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犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定

2015-10-27李皓洋胡小元易咏竹杨鑫张志芳李轶女

生物技术通报 2015年6期

李皓洋胡小元易咏竹杨鑫张志芳李轶女

(1.中国农业科学院生物技术研究所,北京100081;2.中国农业科学院蚕业研究所,镇江 212018)

犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定

李皓洋1胡小元1易咏竹2杨鑫1张志芳1李轶女1

(1.中国农业科学院生物技术研究所,北京100081;2.中国农业科学院蚕业研究所,镇江 212018)

犬α干扰素(CaIFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的CaIFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对GenBank中的一个CaIFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,并与亲本病毒BmBacmid共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫,收集发病幼虫的蚕血淋巴用于CaIFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的CaIFNα能有效抑制VSV*GFP在细胞内的复制,其抗病毒活性不低于1.78×106U/mL。

犬α干扰素;家蚕杆状病毒表达系统;抗病毒活性检测

干扰素(Interferon,IFN)是一类具有抗病毒活|性、调节细胞增殖分化和免疫调节作用等多种生理活性的细胞因子,在自然免疫以及适应免疫中都发挥着重要作用。IFN于1957年由Isasscs等[1]在进行流感病毒感染鸡胚的实验中首先发现,随后逐渐成为国内外学者的研究热点。IFN因其抗病毒、抗肿瘤和抗寄生虫等功效[2-4],一直被当作一种广谱性治疗药物使用。而天然干扰素的含量非常稀少,而且提取纯化的成本高昂,极大地制约了其广泛应用。因此,应用基因工程手段表达高活性的干扰素产品,一直以来都是生命科学研究的热点问题。……

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