摘要[目的]建立基于竞争酶联免疫分析（ELISA）的大豆蛋白饮料中大豆蛋白定量方法。[方法]以变性的大豆球蛋白和β伴球蛋白为抗原，分别制备抗这2种蛋白的多克隆抗体，构建竞争ELISA方法。分析了9个品系的大豆球蛋白、β伴球蛋白、可溶蛋白的含量。基于大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和与可溶蛋白的比例关系，得出了植物蛋白饮料中大豆蛋白含量的计算方法。[结果]该方法的线性范围均为2.0～80 μg/ml（R2=0.99），样品前处理使用含有0.1% 二硫苏糖醇（DTT）的7 mol/L尿素作为提取液。大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和除以系数0.682可换算得到蛋白饮料中大豆蛋白含量，方法的相对标准偏差<12%。[结论] 研究可为其他热加工食品的蛋白特异性定量提供参考。

关键词大豆；大豆蛋白；ELISA；定量

中图分类号S509.9文献标识码A文章编号0517-6611（2015）21-245-04

大豆蛋白含有多种氨基酸，尤其是含有人体所必需的8种氨基酸，是一种全价的蛋白质[1]。在我国，自古以来，大豆都是人类饮食中的重要食品。近年来，大豆蛋白饮料，因其味美、营养、低胆固醇越来越受到消费者的喜爱。大豆蛋白饮料包括豆浆、液态豆奶等品种。国家标准GB 16322-2003《植物蛋白饮料卫生标准》规定，植物蛋白饮料中的蛋白质含量应不低于5 g/L。由于技术所限，目前只能依据凯氏定氮法对其总蛋白进行定量，三聚氰胺事件给依赖这一传统技术手段进行蛋白检测的方法敲响了警钟。虽然现在对三聚氰胺的控制卓有成效，但是对非法添加物的监控仍然是针对已知的、具体的物质进行检测。合成化学的飞速发展导致可以冒充蛋白质的物质众多，制假者的手段也在不断翻新，假如利用其他物质冒充蛋白，现有技术很难发现。……