔注射3%水合氯醛（300 mg/kg）麻醉，四肢仰卧位固定，记录正常Ⅱ导联心电图，立即多点（5～6点）皮下注射盐酸异丙肾上腺素8 mg/kg［4］，正常对照组给予同体积生理盐水（20 mL/kg），记录给予盐酸异丙肾上腺素后5、10、20、30 minⅡ导联心电图，以正常心电图为标准，观察给予异丙肾上腺素后T波高度变化，计算给予盐酸异丙肾上腺素后不同时间T波变化百分率，结果见表3。

表3 各组心电图T波变化的比较

结果表明，模型对照组给予异丙肾上腺素后T波高度显著升高，与正常对照组比较有显著差异，灯延颗粒3.2 g/kg及复方丹参滴丸0.755 g/kg在给药20 min均能显著改善异丙肾上腺素引起的大鼠心电图改变，灯延颗粒1.6 g/kg给药后5 min有明显对抗作用，后期作用不明显，表明对异丙肾上腺素所致大鼠心肌缺血有明显保护作用。

3.3 对异丙肾上腺素致大鼠血瘀大鼠血液流变学的影响

各实验组动物连续灌胃给药6 d，末次给药前1 d，除正常对照组外，各组大鼠皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg 2次，间隔6 h，首次注射3 h后，将大鼠置于0～4℃冰水中刺激5 min［5］，末次给药后1 h，大鼠腹腔注射3%水合氯醛（300 mg/kg）麻醉，腹主动脉采血，肝素抗凝，测定全血比黏度（高切200/s，中切30/s，低切3/s）、血浆比黏度，结果见表4。

结果表明，与正常对照组比较，模型对照组大鼠全血比黏度、血浆比黏度明显增高，表明肾上腺素复合冰水刺激复制血瘀模型成功。灯延颗粒及复方丹参滴丸组大鼠全血比黏度明显降低，血浆比黏度有一定降低趋势，表明灯延颗粒对血瘀大鼠血液流变学改变有明显改善作用。

表4 对血瘀大鼠全血及血浆比黏度的影响

4 讨论

本研究分别采用垂体后叶素和异丙肾上腺素进行大鼠心肌缺血模型的建立，其中垂体后叶素是强烈的血管收缩剂，内含加压素，能明显使冠状动脉、毛细血管、小动脉、小静脉收缩，造成心肌缺血缺氧［6-8］；异丙肾上腺素为人工合成的β受体强激动剂，能诱导心肌产生不可逆的缺血性损伤模型，其机制与脂质过氧化损伤、膜通透性改变、增加心肌耗氧量、心肌钙超载等因素有关［9-10］，心肌缺血时常伴有心电图的异常变化，如T波高耸，J点的偏移等，因此常将T波和J点变化值作为评价心肌缺血损伤程度的重要指标［11-13］。本研究采用T波变化百分率作为保护作用的考察指标，结果显示，两种心肌缺血模型下的灯延颗粒中、高剂量组均有一定的心肌缺血保护作用。其机制可能为改善血管血压、增加血流量，减轻细胞膜损伤程度，稳定细胞膜，同时减轻机体细胞受自由基攻击的严重程度，提高机体清除氧自由基的能力，进而增强了机体抗脂质过氧化的能力。

血液流变学指标的异常是引起缺血性卒中的重要因素，是缺血性卒中重要的病理生理改变，血液流变学检测对防治心脑血管病具有重要意义［14-16］。在低切变率时，血液形成红细胞聚集体，此时的全血黏度值，可以反映红细胞的聚集程度。高切变率下则可反映红细胞的变形程度，高切黏度高，红细胞变形性差；高切黏度低时，红细胞变形性好。本实验研究表明，血瘀性脑缺血大鼠全血黏度及血浆黏度均显著增高，血液流变性出现黏、浓、凝、聚状态的改变。灯延颗粒及复方丹参滴丸组大鼠全血比黏度明显降低，血浆比黏度有一定降低趋势。

本实验显示，灯延颗粒可降低垂体后叶素、异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血心电图T波的变化；显著降低垂体后叶素致大鼠心肌缺血血清中CK、LDH的量；可明显改善异丙肾上腺素致大鼠血瘀模型的全血比黏度，说明灯延颗粒有明显的抗心肌缺血的保护作用，本研究为灯延颗粒的进一步开发提供了实验支持，但其具体的保护作用机制还有待于进一步研究。

［1］周军.花芪通脉颗粒剂的药学研究［D］.第四军医大学学位论文，2006.

［2］王艳，周添浓，侯少贞，等.葛根素对大鼠急性心肌缺血的保护作用［J］.广州中医药大学学报.2008，25（2）：138-141.

［3］王怡，高秀梅，张伯礼.冠心丹参滴丸抗垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的研究［J］.中国中西医结合急救杂志. 2003，10（1）：6-8.

［4］潘志伟，王秋娟，杨涓，等.淫羊藿苷对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的影响［J］.中国药理学通报.2007，23（5）：622-625.

［5］刘婷，秦彩玲，张毅，等.复方丹参方对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板黏聚性及TXB2、6-Keto-PGF1α的影响［J］.中国实验方剂学杂志.2004，10（4）：35-38.

［6］宋亚娟，王欣，张丹丹，等.冠通活瘀胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用［J］.中国临床药理学与治疗学. 2011，16（1）：42-45.

［7］陈科，万峰，刘金铜，等.心泰胶囊对大鼠急性心肌梗死及垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的影响［J］.中华中医药杂志.2012，27（11）：2943-2946.

［8］吴玉玲，王焱，于志瀛.舒心颗粒对垂体后叶素致心肌缺血模型大鼠的影响［J］.中国药房.2012，23（39）：3665-3667.

［9］杨勇，容蓉，陈明强，等.异丙肾上腺素诱导小鼠急性心肌缺血模型的方法比较［J］.中药药理与临床，2010，26（5）：153-155.

［10］潘志伟，王秋娟，杨涓，等.淫羊藿苷对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的影响［J］.中国药理学通报，2007，23（5）：622-625.

［11］方伟蓉，李运曼，邓嘉元.龙血竭总黄酮对动物心肌缺血的保护作用［J］.中国临床药理学与治疗学，2005，10（9）：1020-1024.

［12］贾广乐，董培智.对肾上腺素性心肌缺血模型大鼠相关指标的探讨［J］.中国实验动物学报，2005，13（2）：106-109.