芽孢杆菌复合制剂对断奶仔猪生长、腹泻和饲料消化率的影响
2015-10-21华洵璐钱仁界张宪中匡群孙梅张一平
华洵璐 钱仁界 张宪中 匡群 孙梅 张一平
摘要 [目的]研究不同芽孢杆菌复合制剂对断奶仔猪生长、腹泻和饲料消化率的影响。[方法]对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加“凝结芽孢杆菌+巨大芽孢杆菌”、“酪酸菌+巨大芽孢杆菌”、“凝结芽孢杆菌+酪酸菌”和“凝结芽孢杆菌+酪酸菌+巨大芽孢桿菌”复合制剂，添加量0.2%，饲喂43 d，研究芽孢杆菌复合制剂对断奶仔猪生长、腹泻和饲料消化率的影响。[结果]各试验组均能显著提高平均日增重、增重率、特定生长率和蛋白质效率，显著降低摄食率和饲料系数（P<0.05），其中试验Ⅲ组和Ⅳ组又比试验Ⅰ组和Ⅱ组更显著（P<0.05）。各试验组均能显著降低腹泻率和粪便大肠杆菌数量，显著提高粪便乳酸菌数量（P<0.05），其中试验Ⅲ组和Ⅳ组在降低大肠杆菌上比试验Ⅰ组和Ⅱ组更显著（P<0.05）。各试验组均能显著提高粗蛋白和粗纤维的消化率（P<0.05），但对粗脂肪、粗灰分和磷的消化吸收无影响（P>0.05），其中试验Ⅳ组的粗蛋白消化率最高（P<0.05）。[结论]试验Ⅳ组采用的复合制剂养殖效果最为理想，经济效益最为显著，具有一定的推广应用价值。
关键词 芽孢杆菌;断奶仔猪;生长性能;腹泻;饲料消化率
中图分类号 S963.73 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）03-166-05
Effects of Different Bacillus Complex Preparation on the Growth Performance， Diarrhea and Feed Digestibility in Weaned Piglets
HUA Xunlu1， QIAN Renjie2， ZHANG Xianzhong3， ZHANG Yiping1* et al
（1. Jiangsu Limited Company of Suwei Microbiology， Wuxi， Jiangsu 214063; 2. Wuxi Nanyang Limited Company of Agricultural and Livestock Industry， Wuxi， Jiangsu 214189; 3.Wuxi Master Generalization Station of Fishery and Animal Husbandry， Wuxi， Jiangsu 214036）
Abstract [Objective] This paper was conducted to investigate the effects of a diet supplemented various Bacillus complex preparation on the growth performance， diarrhea and feed digestibility in weaned piglets. [Method] The control group was fed a basal diet. The experiment group Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ， Ⅳ were supplemented “Bacillus coagulans + Bacillus megaterium”， ”Clostridium butyricun + Bacillus megaterium”， “Bacillus coagulans + Clostridium butyricun” and “Bacillus coagulans + Clostridium butyricun + Bacillus megaterium” complex preparation respectively. The supplemented content was 0.2%， and the feeding time was 43 days. Effects of different Bacillus complex preparation on weaned piglets growth， diarrhea and feed digestibility were studied. [Result] All of the experiment groups significantly increased the average daily gain， weight gain rate， specific growth rate and protein efficiency ratio （P<0.05）; significantly decreased the feeding rate and the feed coefficient ratio （P<0.05）; and the experiment group Ⅲ and Ⅳ appeared more significantly than the experiment group Ⅰ and Ⅱ（P<005）. All of the experiment groups significantly decreased the diarrhea rate and the fecal Escherichia coli amount （P<0.05）， significantly increased the fecal Lactic acid bacteria amount （P<0.05）， and the experiment group Ⅲ and Ⅳ appeared more significantly than the experiment group Ⅰ and Ⅱ in the reduce of fecal Escherichia coli amount （P<0.05）. All of the experiment groups significantly increased the digestion rate of crude protein and crude fiber （P<0.05）， but had no effects on the digestion of crude fat， crude ash and total phosphorus （P>0.05）， and the crude protein digestion rate of experiment group Ⅳwas the highest （P<0.05）. [Conclusion] The complex preparation used in experiment group Ⅳhad the best breeding effect， the highest economic benefit， and it had the value of extension and application.
Key words Bacillus; Weaned piglets; Growth performance; Diarrhea; Feed digestibility
芽孢杆菌对培养条件要求簡单，产生的孢子环境耐受性强，进入动物肠道后对动物产生多种益生功效。这些特点使芽孢杆菌成为理想的饲用微生物添加剂，目前普遍使用的主要是产有机酸的芽孢杆菌和好氧的芽孢杆菌[1] 。
凝结芽孢杆菌为兼性厌氧的有孢子性乳酸菌，在动物肠道内能通过产生大量乳酸、抗菌凝固素、氨基酸、维生素和多种消化酶，有效抑制有害菌生长，改良肠道微生态平衡，促进肠道发育和增强肠道功能，促进饲料消化吸收，降低腹泻率和饲料系数[2] 。酪酸菌（又称酪酸梭状芽孢杆菌、丁酸梭菌）为革兰氏阳性厌氧杆菌，能产生对机体具有保健作用的丁酸、B族维生素和维生素K等物质，促进肠道上皮组织细胞再生和修复，促进有益菌增殖，抑制有害菌生长，减少肠毒素发生，提高饲料利用率[3] 。巨大芽孢杆菌为产芽孢的革兰氏阳性好氧菌，具有丰富的胞外酶系，生物夺氧能力强，能保持肠道厌氧环境，促进动物生长，并能降低氨气和硫化氢的排放，改善养殖生态环境[4-5]。
最新研究表明，不同的菌种在动物体内的作用机制不同;动物体内的生物环境在不断变化，不同的作用机制所适应的最佳环境也不同[6] 。多菌种产品能在变化的生物环境中充分利用不同菌种之间的协同机制和竞争抑制效应，达到比单菌种产品更好的效果[7] 。因此，由2种或2种以上不同菌种组成的复合制剂成为目前微生态领域的研究热点[8]。
虽然凝结芽孢杆菌、酪酸菌与巨大芽孢杆菌这3种菌均已在动物养殖上取得了良好效果[9-11]，但迄今为止尚未见将这3种菌进行复配后用于动物养殖的报道。因此，笔者以断奶仔猪为试验对象，研究了这3种菌的不同组合方式对动物生长、腹泻和饲料消化率的影响，以期开发出优势互补、协同增效、益生作用更加显著的新型复合微生物制剂产品，以促进绿色生态养殖业的发展。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 微生物制剂。
凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans JSSWLA）、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium JSSWJD2F5）、酪酸菌（Clostridium butyricun CB7）。各菌株分别经过高密度发酵培养，发酵液离心获得菌体，菌体拌以适当辅料低温烘干而制得菌剂，菌剂中活菌含量5.0×108 cfu/g左右。
1号芽孢杆菌制剂：由凝结芽孢杆菌菌剂与巨大芽孢杆菌菌剂等量混合均匀而得，活菌浓度≥2.5×108 cfu/g;
2号芽孢杆菌制剂：由酪酸菌菌剂与巨大芽孢杆菌菌剂等量混合均匀而得，活菌浓度≥2.5×108 cfu/g;
3号芽孢杆菌制剂：由凝结芽孢杆菌菌剂与酪酸菌菌剂等量混合均匀而得，活菌浓度≥2.5×108 cfu/g;
4号芽孢杆菌制剂：由凝结芽孢杆菌、酪酸菌和巨大芽孢杆菌菌剂等量混合均匀而得，活菌浓度≥1.5×108 cfu/g。
以上试验用微生物制剂均由江苏省苏微微生物研究有限公司提供。
1.1.2 试验动物。
试验采用杜×长×大三元杂交断奶仔猪，由无锡市南洋农畜业有限公司提供。选取发育良好、食欲旺盛、健康、遗传基础相似、初始体质量10～13 kg、（45±2）日龄的断奶仔猪150头，随机分为5组，每组3个重复，每个重复10头仔猪，公母各半。
1.1.3 试验地点。
试验在无锡市南洋农畜业有限公司洛社镇双庙村养殖基地内完成。
1.1.4 试验设计。
共设置4个试验组和1个对照组：①试验Ⅰ组：基础日粮+0.2%的1号芽孢杆菌制剂：②试验Ⅱ组：基础日粮+0.2%的2号芽孢杆菌制剂;③试验Ⅲ组：基础日粮+0.2%的3号芽孢杆菌制剂;④试验Ⅳ组：基础日粮+0.2%的4号芽孢杆菌制剂;⑤对照组：饲喂基础日粮。添加量为每日投入基础日粮重量的2%。
1.2 方法
1.2.1 试验日粮。根据中国瘦肉型猪饲养标准（GB847187）以及江苏省养猪实际，确定断奶仔猪全价日粮的营养水平。基础日粮确定为玉米-豆粕-鱼粉型，占全价日粮的96%，添加剂预混料占全价日粮的4%。日粮配比及营养水平见下表1。
表1 日粮配比与营养水平
日粮配比对照组试验组营养水平含量
玉米∥%58.058.0消化能∥MJ/kg13.85
豆粕∥%25.025.0代谢能∥MJ/kg13.31
鱼粉∥%5.05.0粗蛋白∥%19.00
乳清粉∥%5.05.0粗纤维∥%2.50
大豆油∥%1.01.0粗脂肪∥%5.00
磷酸氢钙∥%0.60.6赖氨酸∥%0.78
石粉∥%1.01.0苏氨酸∥%0.51
食盐∥%0.40.4异亮氨酸∥%0.55
预混料∥%4.04.0蛋氨酸+胱氨酸∥%0.51
活菌剂∥%0.00.2磷∥%0.64
钙∥%0.54
注：预混料可为每千克全价饲料提供VA 8 330 IU、VD1 1 440 IU、VE 30 IU、VK3 2.4 mg、 VB1 66 mg、VB2 8.0 mg、VB6 3 mg、VB12 0.05 mg、胆碱0.65 g、泛酸20 mg、叶酸2.0 mg、烟酸 40 mg、生物素 0.12 mg、铜200 mg、铁180 mg、锌70 mg、锰50 mg、碘0.5 mg和硒0.3 mg。
1.2.2 飼养管理。
各组均饲养在同一栋猪舍内，相互隔开。各组分别饲喂相应日粮，将制剂充分混匀于饲料中生喂，每天投喂3次（7：00、12：00和17：00）。每重复饲养于同一栏内，同一栏内的10头仔猪共同进食，自由采食与饮水，尽量在当天喂完每天的计划饲料量。
猪舍内温度保持在26～32 ℃（于每天上午7：00、12：00和16：30测定并记录温度、相对湿度）。整个试验期间有专人管理。饲养管理、卫生消毒及免疫防疫程序按猪场常规进行。各组的免疫、用药、通风、饮水、喂料方式和时间等均一致。每天观察猪摄食、粪便和死亡情况，并根据实际情况每隔1周增加基础日粮的投饲量。饲养43 d后结束。
1.2.3 生长指标的测定。
饲养结束后，称量每栏试验猪的总重，计算平均日增重、增重率、特定生长率、摄食率、饲料系数和蛋白质效率等指标，计算公式如下：
平均日增重（g/头）=（平均终末体重-平均初始体重）/试验天数（1）
增重率（%）=[（平均终末体重-平均初始体重）/平均初始体重]×100（2）
特定生长率（%）=[（ln平均终末体重-ln平均初始体重）/试验天数]×100（3）
摄食率（%）=[干物质摄入量/试验天数×（初始体重+终末体重）/2] ×100（4）
饲料系数（料肉比）=总耗料量/总增重量（5）
蛋白质效率（%）=[（试验末猪体重-试验初猪体重）/饲料蛋白摄入量] ×100（6）
1.2.4 腹泻指标的测定。
每天早上定时记录腹泻头数，观察每栏的粪便情况，并计算腹泻率和腹泻指数：
腹泻率（%）=总腹泻次数/（总头数×试验天数）×100%（7）
腹泻指数=粪便评分之和/供试猪头数（8）
表2 腹泻评分标准
程度粪便外观评分
正常条形或粒状0
轻度软粪、能成形1
中度软粪，不成形，粪水无分离现象3
严重液状，不成形，粪水有分离现象5
安徽农业科学 2015年
1.2.5 粪便指标的测定。
于试验结束日的当天清晨，从每组选6头接近平均体质量的仔猪，肛门采集新鲜粪样，装入无菌三角瓶中，立即放入冰箱保存备测。
1.2.5.1 粪中微生物含量的测定。
取10 g粪样于带玻璃珠的无菌三角瓶内，加入90 ml无菌生理盐水，充分振荡，即为10-1稀释液，吸取1 ml此液于盛有9 ml无菌蒸馏水试管中进行10-2稀释，振荡均匀，并依次进行10-3～10-9倍稀释。将各稀释液0.1 ml涂布于伊红美蓝培养基平皿上，37 ℃下培养48 h后进行菌落计数，计算大肠杆菌含量[12]。将各稀释液涂布于MRS培养基平皿上，37 ℃下培养48 h后进行菌落计数，计算乳酸菌含量[13]。
1.2.5.2 粪中表观消化率的测定。
参照国家标准GBT64321994、GBT64332006、GBT64382007、GBT64342006和GBT64372002的方法测定试验期间饲料以及粪便中的粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维和总磷的含量。4 mol/L盐酸不溶灰分的含量测定参照《饲料分析与检测》[14]。按照以下公式计算养分表观消化率：
养分表现消化率（%）=100%-饲料4 mol/L盐酸不溶灰分含量×粪中某养分含量粪中4 mol/L盐酸不溶灰分含量×饲料中该养分含量×100%（9）
1.2.6 数据统计与分析。
试验数据均采用SPSS（Ver.11.5）统计软件进行统计与分析，采用邓肯氏（Duncan）法进行多重比较，P<0.05表示差异显著。试验结果均以平均值±标准差（±SD）表示。
2 结果与分析
2.1 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪增重效果的影响
对断奶仔猪的养殖试验，从45日龄开始到88日龄结束。从表3可以看出，试验Ⅰ组分别比对照组提高了11.78%、12.91%和805%，试验Ⅱ组分别比对照组提高了15.05%、13.82%和847%，试验Ⅲ组分别比对照组提高了27.26%、29.97%和1737%，试验Ⅳ组分别比对照组提高了29.44%、35.07%和1992%。各试验组的3项增重指标均比对照组有显著提高（P<0.05），表明设计的芽孢杆菌组合制剂均能对断奶仔猪起到增重作用。
试验Ⅲ组和试验Ⅳ组增重效果无明显差异（P>0.05），但都比试验Ⅰ组和试验Ⅱ组有显著提高（P<0.05），并且试验Ⅳ组的增重效果稍高于试验3组，表明凝结芽孢杆菌与酪酸菌联用能明显促进仔猪的生长，而巨大芽孢杆菌对这种促生长作用具有增加的趋势。
表3 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪增重效果的影响
组别始重∥kg/头末重∥kg/ 头平均日增重∥g/头增重率∥%特定生长率∥%
试验Ⅰ组11.88±1.3535.50±2.63549.30±57.9 b198.82±2.27 b2.55±0.78 b
试验Ⅱ组12.13±0.5136.44±2.37565.35±78.4 b200.41±2.63 b2.56±0.54 b
试验Ⅲ组11.75±1.0538.64±2.71625.35±47.3 c228.85±2.73 c2.77±1.02 c
试验Ⅳ组11.50±1.1638.85±2.20636.05±56.4 c237.83±2.26 c2.83±0.40 c
对照组12.00±1.2533.13±2.13491.40±75.0 a176.08±2.58 a2.36±0.35 a
注：同列不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。
2.2 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪饲料报酬的影响
由表4可知，断奶仔猪饲喂不同芽孢杆菌制剂后，饲料报酬均有提高。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组断奶仔猪的摄食率分别比对照组降低了4.11%、6.68%、10.80%和11.05%，而饲料系数分别比对照组降低了10.06%、12.85%、21.79%和23.46%，而蛋白质效率分别比对照组提高了10.99%、14.55%、27.64%和30.50%，表明各试验组均能降低摄食率和饲料系数，提高蛋白质效率。其中，试验Ⅲ组和试验Ⅳ组的效果最为明显，摄食率和饲料系数均比对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组有显著下降（P<005），蛋白质效率则有显著提高（P<0.05），表明凝结芽孢杆菌与酪酸菌联用，或与巨大芽孢桿菌三者联用，在提高饲料利用率和节约饲料方面，均比“凝结芽孢杆菌+巨大芽孢杆菌”或“酪酸菌+巨大芽孢杆菌”的组合方式更为有效。
表4 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪饲料报酬的影响
组别总耗料量∥kg总增重量∥kg摄食率∥%饲料系数蛋白质效率∥%
试验Ⅰ组1 140.85708.603.73±0.38 b1.61±0.05 b337.56±7.16 b
试验Ⅱ组1 137.71729.303.63±0.82 b1.56±0.02 b348.38±6.28 b
试验Ⅲ组1 129.38806.703.47±0.96 c1.40±0.08 c388.19±9.64 c
试验Ⅳ组1 123.59820.503.46±0.81 c1.37±0.05 c396.88±4.72 c
对照组1 132.78633.903.89±0.64 a1.79±0.07 a304.13±7.92 a
注：同列不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。
2.3 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪腹泻和粪便微生物菌群的影响
试验期间，对照组和试验组均未出现仔猪因拉稀而死亡的现象，但根据每日粪便状况的观察记录，对照组出现的总腹泻次数达235次，腹泻率达18.22%，腹泻指数也远远高于各试验组（P<0.05）;各试验组的腹泻率和腹泻指数基本相近（P>0.05）（表5）。由此说明，添加的各种芽孢杆菌制剂均能有效降低腹泻率和腹泻指数，并且它们相互之间的差异不大。
由表5可知，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组粪便中的大肠杆菌数量比对照组有显著下降（P<0.05），而试验Ⅲ组和试验Ⅳ组又比试验组Ⅰ和Ⅱ进一步下降（P<0.05），表明凝结芽孢杆菌与酪酸菌这两种厌氧芽孢杆菌的联合添加，在抑制有害菌生长方面比单独添加效果更为明显。试验Ⅳ组的大肠杆菌数量与试验Ⅲ组处于同一数量级，但数值相对较低，表明好氧的巨大芽孢杆菌能一定程度上协同凝结芽孢杆菌与酪酸菌一起抑制有害菌的生长。
由表5可知，各试验组粪便中乳酸菌数量均比对照组有显著提高（P<0.05），并且处于同一数量级的试验Ⅳ组乳酸菌相对较高，表明添加的芽孢杆菌制剂能明显促进乳酸菌的增殖，提高在肠道和粪便中的数量，而巨大芽孢杆菌对这种提高具有一定的协同辅助作用。
2.4 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪饲料养分表观消化率的影响
由表6可知，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的粗蛋白表观
消化率分别比对照组提高了8.67%、6.20%、10.88%和
表5 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪腹泻和粪便微生物菌群的影响
组别腹泻率
%腹泻指数大肠杆菌
106 cfu/g乳酸菌
107 cfu/g
试验Ⅰ组5.84±0.18b1.080±0.02b26.52±0.69b37.20±0.83 b
试验Ⅱ组9.28±0.27 b1.570±0.01 b33.40±0.76 b29.58±1.39 b
试验Ⅲ组7.42±0.16 b1.325±0.07 b9.69±0.18 c 42.03±0.95 b
试验Ⅳ组4.73±0.34 b1.125±0.03 b3.06±0.13 c90.80±0.28 b
对照组18.22±0.78 a2.985±0.07 a104.02±0.68 a8.57±0.27 a
注：同列不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。
20.17%，差异极显著（P<0.05），其中试验Ⅳ组的粗蛋白表观消化率提高幅度最大，明显高于其他3个试验组（P<005），表明凝结芽孢杆菌、酪酸菌与巨大芽孢杆菌3种菌的联合添加，能极大促进饲料蛋白的消化吸收。各试验组的粗纤维表观消化率分别比对照组提高了28.62%、32.52%、2908%和34.51%，差异极显著（P<0.05），但各试验组间无明显差异（P>0.05），表明不同芽孢杆菌制剂均能提高仔猪对饲料中粗纤维的消化吸收率，各制剂的作用效果相近。
由表6可知，各试验组粗脂肪、粗灰分和磷的表观消化率与对照组差异不显著（P>0.05），表明设计的不同芽孢杆菌制剂对饲料中粗脂肪、粗灰分和磷的消化吸收无影响。
表6 不同芽孢杆菌制剂对断奶仔猪饲料养分表观消化率的影响
组别粗蛋白含量∥%粗纤维含量∥%粗脂肪含量∥%粗灰分含量∥% 总磷含量∥%
试验Ⅰ组81.72±2.01 b47.86±5.28 b71.79±3.75 a45.94±4.68 a35.82±5.07 a
试验Ⅱ组79.86±3.62 b49.31±4.65 b72.61±2.86 a45.08±2.35 a37.09±8.85 a
试验Ⅲ组83.38±1.51 b48.03±6.39 b70.84±4.47 a46.64±5.71 a32.88±6.02 a
试验Ⅳ组90.37±3.10 c50.05±3.04 b73.42±3.73 a47.96±3.06 a36.05±3.66 a
对照组75.20±1.82 a37.21±4.63 a70.58±3.08 a45.73±4.28 a33.62±5.95 a
注：同列不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。
2.5 经济效益分析
由表7可知，对照组头均饲料单价为4.43元，试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组饲料单价为4.462元/头，试验Ⅳ组饲料单价为4.466元/头，仔猪价格按12元/kg计算，则试验Ⅰ组、Ⅱ組、Ⅲ组和Ⅳ组每头猪毛收入分别比对照组增加27.47、36.24、68.41和74.67元，表明各试验组的芽孢杆菌复合制剂均能提高经济效益，其中又以试验Ⅳ组的菌剂提高幅度最大;并且这种经济效益的提高主要是因为头均重量增加的缘故，而不是饲料成本的节省。
表7 添加不同芽孢杆菌制剂的经济效益分析
组别仔猪增重
kg/头仔猪售价
元/头耗料量
kg/头芽孢杆菌制剂
成本∥元/头饲料单价
元/头饲料成本
元/头毛收入
元/头
试验Ⅰ组23.62283.4438.030.0324.462169.69113.75
试验Ⅱ组24.31291.7237.920.0324.462169.20122.52
试验Ⅲ组26.89322.6837.650.0324.462167.99154.69
试验Ⅳ组27.35328.2037.450.0364.466167.25160.95
对照组21.13253.5637.7604.430167.2886.28
3 讨论与结论
3.1 不同芽孢杆菌复合制剂对仔猪生产性能的影响
吴建忠[15]将乳酸芽孢杆菌用于断奶仔猪的养殖，日增重率提高了978%（P<0.05），饲料系数降低0.14（P<0.05）。笔者在凝结芽孢杆菌的基础上再增加巨大芽孢杆菌，能将断奶仔猪的日增重率提高11.78%（P<0.05），饲料系数降低0.18（P<0.05）。王保正等
[16]将酪酸菌用于断奶仔猪的养殖，头均日增重比对照组提高94 g，饲料系数降低0.01。笔者在酪酸菌的基础上再增加巨大芽孢杆菌，头均日增重比对照组提高73.95 g（P<0.05），饲料系数降低0.23（P<0.05）。该研究结果表明，由2种不同菌种组成的复合制剂，其养殖效果要好于单一菌种，可能是因为巨大芽孢杆菌属于好氧菌，进入动物肠道后该菌首先进行繁殖，产生多种酶和维生素，并迅速消耗残留的氧气，为另外2种厌氧菌的繁殖提供了良好的环境，促进它们的定植和生长，相互协同，从而起到更有效的益生作用。
通过检索国内外文献，还未见到将凝结芽孢杆菌与酪酸菌联合用于动物养殖的报道。该研究结果表明这2种菌的复合制剂能明显促进断奶仔猪的生长、提高饲料报酬，养殖效果明显好于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组（P<0.05）。究其原因，可能是因为这2种菌分别通过不同的途径和机制来调节微生态平衡，从而产生促进生长的合力作用;另外，凝结芽孢杆菌产生的L-乳酸具有较强的酸性，强酸性环境使得酪酸菌产生的丁酸不易离解，只有未离解的分子态丁酸才能更好地给肠上皮细胞组织提供能量，促进受损细胞的修复。
该研究中试验Ⅳ组采用的“凝结芽孢杆菌+酪酸菌+巨大芽孢杆菌”组合在增重效果和饲料报酬方面虽与采用“凝结芽孢杆菌+酪酸菌”组合的试验Ⅲ组无显著差异（P>005），但对提高各项生产性能均有一定的促进趋势，经济效益在所有试验组中是最高的，其原因与试验Ⅰ组和试验Ⅱ组相类似，即巨大芽孢杆菌除了本身能产生丰富的胞外酶系和大量益生活性物质外，还具有较强的生物夺氧能力，能为凝结芽孢杆菌、酪酸菌和其他益生菌营造更严格的厌氧环境，从而促进它们的生长和功能的发挥。
3.2 不同芽孢杆菌复合制剂对仔猪腹泻和粪便菌群的影响
微生态制剂在降低动物消化道有害菌群数量，提高有益菌方面的积极作用，已有较多的研究报道[17]，该研究采用不同的芽孢杆菌复合制剂也得到了相同的结论。
该试验结果表明，试验Ⅲ组和试验Ⅳ组的粪便大肠杆菌数量比试验Ⅰ组和试验Ⅱ组又有明显降低（P<0.05），其可能原因是试验Ⅲ组和Ⅳ组同时采用了2种产酸的芽孢杆菌，即凝结芽孢杆菌产生的L-乳酸和酪酸菌产生的丁酸能使仔猪肠道pH比其他2个试验组低，以及它们之间在其他生理功效方面的互补和累加效应，从而能协同地抑制大肠杆菌的生长和繁殖。试验Ⅳ组则还有巨大芽孢杆菌对2种厌氧芽孢杆菌的协同辅助作用以及本身强烈的生物夺氧作用，使仔猪肠道pH和氧气含量更低，从而更有利于抑制大肠杆菌等病原菌的生长。
高媛媛等[18] 将丁酸梭菌与好氧的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等一起饲喂断奶仔兔，能显著提高仔兔盲肠中乳酸菌含量（P<0.05）。该研究中试验Ⅳ组将酪酸菌、凝结芽孢杆菌与好氧的巨大芽孢杆菌一起饲喂断奶仔猪，也取得了类似的结果;虽然该组在提高乳酸菌数量上与其外3个试验组无显著差异（P>0.05），但该组的乳酸菌数值在所有试验组中是最高的。因此，好氧芽孢杆菌的添加能一定程度上协同产酸的厌氧芽孢杆菌一起促进乳酸菌的生长与繁殖。
3.3 不同芽孢杆菌复合制剂对仔猪饲料养分表观消化率的影响
芽孢杆菌进入动物肠道后，能通过产生大量的胞外酶，如蛋白酶、淀粉酶和纤维酶等，促进动物对营养物质的消化吸收[19]。该试验结果也表明添加凝结芽孢杆菌、酪酸菌与巨大芽孢杆菌的不同组合制剂后，能显著提高仔猪对饲料蛋白质和纤维素的消化吸收（P<0.05）。该试验结果还表明，同时添加3种菌的试验4组，粗蛋白表观消化率提高幅度最大，明显高于其他3个试验组（P<0.05），原因可能是3种不同的菌产生的蛋白酶种类更丰富、酶解系统较完善的缘故。
丁祥力等[20]采用乳杆菌与酵母菌组成的复合制剂饲喂生长猪，能提高对粗脂肪和总磷的表观粪消化率，而该试验中添加的芽孢杆菌复合制剂对粗脂肪和总磷的消化吸收无影响，这可能与试验菌剂、试验条件和试验猪种的不同有关;此外，微生态益生菌产生的过量酶有可能抑制机体内源性脂肪酶、磷代谢酶的活性和分泌等，从而整体上降低对这些营养物质的分解作用。
3.4 今后研究方向
据报道，芽孢杆菌的作用效果与使用剂量有关，有一个最适添加量[21]。笔者仅考察了一种添加剂量（0.2%）对断奶仔猪的影响，结果表明能够促进仔猪的生长、降低饲料系数和腹泻率、提高饲料消化吸收率。下一步的工作是进一步考察不同添加量芽孢杆菌复合制剂制剂对断奶仔猪以及其他养殖动物的影响，建立制剂的标准化养殖管理操作规程。
作为新型的复合型微生态制剂，笔者仅研究了它们对断奶仔猪生产性能的影响，下一步应深入研究对断奶仔猪生理生化特性指标、肠黏膜形态结构、肠道微生物区系和氨气排放的影响，以进一步弄清楚这些制剂的功能和作用机理。此外，还需要对这些制剂的生产工艺、拮抗性和安全性等方面进行深入研究。
笔者以不同组合的芽孢杆菌复合制剂饲喂断奶仔猪，根据养殖试验结果并结合经济效益分析，证明“凝结芽孢杆菌+酪酸菌+巨大芽孢杆菌”的复合制剂养殖效果最好，经济效益最为显著，该制剂及其使用方式对我国的饲料工业和绿色养殖业具有一定的推广运用价值。
参考文献
[1] 胡学智，王俊.饲用益生菌的现状、生产及其使用效果[J].山东食品发酵，2012（166）：31-35.
[2] 董惠钧，姜俊云，郑立军，等.新型微生态益生菌凝结芽孢杆菌研究进展[J].食品科学，2010，31（1）：292-294.
[3] 宋会仪，吴天星.酪酸菌微生态制剂的生物学功能及在饲料中的应用[J].饲料工业，2006，27（12）：10-11.
[4] 储晨亮，孙爱娟.芽孢杆菌对蛋鸡生产性能的影响[J].饲料广角，2011（1）：28-29.
[5] 霍永久，张艳云，施青青，等.芽孢杆菌1259制剂对生长育肥猪生产性能及猪粪氨气产生量的影响[J].江苏农业科学，2012，40（2）：159-161.
[6] 戴荣国，曹国文，姜永康，等.不同益生菌组合对断奶仔猪生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医，2005（10）：35-36.
[7] 张德元，丁祥力.饲用复合微生物制剂的使用技术研究[J].湖南农业科学，2009（8）：136-138.
[8] 孙晓飞，边连全，刘显军，等.复合菌制剂及其在断奶仔猪生产上的应用[J].湖北农业科学，2009，48（9）：2202-2205.
[9] 李国建.凝结芽孢杆菌替代抗生素对猪生产性能的影响[J].河南农业科学，2004（10）：72-74.
[10] 陈志虹，魏光伟，唐兴刚，等.酪酸菌制剂对大猪生产性能及飼喂成本的影响[J].黑龙江畜牧兽医，2012（1）：61-62.
[11] 李晓刚，顾欢，孙龙生，等.巨大芽孢杆菌1259对蛋鸡生产性能，养分消化率及血清指标的影响[J].江苏农业科学，2012，40（3）：171-173.
[12] 陈天寿.微生物培养基的制造与应用[M].北京：中国农业出版社，1995：82-83.
[13] 凌代文，东秀珠.乳酸细菌分类鉴定及试验方法[M].北京：中国农业出版社，1999：62-65.
[14] 贺建华.饲料分析与检测[M].北京：中国农业出版社，2005：95-98.
[15] 吴建忠.乳酸芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生产性能的影响[J].韶关学院学报：自然科学版，2007，28（9）：98-99.
[16] 王保正，杨清付，董晓东，等.酪酸菌对猪生长特性的影响[J].饲料工业，2007，28（16）：39-40.
[17] 张董燕，季海峰，徐炜玲.益生菌对动物肠道微生物生态学影响的研究进展[J].中国畜牧兽医，2007，34（3）：15-18.
[18] 高媛媛，郁建平，王文博.微生态制剂对断奶仔兔肠道微生物菌群与肠道形态结构的影响[J].山地农业生物学报，2011，30（2）：185-188.
[19] 曹煜成，李卓佳，文国樑，等.芽孢杆菌胞外产物的研究进展[J].湛江海洋大学学报，2005，25（6）：97-100.
[20] 丁祥力，莫云，谭周进，等.复合微生物制剂饲喂猪的效果试验[J].湖南农业科学，2009（9）：159-160.
[21] 周映华，周小玲，吴胜莲，等.不同剂量枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能及腹泻的影响[J].饲料博览，2012（4）：29-31.
